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纯阳正气胶囊挥发油的质量标准研究

韦飞雪 李小菊 熊斯斯 廖云芳 陈敏

温瑞睿, 许龙, 朱文静, 杨建伟. 浅谈国外药师主导开展戒烟服务的作用与挑战[J]. 药学实践与服务, 2024, 42(12): 537-541, 548. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202408054
引用本文: 韦飞雪, 李小菊, 熊斯斯, 廖云芳, 陈敏. 纯阳正气胶囊挥发油的质量标准研究[J]. 药学实践与服务, 2022, 40(6): 557-562. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202201042
WEN Ruirui, XU Long, ZHU Wenjing, YANG Jianwei. A brief discussion on the development and challenges of smoking cessation services led by pharmacist abroad[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2024, 42(12): 537-541, 548. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202408054
Citation: WEI Feixue, LI Xiaoju, XIONG Sisi, LIAO Yunfang, CHEN Min. Study on quality standards of volatile oil of Chunyang Zhengqi capsules[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2022, 40(6): 557-562. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202201042

纯阳正气胶囊挥发油的质量标准研究

doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202201042
详细信息
    作者简介:

    韦飞雪,本科,执业药师、工程师,研究方向:药物分析,Email:fanshisqzr@163.com

    通讯作者: 陈 敏,本科,执业药师、工程师,研究方向:药物分析,Email:kitty_811022@163.com
  • 中图分类号: R284.1[

Study on quality standards of volatile oil of Chunyang Zhengqi capsules

  • 摘要:   目的  建立纯阳正气胶囊挥发油的质控方法。  方法  采用GC法建立挥发油的特征图谱,并测定桂皮醛与丁香酚的含量。  结果  15批样品中确定了19个共有峰,指认了峰的归属,选取了9个特征峰建立了特征图谱。桂皮醛与丁香酚分别在0.522~1.565 mg/ml(r=0.9994)和3.038~9.115 mg/ml(r=0.9997)范围内线性良好,平均回收率分别为97.1%和97.3%,RSD分别为1.5%、1.4%。  结论  所建立的GC特征图谱及含量测定方法可从定性和定量两方面控制纯阳正气胶囊挥发油的质量,方法准确、可行,可作为纯阳正气胶囊挥发油的质量控制方法。
  • 烟草流行是世界有史以来面临的最大公共卫生威胁之一,全球每年有800多万人由于烟草而死亡[1],吸烟不仅是各种非传染性疾病常见的主要风险因素,尤其是慢性呼吸道疾病、心血管疾病、癌症和糖尿病,同时会影响周围人的健康,而且对个人和国家的经济及社会形象产生负面影响[2]。据估计,每年全球消耗治疗烟草相关疾病的费用约1.4万亿美元[1]

    戒烟是降低非传染性疾病风险的最重要有效的干预措施之一。随着公共卫生工作的防范与发展,60%的烟草使用者希望戒烟[3],但只有约35%能够获得全面的戒烟服务,患者的戒烟意愿突显了在医疗系统内扩大戒烟可及服务及优先开展戒烟治疗的重要性[4-5]

    由于尼古丁的成瘾性,依靠吸烟者以自我管理的方式戒烟实施困难。事实证明,医疗保健专业人员提供的戒烟干预措施比自助式戒烟更有效[6]。药师的工作职责是为公众调配处方、提供用药指导与建议、解答用药咨询等,被认为是为公众提供戒烟服务的最佳专业人员,不仅能够指导其正确使用戒烟替代药品及提供相关建议,同时也可以给予戒烟行为上的专业支持[6-7]

    药师及其药房团队提供的戒烟服务有助于帮助吸烟者戒烟 [8]。葡萄牙进行的一项研究发现,接受药师服务的患者相较于对照组会参加更多社区药房主导的用药咨询(χ2=59.994,P<0.001)、更多电话会议(χ2=17.845,P<0.0013),因此戒烟成功率更高[9]。新加坡一家三级转诊皮肤病中心进行的一项单中心回顾性研究评估了由药师领导的结构化戒烟诊所的疗效,表明药师及其药房团队主导的患者咨询服务能有效为戒烟者提供行为支持[10]

    1.2.1   世界卫生组织的号召与行动

    1998年,世界卫生组织(WHO)首次认识到药师在帮助个人戒烟和防止潜在使用者方面的关键作用[11]。2003年为应对全球烟草流行,WHO成员国通过了《世界卫生组织烟草控制框架公约》(WHO FCTC)[12-13],要求缔约方采取有效措施促进戒烟。WHO FCTC是促进公众健康的一个里程碑,自2005年生效以来,WHO FCTC已有183个缔约方,涵盖90%以上的世界人口[14]

    为了扩大实施WHO FCTC中关于减少烟草需求的条款,WHO在2007年还启动了一项具有成本效益的实用行动MPOWER系列措施[15]。MPOWER措施中的策略与WHO FCTC相一致,已证明在挽救生命和降低医疗卫生费用方面卓有成效[1]。然而随着WHO FCTC的成功实施,一些中低收入国家也面临着来自烟草产业对其干扰的重大障碍[16-17]。药师可以在克服这些问题及现有制度和行业体系结构进行重大变革中发挥一定作用,为促进烟草控制和戒烟工作做出应有的贡献[18]。2019年WHO发布的全球烟草流行报告中,强调了药师为吸烟者戒烟提供帮助,并高度鼓励成员国就此采取行动[19]

    目前,151个国家至少实施了WHO FCTC及MPOWER措施中的一项,150个国家的烟草使用率正在下降。2000年,全世界大约1/3的成年人吸烟,然而,到2022年这一数字已大幅下降约1/5,这反映出各国在减少全球烟草消费方面取得了相当大的进展[20]

    1.2.2   国际药学会的响应与行动

    2003年,国际药学会(FIP)发布了关于药师在促进无烟未来中的作用的政策声明。2007年出版的《遏制烟草流行病:药学的全球作用》和2015年出版的《建立无烟社区:药师实用指南》均强调了药师在戒烟服务方面的重要贡献。

    2023年,FIP出版《支持戒烟和治疗烟草依赖:药师手册》强调药师在为寻求戒烟患者提供系统服务方面的关键作用,是药师支持个人戒烟过程中可参考的综合性实用资源。其涵盖了最新的循证实践、技术和策略,以帮助患者戒烟并减少复吸。该手册详细介绍了以药师为主导的支持戒烟所需的专业知识和实践技能,以及药师可干预的因素(包括非传染性疾病风险因素,如运动不足、不健康饮食习惯和过量饮酒等)及相关措施。随着近年来替代品电子烟使用的增多趋势,出于对电子烟安全性的担忧,同年FIP又发布了《关于电子烟使用对公众健康和经济的影响以及药房工作人员对消除电子烟贡献的声明》[21]

    2024年,WHO和FIP就药师在戒烟中的作用发表了一份新的联合声明,重申了药师在帮助吸烟者戒烟中发挥的关键作用。该声明中,WHO和FIP敦促各个国家烟草控制组织和国家药学协会制定并实施戒烟计划,同时在该计划和各国卫生系统服务的背景下,让药师参与到与烟草的斗争工作中[22]

    有研究表明患者更愿意社区药师参与戒烟服务[23],同时社区药师也有能力开展戒烟服务[24]。美国一家三级护理医院进行的一项研究表明,药师无论是在患者入院还是出院时,都可以对患者开展戒烟宣教与指导,在了解患者疾病与用药史、药物核对和出院咨询工作流程中与患者讨论吸烟问题,通过患者住院期间开展戒烟治疗并不断完善方案,达到有效戒烟的目的[25]

    英国在新型冠状病毒流行期间进行的一项研究表明,药师可以通过远程咨询为戒烟患者开具处方,提供有效的戒烟服务。目前,英国国家医疗服务体系(NHS)正在支持现有药师(包括社区药房药师)获得处方资格,根据患者需要开具戒烟药物从而促进戒烟服务开展。计划到2026年,在英国完成药学学位的毕业生将在监管机构注册为独立处方权药师, 进而扩大了可以提供戒烟服务药师的范围[26]

    美国药师有权根据合作处方协议或通过州范围的协议拥有自主处方权或授权开具处方。处方医生将开启、修改和停止药物治疗以及开具实验室检查的权利委托给药师。药师在完成继续教育课程后,可以根据国家法律法规授予的权限开具某些药物[27]

    药师的戒烟培训应包括基于行为支持的社区药师培训课程,通过戒烟服务个体化随访识别障碍并提供积极的强化措施,可以有效提高患者戒烟率,进而提高其生活质量[28]。El Hajj等[29]在卡塔尔进行的一项随机对照试验评估了戒烟培训计划对药师技能和能力的影响,共有86名社区药师(干预组54名,对照组32名)完成了6个目标结构化临床检查病例。研究结果表明,强化戒烟培训显著提高了社区药师提供戒烟服务的技能和能力。

    在一项评估埃塞俄比亚药师和药学学生对吸烟/戒烟的知识和态度的横断面调查中,与未接受过戒烟培训的人相比,接受过培训人员的平均知识和态度得分明显更高[30]。Greenhalgh等[31]通过定性和混合方法进行的描述性综合和真实世界调查表明,精心设计的戒烟培训课程将药师从生物医学和产品导向的角度,转变为以公共卫生和患者为中心的角度方面发挥至关重要的作用。

    促进戒烟的跨专业合作可以提高患者的戒烟率。一项探索医疗卫生保健专业人员与社区药师之间跨专业合作的研究表明,将社区药师为患者提供戒烟服务纳入患者护理项目是很有价值的,社区药房开展戒烟支持服务可以填补现有医院戒烟与家庭戒烟之间的空白。跨专业合作不仅为患者和医疗保健专业人员之间的有效沟通提供了途径,同时通过医疗保健专业人员汇总的患者电子健康记录,可以提高患者用药治疗的安全性[32]

    根据Greenhalgh等[31]的说法,增加药师和其他医疗从业者之间的跨专业互动是社区药房提供有效戒烟服务的先决条件。药师专业的能力增强了临床医生对药师的信任,因此,明确且精准的转诊途径,特别是当地全科医生将戒烟患者转诊给药师,对于跨专业开展戒烟服务是必要的。

    Bouchet-Benezech等[33]在法国进行的一项研究表明,与其他医疗保健专业人员的合作是发挥药师在戒烟服务中作用的关键之一。药师为戒烟者提供的尼古丁替代治疗处方没有得到社会医疗保险体系的支持,因此建议药师与具有尼古丁替代治疗处方权的其他医疗保健专业人员合作。

    吸烟是非传染性疾病的主要可变风险因素之一。药师主导的戒烟干预措施可以显著影响吸烟者的戒烟率,并在改善其健康状况方面发挥关键作用[34]

    Peletidi等[35]的调查研究表明,以社区药师主导的戒烟服务可以降低与吸烟相关慢病的发病率和病死率。Bouchet-Benezech等[33]为评估法国社区药房药师提供戒烟服务的可行性而进行的一项研究显示,在第6个月,23.3%的参与者参加了随访,其中75%的参与随访者自第一次随访以来一直保持戒烟状态,超过一半的参与者持续了90 d,从第二次随访开始,所有参与者的身心健康综合得分与基线相比都有所提高。

    药师作为一线医疗保健提供者,在戒烟工作中发挥着关键作用,可以在更大范围内对个体和公共健康产生重大影响。社区药房的戒烟服务应该被纳入国家公共卫生保健政策,这对于促进社区服务的健康有积极的促进作用[36]

    Peletidi等[35]在英国进行的一项系统综述强调了将药房主导的戒烟服务与对照组进行比较的研究,提供了强有力的证据证明药房主导的服务具有很高的成本效益。药房主导的服务要求每位戒烟者在为期4周的方案中支付772英镑的补充成本,而对照组基于集体小组的服务需要1 612英镑的戒烟补充成本。同时接受药房主导的戒烟服务,每周一对一的支持结合尼古丁替代疗法的治疗,与对照组接受集体戒烟治疗药物相比具有更高的有效戒烟率。此外,药房主导的服务每生命质量调整年的增量成本为2 600英镑,而对照组为4 800英镑。

    社区药师是提供戒烟服务的一种可获得的、未充分利用的但具有成本效益的资源[24,28,35]。一项随机试验旨在比较两个药师主导的戒烟计划(强化版与简化版)之间的戒烟率以及这些计划与基于文献的对照组之间的成本效益,揭示了强化版药师主导的戒烟计划是3种策略中最具成本效益的干预措施。强化版比简化版多花费了14 000美元(每100名参与者),但14人戒烟成功,取得10.8个生命年的获益额;强化版比对照组多花费35 300美元(每100名参与者),但29名戒烟者取得22.4个生命年的获益,每增加一名戒烟者多花费1 217美元,戒烟的增量成本效果比为1 576美元 [32]

    2000年,一项在英格兰进行的研究从提供者和NHS的角度比较了普通牙科诊所、普通医疗诊所(GMP)、社会药房和NHS戒烟服务(NHS SSS)中戒烟服务的成本效益,研究结果表明“成本效益高”的服务是在社区药房开展戒烟服务[37]

    由此可见,药师主导的戒烟服务不仅有效且极具成本效益,医疗卫生管理者及政策制定者可以基于此就最佳资源分配做出合理决策[24]

    然而,有证据表明,药师在承担戒烟服务提供者这一角色存在障碍,这影响了将全面戒烟服务纳入实践的可行性。障碍包括缺乏充分的培训、缺乏适当的转诊结构、社区药房环境中的时间限制、公众对药剂师提供戒烟服务缺乏认识、药房缺乏私人咨询区以及缺乏提供服务的报销[33]

    在许多国家,药师缺乏戒烟知识和技能以及缺乏培训被认为是药师在提供戒烟服务方面发挥作用的常见障碍[6,30,32,35,38-39]。Erku等[30]在埃塞俄比亚进行的一项由410名参与者(213名药学学生和197名药师)的横断面调查,提出药师在戒烟服务方面存在临床知识不足和实践技能差距。澳大利亚进行的另一项研究分析了250名大四药学专业学生、51名药师和20名戒烟教育工作者在当前基于证据的药房戒烟干预实践中的表现,得出了药学学生及药师与戒烟教育工作者之间存在较大的临床或药物治疗服务方面的差距[34]。药师由于缺乏戒烟相关教育与培训导致在戒烟服务中缺乏自信,从而阻碍了与患者的有效沟通,降低了提供的戒烟服务的质量[35,39]。在约旦,大多数药师认为,由于培训不到位导致对戒烟治疗的了解不足,致使药师无法提供足够的戒烟干预措施[40]

    缺乏戒烟计划或劳务报酬也是许多有意愿药师提供戒烟服务的一个障碍[31-33,39-40]。美国的一篇研究论文探讨了药师在护理过渡期间(住院到出院回家期间)如何衔接戒烟服务,得出支付报酬对维持任何医疗服务(包括药师提供的戒烟服务)至关重要。由于药师不被视为戒烟服务的提供者,因此美国大多数州的药师没有资格通过医疗补助获得提供戒烟服务的劳务报酬,通过商业保险获得报销的也很少见。缺乏鼓励药师向烟草使用者提供戒烟干预措施的计划和政策,药师没有戒烟药物处方权也大大阻碍了戒烟服务的开展[35]。研究表明,授予药师戒烟服务提供者身份或药师拥有戒烟药物处方权,并在医保政策中明确劳务报酬的支付标准,可能是解决该问题的最佳方式[40]

    社会药店缺乏相对私人空间为患者进行戒烟咨询服务也是障碍之一[6,33]。药店是否设有专门的可以为患者提供面对面戒烟服务咨询的区域,为患者咨询营造一个轻松舒适的环境,对于提高患者戒烟依从性是非常重要的影响因素[33]。药师实施戒烟服务与履行其他职责在时间上的矛盾也是限制戒烟服务工作开展的障碍之一[34-35]。根据Peletidi等[35]的系统调查结果显示,缺乏时间是所有参与戒烟服务者,包括患者在内的共性问题。日本对11家社区药房进行的一项随机研究显示,由于时间和精力有限,许多药房没有将戒烟服务纳入其日常运营范围[32]

    在法国、约旦和尼日利亚等一些国家,对戒烟服务的需求不足被视为药师开展戒烟服务的障碍[9,33,40]。由于缺乏戒烟服务,泰国的戒烟率很低,因此需要在药店开展戒烟服务,为药师提供机会[36]。为了解决这一问题,Bouchet等[33]评估了法国社区药房实施药师提供的戒烟方案的可行性,并建议向社区药房顾客有效推广戒烟服务,以解决需求不足的问题。

    社会药房在烟草控制政策中的参与度较低[9],原因是医疗机构与社会药房缺乏统一的转诊系统来保障提供安全、有效的戒烟服务[23,28]。社会药房药师在无法全面、详细获得患者医疗护理、处方记录的前提下,也就意味着无法了解到患者准确的疾病史与用药史,提供戒烟药物及相关指导可能会增加用药错误的可能性[26]。其他阻碍戒烟服务工作开展的因素还包括性别、年龄、民族、文化等不同所带来的戒烟者个性化差异及沟通交流障碍[23]

    全面了解药师主导的戒烟服务及其在不同地区和医疗保健环境中的影响,对于世界各国药师参与戒烟服务至关重要。基于药师缺乏戒烟知识、技能和培训有关的问题,政策制定者和教育工作者需要做更多的工作,以确保戒烟服务对患者的最大益处。有必要针对不同地区和国家的具体需求采取全面的能力建设措施,包括制定标准化的培训计划,采用线下结合远程学习方式助力药师实践技能发展,促进全球药师专业的持续深入发展。

    医药卫生政策制定应适时考虑将药师主导的戒烟服务纳入国家和地区医疗卫生服务指南,并开展宣传工作,提高人们对药师在戒烟方面发挥作用的认识。立法明确和药师薪酬补偿将有利于公众获得经许可的戒烟服务的机会,扩大药师在提供戒烟服务中的作用也有利于增强公众戒烟信心,同时在不同的医疗保健环境中实施和扩大这些服务争取足够的资源与支持。未来应促进药师、医师、护师、公共卫生专业人员及其他参与烟草控制工作的利益相关者之间更紧密的合作,激发出药师主导戒烟干预措施的全部潜力,提高戒烟的有效性和可持续性。

    随着医药卫生体制的改革及药师进一步以患者为中心的角色转变,药师的可及性被视为开展戒烟服务的最重要驱动因素之一。药师和社会药房团队能够通过结合药理学和行为学方法持续提供成本效益高的个体化戒烟服务,提高戒烟率,最终达到减轻烟草和尼古丁依赖以及烟草相关疾病的负担,促进医疗卫生系统的发展、改善全球卫生状况。

  • 图  1  15批纯阳正气胶囊挥发油特征图谱中共有峰标识

    S1~S15为样品;R为对照品

    图  2  纯阳正气胶囊挥发油特征图谱中共有峰归属

    图  3  纯阳正气胶囊挥发油特征图谱中共有峰指认

    图  4  纯阳正气胶囊挥发油特征图谱

    峰1.柠檬烯;峰3.桂皮醛;峰4(s).丁香酚;峰6.百秋李醇;峰7.苍术素;峰8.土木香内酯;峰9.异土木香内酯

    图  5  系统适用性图谱

    表  1  15批纯阳正气胶囊挥发油特征峰相对保留时间(t/min)

    峰号
    编号123456789
    S10.4800.6570.8631.0001.1661.2651.3381.5541.626
    S20.4790.6550.8601.0001.1621.2611.3341.5481.620
    S30.4800.6570.8651.0001.1651.2641.3371.5531.625
    S40.4800.6570.8641.0001.1641.2641.3371.5531.625
    S50.4800.6570.8641.0001.1641.2641.3371.5531.625
    S60.4800.6570.8631.0001.1641.2651.3381.5531.625
    S70.4800.6560.8631.0001.1641.2641.3371.5521.624
    S80.4800.6560.8631.0001.1651.2641.3371.5521.624
    S90.4800.6570.8631.0001.1651.2641.3381.5531.625
    S100.4800.6570.8631.0001.1651.2641.3371.5531.624
    S110.4800.6560.8621.0001.1631.2631.3361.5511.623
    S120.4800.6570.8631.0001.1651.2651.3381.5531.625
    S130.4800.6570.8631.0001.1651.2651.3381.5531.625
    S140.4800.6560.8621.0001.1651.2641.3371.5521.624
    S150.4800.6560.8621.0001.1651.2641.3371.5521.624
    平均值0.4800.6570.8631.0001.1641.2641.3371.5521.624
    RSD(%)0.010.010.0100.010.010.010.010.01
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    表  2  纯阳正气胶囊挥发油加样回收率试验结果

    成分称样量
    m/mg)
    样品含量
    m/mg)
    加入量
    m/mg)
    测得量
    m/mg)
    回收率
    (%)
    平均回
    收率(%)
    RSD
    (%)
    桂皮醛50.744.2403.1507.36299.197.11.5
    51.824.3313.1507.42398.2
    50.534.2233.1507.23095.5
    53.804.4965.2499.54696.2
    51.854.3335.2499.48698.2
    52.204.3625.2499.38295.6
    51.634.3157.34911.3495.6
    50.854.2507.34911.4097.3
    51.214.2807.34911.4998.1
    丁香酚50.7428.3517.2045.1797.897.31.4
    51.8228.9618.8647.7199.4
    50.5328.2418.4045.9396.1
    53.8030.0629.5758.7397.0
    51.8528.9732.0360.3497.9
    52.2029.1730.9558.8195.8
    51.6328.8544.6371.5895.7
    50.8528.4241.2368.5497.3
    51.2128.6241.0369.1798.8
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    表  3  纯阳正气胶囊挥发油含量测定结果

    编号桂皮醛含量(%)丁香酚含量(%)
    S1 8.455.9
    S210.456.6
    S3 9.357.7
    S4 9.457.9
    S5 9.563.8
    S6 9.166.6
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出版历程
  • 收稿日期:  2021-01-13
  • 修回日期:  2022-01-31
  • 网络出版日期:  2022-11-28
  • 刊出日期:  2022-11-25

纯阳正气胶囊挥发油的质量标准研究

doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202201042
    作者简介:

    韦飞雪,本科,执业药师、工程师,研究方向:药物分析,Email:fanshisqzr@163.com

    通讯作者: 陈 敏,本科,执业药师、工程师,研究方向:药物分析,Email:kitty_811022@163.com
  • 中图分类号: R284.1[

摘要:   目的  建立纯阳正气胶囊挥发油的质控方法。  方法  采用GC法建立挥发油的特征图谱,并测定桂皮醛与丁香酚的含量。  结果  15批样品中确定了19个共有峰,指认了峰的归属,选取了9个特征峰建立了特征图谱。桂皮醛与丁香酚分别在0.522~1.565 mg/ml(r=0.9994)和3.038~9.115 mg/ml(r=0.9997)范围内线性良好,平均回收率分别为97.1%和97.3%,RSD分别为1.5%、1.4%。  结论  所建立的GC特征图谱及含量测定方法可从定性和定量两方面控制纯阳正气胶囊挥发油的质量,方法准确、可行,可作为纯阳正气胶囊挥发油的质量控制方法。

English Abstract

温瑞睿, 许龙, 朱文静, 杨建伟. 浅谈国外药师主导开展戒烟服务的作用与挑战[J]. 药学实践与服务, 2024, 42(12): 537-541, 548. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202408054
引用本文: 韦飞雪, 李小菊, 熊斯斯, 廖云芳, 陈敏. 纯阳正气胶囊挥发油的质量标准研究[J]. 药学实践与服务, 2022, 40(6): 557-562. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202201042
WEN Ruirui, XU Long, ZHU Wenjing, YANG Jianwei. A brief discussion on the development and challenges of smoking cessation services led by pharmacist abroad[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2024, 42(12): 537-541, 548. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202408054
Citation: WEI Feixue, LI Xiaoju, XIONG Sisi, LIAO Yunfang, CHEN Min. Study on quality standards of volatile oil of Chunyang Zhengqi capsules[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2022, 40(6): 557-562. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202201042
  • 纯阳正气胶囊为中药复方制剂[药品批准文号:国药准字Z20205003],由广藿香、姜半夏、土木香、陈皮、丁香、肉桂、苍术、白术、茯苓、花椒等十七味中药组成,具有温中散寒的功效,用于暑天感寒受湿,腹痛吐泻,胸隔胀满,头痛恶寒,肢体酸重。其处方来源《医学薪传·祠鹤亭集方》和《中药成方配本》,方中肉桂辛、甘、大热,为治寒凝要药,活性成分桂皮醛可抗溃疡、抗菌、抗炎[1];丁香辛温,能治冷气腹痛,活性成分丁香酚可抗菌、抗炎、解热镇痛[2];广藿香辛而微温,能化湿解暑、和胃止呕,活性成分百秋李醇可抗炎、镇痛、保护胃肠道[3];苍术及白术甘、苦、温,能燥湿健胃、祛湿健脾止泻,活性成分白术内酯类、苍术素、苍术酮可调节胃肠道及抗炎[4-5];土木香辛、苦、温,能健脾和胃、行气止痛,活性成分土木香内酯、异土木香内酯可抗菌及镇痛[6];半夏及陈皮燥湿和胃,理气和中[7-8]。其制备工艺中包含挥发油的提取,主要是将广藿香、姜半夏、土木香、丁香、肉桂、苍术、白术、花椒经水蒸气蒸馏提取而得,内含成品的主要指标桂皮醛、丁香酚及多种功效成分如百秋李醇、苍术素、苍术酮、土木香内酯、异土木香内酯等。之前的工艺质控环节并未对该处方中的挥发油进行质量控制,中间体的质控体系尚不完善,为进一步提升中间体及成品的质量标准,本文建立了纯阳正气胶囊挥发油的特征图谱,并对其主要成分桂皮醛和丁香酚进行了含量测定,从定性和定量两方面控制复方中的挥发油成分。

    • Agilent 7890B气相色谱仪,含自动进样器、FID检测器(美国,Agilent公司);XS205DU型电子天平(d=0.01mg,梅特勒-托利多);ML204T型分析天平(d=0.1mg,梅特勒-托利多);Goodsee-10型薄层色谱成像仪(上海科哲生化科技有限公司);KQ-500DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

    • 纯阳正气胶囊挥发油(标记为S1至S15,本公司自制);百秋李醇(批号:110772-201909)、丁香酚(批号:110725-201917)、桂皮醛(批号:110710-202022)、柠檬烯(批号:100470-201503)、苍术素(批号:111924-201806)、土木香内酯(批号:110760-201811)、异土木香内酯(批号:110761-201806)等对照品,购自中国食品药品检定研究院;乙醇、石油醚(30~60 ℃)、乙酸乙酯、冰醋酸等试剂均为分析纯;硅胶G薄层板(烟台江友硅胶开发有限公司)。

    • Agilent DB-624(60 m×0.25 mm,1.4 μm)毛细管柱;进样口温度280 ℃,FID检测器温度280 ℃;载气为高纯氮气;进样量1 μl;分流比5:1;程序升温:初始温度100 ℃,保持20 min,以每分钟5 ℃的速率升温至160 ℃,保持25 min,再以每分钟5 ℃的速率升温至240 ℃,保持45 min。

    • (1)对照品溶液:取柠檬烯、桂皮醛、丁香酚、百秋李醇、苍术素、土木香内酯、异土木香内酯对照品适量,精密称定,加乙醇分别制成每1 ml含1mg的溶液,即得。

      (2)供试品溶液:取本品0.2 g,精密称定,加乙醇制成每1 ml含20 mg的溶液,即得。

      (3)阴性溶液:按照纯阳正气胶囊挥发油提取方法分别制备缺少广藿香、姜半夏、土木香、丁香、肉桂、苍术、白术、花椒的阴性样品。取阴性样品按供试品溶液的制备方法制备阴性溶液。

    • 按“2.1.1”项下色谱条件依法测定15批纯阳正气胶囊挥发油样品,使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012.130723版本),以S1为参照图谱,按中位数计算,进行共有峰标识,共获得19个峰,见图1。将阴性样品与纯阳正气胶囊挥发油样品的气相图谱进行对比分析,发现峰1~10及峰16主要来自花椒;峰11来自肉桂;峰12、13、14来自丁香;峰15来自广藿香;峰17来自苍术;峰18、19来自土木香,见图2。经GC-MS 测定[13-18],NIST 质谱谱库检索以及对照溶液分析,共指认了7个成分,分别为柠檬烯、桂皮醛、丁香酚、百秋李醇、苍术素、土木香内酯和异土木香内酯,见图3。结合纯阳正气胶囊挥发油中功效成分及峰高、峰形等参数,选取了9个特征峰建立特征图谱,见图4。以丁香酚参照峰(S峰),参照《中国药典》(2020年版)相关品种关于特征图谱的规定,计算各特征峰的相对保留时间,见表1,结果表明9个特征峰的相对保留时间均在±5%以内,符合特征图谱要求。

      图  1  15批纯阳正气胶囊挥发油特征图谱中共有峰标识

      图  2  纯阳正气胶囊挥发油特征图谱中共有峰归属

      图  3  纯阳正气胶囊挥发油特征图谱中共有峰指认

      图  4  纯阳正气胶囊挥发油特征图谱

      表 1  15批纯阳正气胶囊挥发油特征峰相对保留时间(t/min)

      峰号
      编号123456789
      S10.4800.6570.8631.0001.1661.2651.3381.5541.626
      S20.4790.6550.8601.0001.1621.2611.3341.5481.620
      S30.4800.6570.8651.0001.1651.2641.3371.5531.625
      S40.4800.6570.8641.0001.1641.2641.3371.5531.625
      S50.4800.6570.8641.0001.1641.2641.3371.5531.625
      S60.4800.6570.8631.0001.1641.2651.3381.5531.625
      S70.4800.6560.8631.0001.1641.2641.3371.5521.624
      S80.4800.6560.8631.0001.1651.2641.3371.5521.624
      S90.4800.6570.8631.0001.1651.2641.3381.5531.625
      S100.4800.6570.8631.0001.1651.2641.3371.5531.624
      S110.4800.6560.8621.0001.1631.2631.3361.5511.623
      S120.4800.6570.8631.0001.1651.2651.3381.5531.625
      S130.4800.6570.8631.0001.1651.2651.3381.5531.625
      S140.4800.6560.8621.0001.1651.2641.3371.5521.624
      S150.4800.6560.8621.0001.1651.2641.3371.5521.624
      平均值0.4800.6570.8631.0001.1641.2641.3371.5521.624
      RSD(%)0.010.010.0100.010.010.010.010.01
    • Agilent DB-624(60 m×0.25 mm,1.4 μm)毛细管柱;进样口温度280 ℃,FID检测器温度280 ℃;载气为高纯氮气;进样量1 μl;分流比10:1;程序升温:初始温度170 ℃,保持30 min,以每分钟20 ℃的速率升温至220 ℃,保持27 min。

    • (1)对照品溶液:取桂皮醛、丁香酚对照品适量,精密称定,加乙醇制成每1 ml含1 mg、6 mg的溶液,即得。

      (2)供试品溶液:取本品0.1 g,精密称定,加乙醇制成每1 ml含10 mg的溶液,即得。

    • 取对照品溶液按“2.2.1”项下色谱条件进行测定,桂皮醛、丁香酚的保留时间为21.053、26.492 min,两者峰面积的RSD(n=5)均<2%,理论板数按丁香酚峰计算均>10000,见图5

      图  5  系统适用性图谱

    • 分别精密吸取桂皮醛、丁香酚对照品溶液适量,采用逐级稀释法加乙醇制成含桂皮醛0.522、0.782、1.043、1.304、1.565 mg/ml,含丁香酚3.308、4.051、6.076、7.089、9.115 mg/ml的混合线性溶液,按“2.2.1”项下色谱条件进行测定,以桂皮醛、丁香酚溶液浓度(mg/ml)为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得桂皮醛和丁香酚的回归方程分别为:Y=1482.5X+18.445(r=0.9994);Y=1383.6X+57.04(r=0.9997),表明桂皮醛在0.522~1.565 mg/ml、丁香酚在3.038~9.115 mg/ml范围内与峰面积呈良好线性关系。

    • 当信噪比为3时,测得桂皮醛、丁香酚的检测限为0.7、1.1μg/ml;当信噪比为10时,测得桂皮醛、丁香酚的定量限为2.6、3.8 μg/ml。

    • 取同一供试品6份,按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液,依法测定。结果桂皮醛平均含量为8.38%,RSD为0.5%(n=6);丁香酚平均含量为55.88%,RSD为0.5%(n=6),表明该方法重复性良好。

    • 取同一供试品溶液,分别于0、2、4、6、8、10、12、24 h按“2.2.1”项下色谱条件测定,记录峰面积。结果桂皮醛、丁香酚峰面积的RSD(n=8)分别为1.0%、1.1%,表明供试品溶液在24 h内稳定。

    • 取已知含量的同一批样品9份,每份约50 mg,精密称定,每份精密加入桂皮醛、丁香酚对照品溶液适量,配制成低、中、高3个不同浓度的回收率溶液,每个浓度3份,按供试品溶液的制备方法操作,分别精密吸取 1μl注入气相色谱仪进样测定,计算回收率。结果桂皮醛、丁香酚的平均回收率(n=9)分别为97.1%、97.3%;RSD(n=9)分别为1.5%、1.4%。结果见表2

      表 2  纯阳正气胶囊挥发油加样回收率试验结果

      成分称样量
      m/mg)
      样品含量
      m/mg)
      加入量
      m/mg)
      测得量
      m/mg)
      回收率
      (%)
      平均回
      收率(%)
      RSD
      (%)
      桂皮醛50.744.2403.1507.36299.197.11.5
      51.824.3313.1507.42398.2
      50.534.2233.1507.23095.5
      53.804.4965.2499.54696.2
      51.854.3335.2499.48698.2
      52.204.3625.2499.38295.6
      51.634.3157.34911.3495.6
      50.854.2507.34911.4097.3
      51.214.2807.34911.4998.1
      丁香酚50.7428.3517.2045.1797.897.31.4
      51.8228.9618.8647.7199.4
      50.5328.2418.4045.9396.1
      53.8030.0629.5758.7397.0
      51.8528.9732.0360.3497.9
      52.2029.1730.9558.8195.8
      51.6328.8544.6371.5895.7
      50.8528.4241.2368.5497.3
      51.2128.6241.0369.1798.8
    • 分别取6批不同批号的纯阳正气胶囊挥发油样品,按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液,按“2.2.1”项下色谱条件进样测定,样品测定结果见表3

      表 3  纯阳正气胶囊挥发油含量测定结果

      编号桂皮醛含量(%)丁香酚含量(%)
      S1 8.455.9
      S210.456.6
      S3 9.357.7
      S4 9.457.9
      S5 9.563.8
      S6 9.166.6
    • 中药复方制剂成分复杂,对生产工艺环节的挥发油、浸膏等中间体的质量控制在很大程度上会影响终产品制剂的质量以及生产效率,因此对中间体的质量控制方法既要准确、可行,又要简单、快速。中药特征图谱作为系统全面的质量评价体系,是复方制剂物质基础研究和质量控制的最佳途径[21-22]。本文对来自于小试和中试的15批挥发油样品进行了气相色谱分析,通过与挥发油阴性对照色谱的对比研究,对各色谱成分进行了归属,其中花椒、丁香、土木香、肉桂、广藿香及苍术均有相应的色谱峰,但未见姜半夏及白术的相关成分,推测姜半夏可能是由于挥发油量相对较小或是受其他成分影响未能检出,白术及苍术挥发油中的苍术酮在薄层色谱中可检出,但相对不稳定[23],后续会进一步探索。综合色谱峰指认结果以及峰形、峰高等因素[24],最终确定了9个峰作为纯阳正气胶囊挥发油特征谱的特征峰,15批挥发油的特征图中利用面积归一化法得9个特征峰面积占比均在90%以上,相似度均在0.9~1.0之间,说明挥发油的制备工艺稳定。

      本文建立的气相特征谱可从整体上对纯阳正气胶囊挥发油进行控制,根据成品的功能主治及指标成分[24]对桂皮醛和丁香酚进行含量测定,可从定量基础上更准确地反映挥发油成分的存在情况,故本实验建立的气相特征图谱和挥发油的含量测定方法可分别作为纯阳正气胶囊挥发油的质量控制方法,同时也为后续进一步提升纯阳正气胶囊质量标准提供了有效依据。

参考文献 (24)

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