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三唑类抗真菌药(TAF)是目前临床常用于治疗侵袭性真菌感染的药物[1-2],主要包括氟康唑(FCZ)、伊曲康唑(ITZ)、伏立康唑(VRC)、泊沙康唑(POS)等。TAF体内代谢主要通过细胞色素P450(CYP450)进行[1, 3],而临床常用药物中约60%不同程度地依赖肝P450酶代谢[4]。因此,TAF在临床使用过程中可能与其他合用药物存在相互作用,有增加药物不良反应发生风险。为促进患者合理用药,降低用药风险,部分医疗机构引入了前置审方系统,在系统审核基础上的人工审核与完全人工审核相比,无论是审核速度还是审核覆盖面均有较大提升了,拦截了大量TAF与其他药物存在相互作用的医嘱。但审方系统中药物相互作用审核部分尚有不足,主要表现在:①系统拦截有相互作用的用药医遗嘱后,不能根据药物特性给出药物替换建议;②系统将拦截的医嘱全部提交药师审核导致药师工作量增大;③不同药师通过审方系统对同一组具有相互作用的医嘱实施审核时,可能由于药师自身知识积累存在差异,导致审核结果的准确性、一致性及用药建议的完整性不尽相同。
为此,本文就TAF与他汀类药物间的相互作用为例,通过查阅资料整理两类药物相互作用发生的机制,得到两类药物合用时相互作用较小的优势搭配,并在优化审方系统的基础上将这种优势搭配用于指导合理用药实践,为开展更多药物相互作用的审核提供借鉴与经验。
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提取审方系统优化前6个月和优化后1个月所有提示TAF与他汀类药物相互作用的数据,并通过SPSS 25.0进行统计分析,均数以
$ \bar x \pm s $ 表示,计量资料采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。 -
在现审方系统的基础上,利用审方系统中的“自定义”功能,在流程中嵌入降低药物相互作用风险的换药建议。当医生在处方或医嘱中遇到有明显相互作用的药物合用时,可根据系统的用药建议选择相互作用较小的药物,或者提交药师人工审核。
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查阅汇总药品说明书、国内外文献[1-3,5-10]和访问美国FDA网站,获得TAF与他汀类药物的代谢特点和相互作用机制(表1和表2),以及有关两类药物合用时的可能风险和用药建议(表3)。
表 1 三唑类抗真菌药与他汀类药物体内代谢特点
药名 代谢酶 转运体 CYP
3A4CYP
2C9CYP
2C19CYP
2C8P-gp
(ABCB1)BCRP
(ABCG2)氟康唑 XdOb XdOb XdOa X 伊曲康唑 XOa XO O 伏立康唑 XOa XOc XOc 泊沙康唑 Oa XO 阿托伐他汀 Xe X X 辛伐他汀 Xe X 洛伐他汀 Xe X X 匹伐他汀 Xd 瑞舒伐他汀 Xd X X 氟伐他汀 X Xe X 西立伐他汀 X Xe 普伐他汀 肝代谢,不依赖P450酶 X X 注:X.底物;O.抑制剂;a.强效;b.中效;c.弱效;d.很少被该酶代谢;e.主要代谢酶;P-gp. P-糖蛋白;BCRP. 乳腺癌耐药蛋白 表 2 三唑类抗真菌药与他汀类药物的相互作用机制
他汀类药物 三唑类抗真菌药 氟康唑 伊曲康唑 伏立康唑 泊沙康唑 阿托伐他汀 ①竞争CYP3A4酶,他汀代谢可能减少;②中度抑制CYP3A4酶,抑制他汀代谢;③竞争性结合P-gp,他汀外排可能受阻 ①竞争CYP3A4酶,他汀代谢可能减少;②强抑制CYP3A4酶,抑制他汀代谢;③竞争性结合P-gp,同时抑制P-gp,他汀外排可能受阻;④抑制BCRP,他汀外排可能受阻 ①竞争CYP3A4酶,他汀代谢可能减少;②强抑制CYP3A4酶,抑制他汀代谢 ①强抑制CYP3A4酶,抑制他汀代谢;②竞争性结合P-gp,同时抑制P-gp,他汀外排可能受阻 辛伐他汀 与阿托伐他汀相同 与阿托伐他汀①②③相同 与阿托伐他汀相同 与阿托伐他汀相同 洛伐他汀 与阿托伐他汀相同 与阿托伐他汀相同 与阿托伐他汀相同 与阿托伐他汀相同 匹伐他汀 中度抑制CYP2C9酶,但他汀经该酶代谢的量少,受影响较小 无相互作用 ①竞争CYP2C9酶,但他汀经该酶代谢的量少,受影响较小;②弱抑制CYP2C9酶,但他汀经该酶代谢的量少,受影响较小 无相互作用 瑞舒伐他汀 ①与匹伐他汀相同;②与阿托伐他汀③相同 与阿托伐他汀③④相同 与匹伐他汀相同 与阿托伐他汀②相同 氟伐他汀 ①中度抑制CYP2C9酶和CYP3A4酶,抑制他汀代谢;②竞争CYP2CP、CYP3A4酶,他汀代谢可能减少 与阿托伐他汀②相同 ①竞争CYP3A4酶,强抑制该酶,他汀代谢可能减少;②竞争CYP2C9酶,弱抑制该酶,他汀代谢可能减少 与阿托伐他汀①相同 西立伐他汀 ①中度抑制CYP3A4酶,抑制他汀代谢;②竞争CYP3A4酶,他汀代谢可能减少 与阿托伐他汀②相同 与氟伐他汀①相同 与阿托伐他汀①相同 普伐他汀 与阿托伐他汀③相同 与阿托伐他汀③④相同 无相互作用 与阿托伐他汀②相同 表 3 三唑类抗真菌药与他汀类药物相互作用的警示
他汀类
药物三唑类抗真菌药 氟康唑 伊曲康唑 伏立康唑 泊沙康唑 阿托伐他汀 慎用他汀最低剂量 他汀≤20mg/d 慎用他汀最低剂量 禁忌 辛伐他汀 肌病和横纹肌溶解的风险增加 避免或禁忌a 禁忌 禁忌 洛伐他汀 肌病和横纹肌溶解的风险增加 避免或禁忌a 禁忌 禁忌 匹伐他汀 ITZ 200 mg/d +匹伐他汀第 4 天单剂 4 mg,
共 5 d,AUC减少 23%,Cmax下降22%N N 瑞舒伐他汀 无相互作用 ITZ 200mg/d,用药5 d+瑞舒伐他汀10mg/单剂,较单用瑞舒伐他汀的AUC增加1.4倍 N N 氟伐他汀 他汀≤20mg/d或氟伐他汀的暴露量和血药浓度峰值分别升高了约84%
和44%,慎用α他汀受到的影响很小或无影响α 调整他汀类药物的剂量 N 西立伐他汀 N 无相互作用α 调整他汀类药物的剂量 N 普伐他汀 FCZ 200mg 静脉注射6 d+普伐他汀20mg 口服,AUC减少34%,Cmax下降 33% ITZ 200 mg/d口服+普伐他汀40mg/d口服,持续30天, AUC增加11%,Cmax升高17% 无相互作用α 无相互作用α 注:α.国内药品说明书提示;N.未查到有关的相互作用资料;其余内容均为FDA说明书提示 -
与优化前相比,“自定义”审方流程后,在“相互作用”提示基础上增加“换药建议”。医生可根据系统推荐选用相互作用较小的他汀类药物,有效弥补了优化前医生遇到审方系统提示药物相互作用时,将有相互作用的医嘱全部提交药师人工审核而导致药师工作量大、效率低的不足。因此,系统药师端TAF与他汀类药物合用的相互作用警示显著减少(P<0.05),有效地提升了药师审方效率(见表4),同时,提升了审核结果的一致性。
表 4 优化前后三唑类抗真菌药与他汀类药物合用情况对比
三唑类
抗真菌药相互作用药物 警示 日均次数 优化前 优化后 氟康唑 阿托伐他汀钙片 慎合用 10.03±6.29 0.70±0.95 匹伐他汀钙片 无 0 0 辛伐他汀钙片 慎合用 2.56±2.10 0.63±0.81 瑞舒伐他汀钙片 无 0 0 伊曲康唑 阿托伐他汀钙片 慎合用 5.76±2.35 0.73±0.87 匹伐他汀钙片 无 0 0 辛伐他汀钙片 禁合用 2.07±1.94 0.50±0.78 瑞舒伐他汀钙片 无 0 0 伏立康唑 阿托伐他汀钙片 慎合用 4.28±2.12 0.57±0.82 匹伐他汀钙片 无 0 0 辛伐他汀钙片 禁合用 0.66±0.89 0.30±0.60 瑞舒伐他汀钙片 无 0 0 合计 25.36 3.43 -
由表3汇总可知,对于提示明确禁忌的设置为“禁合用”,对于提示没有相互作用的设置为“可合用”,对于提示增加不良反应风险的设置为“慎合用”,对于限定日剂量的设置为“他汀≤XXX/d”。说明中无相互作用提示的情况,参照两类药品在人体内代谢途径的特点(表1和表2),可分为3类情况处置(用药建议仅作为备选,实际用药优先选择说明书中建议合用的药物):①如TAF和他汀的代谢在酶途径和转运体途径均无相互作用,且TAF对他汀的代谢没有抑制,则认为两药“可合用”。②无论TAF和他汀的代谢在酶途径或转运体途径是否有相互作用,只要TAF抑制他汀的主要代谢酶(途径),则认为两药“禁合用”。③如TAF和他汀的代谢在酶途径或转运体途径有相互作用,且TAF不抑制他汀的主要代谢酶(途径),则认为两药“慎合用”。因此,结合表1、2、3得出TAF与他汀类药物合用时的优势搭配,见表5。
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当处方或医嘱中选择的TAF与他汀类药物有明显相互作用,系统将会自动推荐“可合用”的他汀类药物,而不显示“禁合用”的他汀类药物,“慎合用”的他汀类药物显示为“某药名称(谨慎)”,有剂量限制的显示为“某药名+(日剂量)”,医生根据情况,选择医院可获得且合适的他汀药物。
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TAF用于治疗患者深浅部真菌感染,治疗过程中患者可能出现皮肤、肝、神经等器官或系统的不良反应,如刘晓东[11]、许元宝[12]等报道,接受氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑治疗的患者不良反应可能出现在用药初期,长疗程用药后不良反应仍可出现。并且TAF除与他汀外还与其他药物存在广泛的相互作用:①与质子泵抑制剂合用时,通过抑制CYP2C19、CYP3A4影响该酶的底物奥美拉唑、泮托拉唑、兰索拉唑、艾普拉唑等在体内的代谢[13],已有两类药物合用致爆发性肝损伤的报道[14];②与抗凝剂合用时,分别通过抑制CYP3A4、P-gp和CYP2C9,使利伐沙班[15]和华法林[6, 16]的血药浓度显著增高,增加出血风险;③与糖皮质激素合用时,通过抑制CYP3A4减少激素的代谢;④与免疫抑制剂[3](他克莫司、环孢素)合用时,通过抑制CYP3A4使免疫抑制剂的暴露量增加,不良反应增加;⑤与降糖药物合用时,通过抑制CYP2C9使格列美脲、格列吡嗪、格列齐特等药物的降糖作用增强,可能诱发低血糖反应等。
他汀类药物在用于控制患者血脂的治疗中占有重要地位,并被各医疗机构广泛使用,其相关的不良反应在我国人群的发生率较高[17],如对肌肉、肝脏等毒性,用药过程中常需要监测谷丙、谷草转氨酶及肌酸激酶,尤其与其他具有相互作用的药物合用时。如出现谷丙、谷草转氨酶升高超过3倍或肌酸激酶升高超过10倍,需要立即停用他汀类药物。
在患者临床治疗过程中,有时TAF与他汀类药物不可避免地需要合用,而药物相互作用是药物合用不可忽视的问题[18]。药物的选择就显得至关重要,合适的药物搭配方能更好更快地控制疾病发展,并且较小地表现出由相互作用所致的不良反应。如文中TAF与他汀类药物相互作用所示,误将存在相互作用明显的TAF与某他汀合用,不仅不能有效控制疾病,反而可能使药物不良反应增加,出现药源性疾病。
查阅近年TAF或他汀类药物相互作用的文献,文中涉及到TAF或(和)他汀类药物相互作用部分可能仅涉及其中某几个药品,较难清楚全面地了解这两类药物间发生相互作用的途径或怎样选择药物才能减少相互作用,并且仅有少部分资料明确了某两个药物合用会导致不良反应加重的情况,如Krasulova[19]的研究,伊曲康唑与辛伐他汀合用会导致严重的不良反应。建议[20]辛伐他汀、阿托伐他汀与TAF合用时,辛伐他汀日剂量不超过10 mg,阿托伐他汀日剂量不超过20 mg。吕斌等[21]研究结果显示,大鼠给予伏立康唑和阿托伐他汀单次剂量后,阿托伐他汀在大鼠体内的暴露量明显增加。杨燕[22]报道伏立康唑和阿托伐他汀合用导致肝损和肌酸激酶升高。《泊沙康唑临床应用专家共识》[23]建议,禁止辛伐他汀与泊沙康唑合用,但没有明确泊沙康唑与其他他汀类药物的合用建议。
因此,笔者通过查阅资料,以TAF和他汀类药物的代谢途径为出发点,对两者的相互作用进行梳理,整理出较小相互作用的药物搭配,并在审方系统优化的基础上用于指导临床用药。一方面,缓解药师审方工作压力,提升工作效率。另一方面,有利于TAF与他汀类药物相互作用的精细化管理,为开展其他药物相互作用的审核提供借鉴与经验。
Refinement review of the interactions between triazole antifungal agents and statins based on the optimization of the pre-prescription audit system
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摘要:
目的 为更好开展三唑类抗真菌药与他汀类药物相互作用审核,保障患者用药安全,提升药师人工审核效率。 方法 通过整理汇总三唑类抗真菌药与他汀类药物相互作用信息,得到这两类药物间相互作用较小的优势搭配。同时,优化药物相互作用全人工审核的流程,并在系统的医生端预先设置好这两类药物的优势搭配,医生开具的处方或医嘱用药有明显相互作用时,医生可根据信息系统提示及时调整药物。 结果 优化后,大多数医生根据系统提示优先选择这两类药物相互作用较小的搭配,药师人工审核时发现有明显相互作用的药物合用次数显著减少(P<0.05),审核效率得到提升,降低了因药物相互作用带给患者的用药安全风险。 结论 基于前置审核系统优化的三唑类抗真菌药与他汀类药物相互作用精细化审核,在提升患者用药安全和药师人工审核效率方面具有积极作用。 Abstract:Objective To better carries out the review of the interaction between triazole antifungal drugs and statins, ensure drug safety for patients and improve the efficiency of the manual review of pharmacists. Methods The advantageous combination with less interaction between the two kinds of drug was obtained by summarizing the interaction information of triazole antifungal drugs and statins. At the same time, optimizing the process of full manual reviews for drug interaction, and the advantageous combination of the two kinds of drug will be set up in advance on the doctor side of the review system. Doctors can adjust the drug in time according to the prompts of the information system when there is a significant interaction of the two kinds of drug in the prescription or medical order, which is issued by the doctors. Results After optimization, most doctors choose the drug combination of less interaction between the two kinds of drug according to the system prompts. The number of drug combinations of significant interaction which is manually reviewed by pharmacists is significantly reduced (P<0.05), and the review efficiency is improved, the drug safety risks brought by drug interactions to patients are reduced. Conclusion Refinement review of drug interactions between triazole antifungal agents and statins based on the optimization of the pre-audit system plays a positive role in improving the safety of patients’ medication and the efficiency of pharmacists' manual auditing. -
Key words:
- pre-prescription review system /
- triazole antifungal agents /
- statins /
- interactions /
- refined review
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玉米(Zea mays L.)属于禾本科玉蜀黍属一年生草本植物。玉米须(corn silk, maydis stigma)是玉米的干燥花柱及柱头,是我国传统中药材,《滇南本草》最早记载其入药,1985年版《中华人民共和国卫生部药材标准》将玉米须列为常用药材品种,并在1977年版《中国药典》中收录。
玉米须, 别名蜀黍须、玉蜀黍须、包谷须, 秋季玉米收获时采收,烘干或晒干。玉米须性平, 味甘、淡,具有利尿消肿、平肝利胆的功效,《黄帝内经》中记载,玉米须在治疗前列腺疾病方面具有良好的效果。玉米须还被广泛用作茶[1]、功能食品及食品添加剂[2-3]。现代研究表明,玉米须黄酮类化合物是玉米须治疗肥胖、高血糖、肾炎、膀胱炎、痛风、前列腺炎等疾病的重要药效成分[4-5]。本文通过对近10年文献的查阅, 综述了玉米须黄酮在提取工艺、成分表征、含量测定、药理作用及安全性方面的研究进展, 为玉米须黄酮的进一步开发应用提供参考。
1. 提取工艺研究
1.1 总黄酮的提取
热回流提取法是提取中药有效成分和有效部位最常用的方法。虽然热回流提取法的提取效率非常高,但样品在持续的受热过程中不稳定,导致有效成分分解,得到的产品品质也会降低。近年来,具有低温、高效、时间短等优点的超声波提取法、微波提取法被广泛用于中药有效部位的提取,提取效率要远高于普通浸提法和热回流提取法。近几年有多篇文献对玉米须总黄酮的提取工艺进行了研究,详细总结见表1。
表 1 玉米须总黄酮提取工艺编号 提取方法 优化工艺条件 总黄酮提取率
(mg/g)参考
文献1 回流提取法
(单因素试验结合响应面法)温度80℃、时间2.5 h、pH值 2.0、乙醇体积分数72%、
液料比70 ml/g3.89 [6] 2 真空减压提取法
(单因素试验和正交试验)真空度 0.07 Mpa、时间35 min、乙醇体积分数 50%、
液料比 40 ml/g1.35 [7] 3 超声波提取法
(正交试验)超声功率 500 W、超声温度70℃、超声提取时间10 min、
乙醇体积分数60%、料液比70 ml/g34.58 [8] 4 超声波提取法
(响应面优化法)超声功率 500 W、超声温度57℃、超声时间45 min、
乙醇体积分数70%、液料比26 ml/g23.37 [9] 5 超声波-双酶协同提取法
(Box-Behnken 响应面设计法)超声功率 173 W、超声时间35 min、乙醇体积分数60%、
液料比 31 ml/g、酶解时间 42 min、加酶比(果胶酶∶纤维素酶)1.9∶17.2 [10] 6 超声波辅助提取法 超声功率 260 W、超声温度63℃、超声时间 l7 min、
乙醇体积分数60%5.63 [11] 7 微波辅助提取法(正交试验优化) 提取时间 8 min、乙醇体积分数 60%、液料比50 ml/g 7.87 [11] 1.2 总黄酮的纯化
采用溶剂法提取获得的玉米须黄酮提取物总黄酮含量比较低,一般要经过色谱方法进行纯化才能获得高含量的总黄酮。包京姗等[12]考察了D101大孔吸附树脂对超声提取的玉米须总黄酮的纯化效果,5 g大孔吸附树脂、总黄酮上样液质量浓度7 mg/ml、上样液体积1 ml、盐酸调pH值为3、60%乙醇洗脱、洗脱体积为5 倍柱体积、流速1.0 ml/min,纯化后总黄酮的纯度质量分数由41.35%提高到69.20%。刘杰等[13]比较了5种大孔吸附树脂的静态吸附-解吸总黄酮的效果,发现AB-8型大孔吸附树脂纯化玉米须总黄酮效果最佳。单因素试验结合响应面法确定了AB-8大孔吸附树脂柱色谱的最佳参数为:总黄酮上样液质量浓度1.41 mg/ml、洗脱液流速2.00 ml/min、乙醇体积分数为70%、总黄酮的平均解吸率为96.52%。上述研究为玉米须总黄酮的纯化提供了理论参考。
2. 黄酮成分分离与表征
目前,已从玉米须中分离得到的黄酮类成分类型众多,包括黄酮及其苷类、黄酮醇及其苷类、二氢黄酮及其苷类、异黄酮及其苷类、黄烷类、花青素类等,且苷类成分既有氧苷也有碳苷。由于黄酮类成分极性适中,容易分离得到,所以前期已经分离获得了大量的玉米须黄酮类化合物。近几年从玉米须中分离得到的新黄酮类化合物并不多,仅检索到3个新黄酮碳苷。Sarfare等[14]运用多种色谱分离技术及光谱鉴定技术,从玉米须中分离得到2个为新黄酮碳苷:chrysoeriol 6-C-β-oliopyranosyl-7-O-β-D-glucopyranoside, 3'-methoxycassiaoccidentalin A,以及2个已知的黄酮类成分chrysoeriol 6-C-β-boivinopyranosyl-7-O-β-D-glucopyranoside和ax-4"- hydroxy-3'-methoxymaysin。宋少江课题组[15]从玉米须中分离得到1个新黄酮碳苷silkone A,以及3个已知的黄酮类成分莲子草素 (alternanthin), [(2S)-7,4'-二羟基-3'-异戊烯基-黄烷]和 [(2S)-7,3'-二羟基-4'-甲氧基黄烷]。新黄酮碳苷及玉米须中主要黄酮类化合物的结构如图1所示。
与传统的色谱分离方法相比,液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)越来越多地应用于复杂体系化学成分全面表征的研究中。高分辨率质谱法提供了精确的分子质量信息,从而有助于识别未知化合物;生物信息学的发展提升了化学分析和质谱数据处理的能力;各种工具和成倍增加的网络平台有助于代谢产物的鉴定研究。例如,Fougère等[16]采用超高效液相色谱/高分辨二级串联质谱(UHPLC/HRMS2)方法共表征了玉米须中的104个化合物,并进一步结合全球天然产物社会分子网络(GNPS)平台和Cytoscape软件以及文献对照等方法鉴定了其中的19个黄酮类化合物,但由于缺乏对照品,最终并没有全部确定这些化合物的结构。目前已报道从玉米须中鉴定的黄酮类化合物有:5,7,4′-三羟基-3′-甲氧基黄酮-6-C-α-L-(鼠李糖-α-L-1,2-鼠李糖苷)[17]、ax-5"-甲烷-3′-甲氧基玉米素(ax-5"-methane-3′-methoxy maysin)[17]、5,7,4′-三羟基-3′-甲氧基黄酮-3-C-β-D-阿拉伯糖苷-6-C-α-L-鼠李糖苷[17]、香叶木素(Diosmetin)[18]、夏佛塔苷(Schaftoside)[18]、异荭草素(Isoorientin)[18]、大豆苷(Daidzin)[18]、当药黄素(Swertisin)[18]、红车轴草素-7-O-β-D-吡喃葡糖苷(Pratensein 7-O-β-glucopyranoside)[18]、芹糖葛根素苷(Mirificin)[18]、漆黄素(Butin)[18]、牡荆素(Vitexin)[18]、野漆树苷(Rhoifolin)[18-19]、皂草苷(Saponarin)[18] 、李属异黄酮苷(Prunetrin)[19]、木犀草素(Luteolin)[19]、2"-O-α-L-鼠李糖基-6-C-(3-脱氧葡萄糖基)-3'-甲氧基木犀草素(2"-O-α-L-rhamnosyl-6-C-3-deoxyglucosyl-3′-methoxyluteolin)[20]、6,4'-二羟基-3'-甲氧基黄酮-7-O-β-葡萄糖苷(6,4′-dihydroxy-3′-methoxyflavone-7-O-β-glucoside)[20]、锦葵素(Malvidin)[20]、芍药素(Peonidin)[20]。
3. 含量测定
总黄酮是玉米须的主要有效部位之一。玉米须及其相关产品的质控也多以总黄酮为指标,其含量也将直接影响玉米须的品质及相关产品的功效。徐建霞等[21]对比分析了贵州常用的8种骨干玉米在3个不同生长时期(吐丝未授粉期、灌浆期和成熟期)的玉米须总黄酮的含量。研究结果显示,未授粉期6号(1703)材料总黄酮含量最高,品质最优。研究结果为筛选玉米须原料和选择采收期提供了科学依据。彭磊等[22]建立了紫外分光光度法测定玉米须黄酮含量的方法,测定波长为 400 nm,共测定了15 批样品,总黄酮的含量范围是3.896 ~ 9.512 mg/g。侯少平等[23] 以芦丁为对照品,利用紫外-可见分光光度法对陕西兴平种植的3种玉米须的乙醇提取物总黄酮含量进行测定,郑单958含量最高达10.739 mg/g,申单9号含量为8.174 mg/g,武科 2号含量最低为 4.684 mg/g。
彭磊等[22]采用HPLC方法对购于河南河北的15批玉米须中芹菜素的含量进行了测定,芹菜素的含量范围为0.047~0.246 mg/g,含量差异可达5倍以上。张晓明等[24] 测定了山西原平、定襄、五台、忻州4个不同产地的玉米须样品中芦丁的含量,其中忻州样品的芦丁含量最高为0.623 mg/g。研究结果显示不同产地不同品种所含有效成分的含量也具有较大的差异,这也进一步说明了优质品种筛选的重要性。上述2篇文献分别以芹菜素和芦丁作为指标成分对玉米须的品质评价进行了研究。芹菜素和芦丁两个黄酮类化合物在植物中广泛存在,以此为标准评价玉米须的品质缺乏专属性和选择性。如能结合药理学研究结果,选用具有生物活性的黄酮类化合物为指标成分,可更好地评价玉米须的品质。
4. 药理作用
4.1 抗糖尿病
玉米须黄酮具有显著抗糖尿病作用。Zhang等[25]采用链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠模型评价玉米须粗黄酮(CSFs)的抗糖尿病活性。研究结果显示,CSFs给药4周后,可显著降低糖尿病小鼠的体重及耗水量,尤其是血糖浓度,且CSFs高剂量组(500 mg/kg)降低糖尿病小鼠体重的作用最强;与糖尿病模型对照组相比,CSFs高剂量组可显著降低糖尿病小鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)和肝糖原水平,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和超氧化物歧化酶(SOD)水平略有升高。研究结果说明,CSFs可能是通过调节脂质代谢、清除氧自由基以保护机体的新陈代谢和修复机体的抗氧化能力等途径发挥抗糖尿病作用。
杨生辉等[26]研究发现,玉米须总黄酮对晚期糖基化终产物、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶具有一定抑制活性,且呈现浓度依赖性。采用Pearson相关分析法对玉米须黄酮含量与抗糖基化、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶抑制能力进行相关性分析,发现抗糖基化、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性与黄酮含量呈正相关(相关系数r分别为0.83、0.90和0.57,P<0.05)。
Li等[9]采用网络药理学方法计算发现,芦丁、木犀草素、高车前素是玉米须抑制高血糖活性的主要活性成分。Chaudhary等[27]采用分子对接的方法预测玉米须中生物活性物质对糖尿病相关靶点的结合亲和力。26种生物活性物质与5个不同的靶标(蛋白酪氨酸磷酸酶1-B、葡萄糖转运蛋白-1、二肽基肽酶-4、α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶)对接,发现儿茶素、槲皮素、芦丁、山柰酚等化合物对蛋白酪氨酸磷酸酶1-B(PTPN-1B)具有最高的结合亲和力,结合能最高为 −8.5 kcal/mol,可用于研究和开发新的抗糖尿病分子。
4.2 抗炎、镇痛作用
Jeong等[28]采用乙酸诱导的小鼠扭体反应和二甲苯诱导的美国癌症研究所(ICR)小鼠耳肿胀模型研究玉米须黄酮提取物(MSE)的体内镇痛和抗炎作用。ICR小鼠灌胃不同剂量的MSE(100 mg/kg、200 mg/kg、300 mg/kg),发现300 mg/kg的MSE可显著抑制乙酸注射引起的扭体反应(52.40%),并显著减少二甲苯诱导的小鼠耳肿胀度(77.61%)。组化分析结果显示,MSE能以剂量依赖的方式减少水肿引起的小鼠耳组织细胞浸润或肿胀,其中300 mg/kg 玉米须黄酮提取物的抑制作用比阳性药吲哚美辛更显著。采用二甲苯致小鼠耳肿胀实验、热板实验和扭体实验等方法,律广富等[29]研究了玉米须总黄酮的抗炎、镇痛作用。小鼠以玉米须总黄酮(2.12 g/kg、1.06 g/kg、 0.53 g/kg)预灌胃给药7 d后,与模型对照组相比,药物中、高剂量组小鼠耳肿胀度显著降低(P<0.05),出现舔足时间显著延长(P<0.05);药物高剂量组出现扭体时间显著延长、扭体次数显著减少(P<0.05)。
采用脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞炎症模型,研究玉米须黄酮的体外抗炎特性及其分子机制[28],结果表明,玉米须黄酮(10 μg/ml、100 μg/ml、 200 μg/ml)可显著降低LPS诱导巨噬细胞的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧合酶(COX-2)水平,剂量依赖性地抑制NO的分泌,且不会产生细胞毒性。深入研究发现,玉米须黄酮对LPS诱导的巨噬细胞的抗炎活性可能与急性期蛋白(AP-1)信号通路的抑制有关。
4.3 抗痛风
已有多项研究报道,玉米须黄酮对急性痛风性关节炎具有改善作用。律广富等[29]采用尿酸钠诱导家兔急性痛风性关节炎模型,研究了玉米须黄酮抗炎、镇痛活性,及其对家兔急性痛风关节炎的改善作用。玉米须黄酮(0.58 g/kg、0.29 g/kg、0.15 g/kg)预灌胃给药7 d后,与模型组比较,药物组滑膜组织炎症明显减轻,充血、水肿、滑膜增生不明显,并显著减少炎细胞浸润。林贺等[30]测试了玉米须黄酮提取物对尿酸钠诱导大鼠痛风性关节炎的影响。研究结果显示,玉米须黄酮提取物高、中剂量组(1 g/kg、0.5 g/kg) 可显著减轻踝关节肿胀度(P<0.01),降低血浆白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤生长因子-α(TNF-α)及血浆细胞间粘附分子1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶-1 (MMP-1)水平(P<0.05),显著改善大鼠关节滑膜组织的病理变化。
李萍等[31]采用氧嗪酸钾和单钠尿酸盐(MSU)联合诱导的大鼠改良痛风模型,研究玉米须黄酮提取物对改良急性痛风模型大鼠的改善作用及可能的作用机制。结果表明,造模 24 h 后,黄酮提取物高、中剂量组及秋水仙碱组大鼠的踝关节肿胀度均显著减轻(P<0.05)。给药 7 d 后,与模型组相比,黄酮提取物高、中剂量组及秋水仙碱组大鼠血清 IL-1β水平均显著降低(P<0.05),黄酮提取物高、中剂量组及苯溴马隆组大鼠血清尿酸(UA)水平均显著减少(P<0.01)。研究结果表明,玉米须黄酮可能是通过抑制炎性细胞因子 IL-1β 的表达缓解急性痛风性关节炎的急性炎症反应。
4.4 神经保护作用
冯小童[32]研究了玉米须总黄酮(STF)对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)所致阿尔兹海默症(AD)模型小鼠学习记忆能力的影响。玉米须总黄酮灌胃治疗3 周后,通过检测小鼠空间学习记忆能力、脑组织中ROS 和MDA 含量评价其药效。结果显示,STF 高剂量组较AD 模型组可显著增加空间学习记忆能力(P<0.01),明显降低脑组织中 ROS 和 MDA 含量(P<0.01)。玉米须总黄酮具有改善 Aβ25-35 所致 AD 小鼠学习记忆的能力,可能与抑制 AD 小鼠脑内氧化应激反应有关。
Ryuk等[33]则考察了玉米须黄酮水提取物(CSW)对缓解蒙古沙土鼠短暂性脑缺血再灌注(I/R)的缺血性卒中症状和卒中后高血糖的影响。在其 40% 能量脂肪饮食中给予0.05% CSW(I/R-L)和0.2% CSW(I/R-H)、0.02% 阿司匹林(I/R-阿司匹林)和纤维素(I/R-对照)3周后,对蒙古沙土鼠进行8 min的动脉闭塞和再灌注,并按照规定的饮食继续喂养3周。CSW的摄入减少了I/R损伤蒙古沙土鼠的神经元细胞死亡,并剂量依赖性地改善了神经症状,包括下垂的眼睛、蹲姿、屈肌反射和行走模式;减轻了短期记忆、自发变化和握力;对缺血性卒中症状的保护作用与TNF-α、IL-1β、超氧化物和脂质过氧化物水平降低有关,从而促进海马组织超氧化物歧化酶活性;改善血流等。此外,CSW可预防与降低胰腺β细胞质量相关的卒中后高血糖,并且与保护β细胞凋亡有关,恢复了与假手术组类似的β细胞质量。与I/R对照组相比,CSW摄入提高了乳酸杆菌、双歧杆菌、异杆菌和阿克曼菌的相对丰度。Picrust2分析表明,与I/R对照组相比,CSW增加了丙酸盐和丁酸盐的代谢以及淀粉和葡萄糖的代谢,但减少了脂多糖的合成。总之,CSW通过减少氧化应激和炎症、增加血流量和β细胞质量来预防神经元细胞死亡和高血糖症,这种缓解可能是通过改善肠-脑轴相关的肠道微生物组群落来实现的。
4.5 护肤作用
玉米须在美白保健护肤方面也具有很大潜在价值。Wang等[15]建立了微量2'-联氮-二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)自由基清除法,评价从玉米须中分离得到的1个新黄酮化合物silkone A以及3个已知的黄酮类物质,莲子草素 (alternanthin),(2S)-7,4'-二羟基-3'-异戊烯基-黄烷和 (2S)-7,3'-二羟基-4'-甲氧基黄烷对自由基清除能力的大小。其半数抑制浓度 (IC50)值31.34~37.04 μmol/L,显示比阳性药Trolox具有更强的自由基清除活性。2个黄烷化合物 [(2S)-7,4'-二羟基-3'-异戊烯基-黄烷、(2S)-7,3'-二羟基-4'-甲氧基黄烷] 对酪氨酸酶表现出中等的抑制活性,IC50 值分别为0.49 mmol/L和0.21 mmol/L。通过分子对接计算进一步研究推测,2个黄酮配体与活性位点残基之间的氢键相互作用可能是其发挥抑制酪氨酸酶活性的关键。研究证实了玉米须黄酮类化合物在抗氧化和抑制酪氨酸酶活性方面的潜力,并为开发玉米须护肤产品提供依据。
紫外线B(UVB)照射会对皮肤产生不良影响。玉米须含有的黄酮类化合物可通过抗氧化和抗炎作用防止皮肤光老化。Kim等[34]研究了膳食玉米须对UVB诱导的小鼠皮肤损伤的潜在光保护作用以及作用机制。口服玉米须水提取物 (CS)2 g/(kg·d)或4 g/(kg·d)19周,显著降低了UVB照射的SKH-1无毛小鼠的表皮厚度、皱纹形成和增殖细胞核抗原 (PCNA)、Ki67和8-OHdG阳性染色,并增加了胶原染色。CS组的促炎核因子κB (NF-κB)靶基因 (IL-1β、iNOS和COX-2)和MMP-9的表达较低,转化生长因子β/Smad (TGF-β/Smad)信号传导增加。检测到皮肤脂质过氧化和血液DNA氧化水平较低,血液谷胱甘肽含量较高,抗氧化转录因子Nrf2相关的过氧化氢酶和人超氧化物歧化酶1 (SOD1)蛋白以及谷胱甘肽信使核糖核酸水平增加。CS提取物可以通过抗氧化和抗炎机制减少UVB诱导的皮肤损伤。
李浩楠等[35]在对玉米须总黄酮活性成分研究的基础上,通过正交设计对一款含玉米须总黄酮美容产品的基质进行优化,确定了最终制剂处方。优化后的制剂处方为,水相组分:氮酮 2%、尼泊金乙酯 0.1%、甘油 10%、单硬脂酸甘油酯 5%、乳化剂三乙醇胺 4%、玉米须总黄酮 5%;油相组分:液状石蜡 10%、白凡士林5%、硬脂酸 10%。该研究结果为进一步研制一款具有抗氧化作用的美容产品奠定基础。
4.6 细胞毒作用
玉米须总黄酮提取物具有显著的抗肿瘤活性,已有报道玉米须提取物(SME)可显著抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长,显著延长S180 荷瘤鼠存活时间,并增强体外淋巴细胞转化功能[36]。Lee等[37]研究了玉米须提取物主要活性成分maysin 对雄激素依赖性人前列腺癌症细胞(PC-3)的细胞毒活性。结果表明,maysin可剂量依赖性地降低PC-3 细胞的活性,在200 μg/ml剂量时抑制了87%的PC-3细胞活性。Maysin可显著诱导凋亡细胞死亡、DNA断裂、MMP去极化,并降低B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和半胱天冬酶-3酶原抗体(PRO-CASPASE-3)表达水平;显著减少蛋白激酶B(Akt)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)的磷酸化;与其他已知抗癌药物 [包括氟尿嘧啶(5-FU)、依托泊苷、顺铂或喜树碱] 联合,可协同增强PC-3细胞凋亡性死亡的作用。这些结果首次证实,maysin可通过线粒体依赖性通路诱导PC-3癌细胞株的细胞凋亡,并可能对化疗耐药或雄激素依赖性人类前列腺癌具有强大的治疗潜力。
4.7 降脂作用
长期以来,玉米须及其提取物作为一种传统的民间药物在世界许多地方被广泛应用,玉米须提取物作为茶和功能食品添加剂具有抗高脂血症和抗糖尿病的特性[38]。然而,这些研究大多是使用玉米须的粗提取物进行的,关于玉米须提取物中单个成分的生物和药理活性的研究一直很少。
Lee等[39]利用小鼠前脂肪细胞(3T3-L1)和C57BL/6小鼠模型,研究了玉米须中主要黄酮类化合物maysin 在体外和体内的潜在抗肥胖作用。Maysin能降低细胞内脂滴和TG的水平,并下调了3T3-L1细胞中转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBP-α)、转录因子CCAAT/增强子结合蛋白β(C/EBP-β)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和急性期蛋白2(aP2)的蛋白质表达水平,抑制细胞内脂质积聚和脂肪细胞分化。Maysin通过激活胱天蛋白酶级联反应和线粒体功能障碍诱导3T3-L1细胞凋亡,最终导致脂肪组织质量减少。动物实验表明,maysin(25 mg/kg体重)可降低高脂饮食(HFD)喂养的C57BL/6小鼠的体重增重和附睾脂肪重量,降低了小鼠血清TG、总胆固醇、LDL胆固醇和葡萄糖的水平。这些结果首次表明maysin在体外和体内具有降脂活性,发挥抗肥胖作用,是玉米须提取物的主要有效成分。
5. 安全性研究
玉米须在中国和许多其他国家作为传统草药或功能性食品使用历史悠久,曾被1977版《中国药典》收载。因此,对玉米须的安全性评价具有重要意义。Peng等[40]评估了玉米须黄酮苷提取物(FMS)对小鼠的亚慢性毒性和遗传毒性。在亚慢性毒性研究中,小鼠口服FMS 2.50 g/(kg·d)、5.00 g/(kg·d)和10.00 g/(kg·d),连续28 d。实验结束时,检查一般临床症状、死亡率、血液学、生化和组织病理学参数。通过微核实验和精子畸形实验对FMS的遗传毒性进行评价。结果显示,实验期间所有动物均存活,与对照组相比,所有FMS治疗组均未观察到统计学显著差异或毒理学相关的差异;未观察到的不良反应水平(NOAEL)剂量确定为10 g/(kg·d)。根据微核实验和精子畸形实验的结果,即使在实验上限剂量10 g/(kg·d)时,也没有在体细胞或生殖细胞中发现遗传毒性的证据。
Ha等[41]报道了玉米须提取物对ICR小鼠的急性和亚急性毒性。小鼠口服灌胃玉米须提取物2 g/(kg·d),测试其急性毒性,记录14 d的临床症状、死亡率和体重变化。在实验期间,所有药物组均未观察到死亡或异常症状。与对照组相比,体重没有任何显著变化。玉米须提取物的致死剂量估计超过2 g/kg。小鼠口服灌胃玉米须提取物500 mg/(kg·d),连续4周,测定体重、水和食物消耗量以及器官重量。玉米须提取物对体重、水分摄入、食物消耗、尿液参数、临床化学或器官重量没有相关毒性影响。组织病理学检查显示没有异常,确定玉米须提取物的最大无毒剂量超过500 mg/kg。
Saheed等[42]评估了Wistar大鼠给予100、200、400 mg/kg体重的玉米须水提取物1、7、14、21和28 d后,对血液学指标的毒理学影响,并在实验结束后分析了其脂质参数。在所有测试剂量下,玉米须水提取物对红细胞、红细胞压积、血红蛋白、平均红细胞体积、平均红血球血红蛋白、平均白细胞血红蛋白浓度和平均血小板体积没有任何显著影响(P>0.05)。研究还表明,玉米须水提取物可显著升高血清白细胞、血小板、淋巴细胞、高密度脂蛋白胆固醇水平;显著降低总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和动脉硬化指数。研究结果显示,在实验剂量范围内,玉米须水提取物不具有血液毒性,并且可能是治疗冠心病的良好候选药物。以上研究结果表明,玉米须提取物作为功能性食品、食品添加剂和天然药物的使用是安全的。
6. 结论
近10年来,玉米须黄酮在食品、保健品及药品领域的应用越来越广泛,相关研究受到了国内外众多学者的关注。玉米须黄酮化学成分的研究发现了新的黄酮碳苷,丰富了玉米须黄酮类化合物的种类;多项药理学研究证实玉米须黄酮具有抗糖尿病、抗炎镇痛、细胞毒、护肤、神经保护、抗痛风以及降脂等作用,拓展了玉米须应用功效;安全性评价为玉米须黄酮的安全应用提供了理论依据。综上,玉米须黄酮的应用及市场仍具有很大的潜力,还需要深入系统的研究为玉米须黄酮的应用提供理论依据。
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表 1 三唑类抗真菌药与他汀类药物体内代谢特点
药名 代谢酶 转运体 CYP
3A4CYP
2C9CYP
2C19CYP
2C8P-gp
(ABCB1)BCRP
(ABCG2)氟康唑 XdOb XdOb XdOa X 伊曲康唑 XOa XO O 伏立康唑 XOa XOc XOc 泊沙康唑 Oa XO 阿托伐他汀 Xe X X 辛伐他汀 Xe X 洛伐他汀 Xe X X 匹伐他汀 Xd 瑞舒伐他汀 Xd X X 氟伐他汀 X Xe X 西立伐他汀 X Xe 普伐他汀 肝代谢,不依赖P450酶 X X 注:X.底物;O.抑制剂;a.强效;b.中效;c.弱效;d.很少被该酶代谢;e.主要代谢酶;P-gp. P-糖蛋白;BCRP. 乳腺癌耐药蛋白 表 2 三唑类抗真菌药与他汀类药物的相互作用机制
他汀类药物 三唑类抗真菌药 氟康唑 伊曲康唑 伏立康唑 泊沙康唑 阿托伐他汀 ①竞争CYP3A4酶,他汀代谢可能减少;②中度抑制CYP3A4酶,抑制他汀代谢;③竞争性结合P-gp,他汀外排可能受阻 ①竞争CYP3A4酶,他汀代谢可能减少;②强抑制CYP3A4酶,抑制他汀代谢;③竞争性结合P-gp,同时抑制P-gp,他汀外排可能受阻;④抑制BCRP,他汀外排可能受阻 ①竞争CYP3A4酶,他汀代谢可能减少;②强抑制CYP3A4酶,抑制他汀代谢 ①强抑制CYP3A4酶,抑制他汀代谢;②竞争性结合P-gp,同时抑制P-gp,他汀外排可能受阻 辛伐他汀 与阿托伐他汀相同 与阿托伐他汀①②③相同 与阿托伐他汀相同 与阿托伐他汀相同 洛伐他汀 与阿托伐他汀相同 与阿托伐他汀相同 与阿托伐他汀相同 与阿托伐他汀相同 匹伐他汀 中度抑制CYP2C9酶,但他汀经该酶代谢的量少,受影响较小 无相互作用 ①竞争CYP2C9酶,但他汀经该酶代谢的量少,受影响较小;②弱抑制CYP2C9酶,但他汀经该酶代谢的量少,受影响较小 无相互作用 瑞舒伐他汀 ①与匹伐他汀相同;②与阿托伐他汀③相同 与阿托伐他汀③④相同 与匹伐他汀相同 与阿托伐他汀②相同 氟伐他汀 ①中度抑制CYP2C9酶和CYP3A4酶,抑制他汀代谢;②竞争CYP2CP、CYP3A4酶,他汀代谢可能减少 与阿托伐他汀②相同 ①竞争CYP3A4酶,强抑制该酶,他汀代谢可能减少;②竞争CYP2C9酶,弱抑制该酶,他汀代谢可能减少 与阿托伐他汀①相同 西立伐他汀 ①中度抑制CYP3A4酶,抑制他汀代谢;②竞争CYP3A4酶,他汀代谢可能减少 与阿托伐他汀②相同 与氟伐他汀①相同 与阿托伐他汀①相同 普伐他汀 与阿托伐他汀③相同 与阿托伐他汀③④相同 无相互作用 与阿托伐他汀②相同 表 3 三唑类抗真菌药与他汀类药物相互作用的警示
他汀类
药物三唑类抗真菌药 氟康唑 伊曲康唑 伏立康唑 泊沙康唑 阿托伐他汀 慎用他汀最低剂量 他汀≤20mg/d 慎用他汀最低剂量 禁忌 辛伐他汀 肌病和横纹肌溶解的风险增加 避免或禁忌a 禁忌 禁忌 洛伐他汀 肌病和横纹肌溶解的风险增加 避免或禁忌a 禁忌 禁忌 匹伐他汀 ITZ 200 mg/d +匹伐他汀第 4 天单剂 4 mg,
共 5 d,AUC减少 23%,Cmax下降22%N N 瑞舒伐他汀 无相互作用 ITZ 200mg/d,用药5 d+瑞舒伐他汀10mg/单剂,较单用瑞舒伐他汀的AUC增加1.4倍 N N 氟伐他汀 他汀≤20mg/d或氟伐他汀的暴露量和血药浓度峰值分别升高了约84%
和44%,慎用α他汀受到的影响很小或无影响α 调整他汀类药物的剂量 N 西立伐他汀 N 无相互作用α 调整他汀类药物的剂量 N 普伐他汀 FCZ 200mg 静脉注射6 d+普伐他汀20mg 口服,AUC减少34%,Cmax下降 33% ITZ 200 mg/d口服+普伐他汀40mg/d口服,持续30天, AUC增加11%,Cmax升高17% 无相互作用α 无相互作用α 注:α.国内药品说明书提示;N.未查到有关的相互作用资料;其余内容均为FDA说明书提示 表 4 优化前后三唑类抗真菌药与他汀类药物合用情况对比
三唑类
抗真菌药相互作用药物 警示 日均次数 优化前 优化后 氟康唑 阿托伐他汀钙片 慎合用 10.03±6.29 0.70±0.95 匹伐他汀钙片 无 0 0 辛伐他汀钙片 慎合用 2.56±2.10 0.63±0.81 瑞舒伐他汀钙片 无 0 0 伊曲康唑 阿托伐他汀钙片 慎合用 5.76±2.35 0.73±0.87 匹伐他汀钙片 无 0 0 辛伐他汀钙片 禁合用 2.07±1.94 0.50±0.78 瑞舒伐他汀钙片 无 0 0 伏立康唑 阿托伐他汀钙片 慎合用 4.28±2.12 0.57±0.82 匹伐他汀钙片 无 0 0 辛伐他汀钙片 禁合用 0.66±0.89 0.30±0.60 瑞舒伐他汀钙片 无 0 0 合计 25.36 3.43 -
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