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消肿止痒颗粒（XZG）是上海市浦东新区公利医院的院内制剂，由苦参、生地榆、炒椿皮和石榴皮四味药组成，具有凉血消肿、燥湿止痒的功效[1-2]，可用于痈疡肿毒、疔疮、湿疹、痤疮、皮炎、蚊虫叮咬等皮肤肿痛、瘙痒症状[3-4]，临床上主要用于减轻术后肛周疼痛、瘙痒、创面水肿及创面渗出等并发症，从而加速创面愈合。XZG原剂型为汤剂，使用方法为水煎提取、加水稀释后坐浴、擦洗，其过程繁琐，且汤剂存在煎煮时间长、易霉变、携带麻烦等缺陷。因此，将其改为颗粒剂使其便于使用，从而提高患者的适应性。
XZG临床疗效良好且应用广泛，现有研究中仅有对该方中部分单味药材及其成分进行定性鉴别、定量方法的初步建立和评价研究[5-11]，其单味药组成中药虽然均收载于《中国药典》中，但部分药材的质量标准仍有很大的提升空间。例如《中国药典》尚未对椿皮的指标成分进行含量测定及限度规定；现行药典记载的苦参碱和氧化苦参碱含量测定方法存在溶剂复杂、检测时间长等不足。项目组前期研究对XZG原汤方水提工艺进行考察，采用正交实验结合多指标综合评分法得到消肿止痒汤方最佳提取工艺，基于复方最佳提取工艺，进行了消肿止痒颗粒的制备[12]。然而，对XZG的质量评价还有待进一步完善，其质量需进一步控制。
综上所述，本研究基于前期研究基础及《中国药典》中苦参、地榆、椿皮和石榴皮的定性鉴别方法，建立了TLC鉴别方法对XZG中的苦参、地榆、椿皮、石榴皮进行定性鉴别，并参考《中国药典》中苦参、地榆、石榴皮以及文献中椿皮的定量分析方法，优化和建立了UPLC方法测定XZG中的没食子酸、鞣花酸、地榆皂苷Ⅰ、铁屎米酮及HPLC方法测定苦参碱和氧化苦参碱含量，为保障其质量和临床合理应用提供参考。
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Agilent
1260 infinity Ⅱ 高效液相色谱仪、Agilent ZORBAX NH2色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；ACQUITY UPLC H-Class超高效液相色谱仪、Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm，沃特世）；恒温鼓风干燥箱（DHG-9070A，上海精宏）；旋转蒸发仪（N-1300 ，EYELA）；Milli-QA10 TOC纯水系统监测器（默克）；离心机（SF-TGL-16M，上海菲恰尔）；自动煎药壶（FT-30H，深圳正云）；薄层色谱数码成像系统和ATS 4全自动点样仪（瑞士CAMAG）；QUINTIX35-1CN十万分之一、BCE124I-1CCN万分之一电子分析天平（北京赛多利斯）；超声波清洗仪（KQ600KDE，昆山超声）。 -
XZG颗粒样品（16批，批号：20230501~20230516）、缺苦参XZG颗粒（20230501-1）、缺炒椿皮XZG颗粒（20230501-2）、缺石榴皮XZG颗粒（20230501-3）和缺地榆XZG颗粒（20230501-4）均由上海万仕诚药业有限公司提供；对照品苦参碱（批号：3940）、氧化苦参碱（批号：10260）、槐定碱（批号：3412）、鞣花酸（批号：14325）、没食子酸（批号：5946）、地榆皂苷I（批号：6750）、铁屎米酮（批号：3035）纯度均≥98%，购自上海诗丹德；对照药材苦参（批号：5678）、地榆（批号：4067）、石榴皮（批号：3742）、椿皮（批号：4208）购自上海诗丹德；薄层色谱硅胶预制板（银龙，200 mm×100 mm，GF254，0.23 mm，5 ~20 μm，批号：20191126，烟台华阳新材料）；分析级甲酸（批号：0563）、二氯甲烷（批号：0517）、甲醇（批号：4206）均购自国药集团；HPLC级氨水（批号：3421，赛默飞）、磷酸（批号：3021，CNW）；HPLC级甲醇（批号：4219）、乙腈（批号：3014）均购自北京沃凯。
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分别取XZG适量（批号：20230501~20230503），研磨成细粉，称取约0.5 g，精密加入20 ml纯水，称重，超声提取30 min（功率1 400 W，频率40 KHz），放置冷却再称定，用纯水补足失重后摇匀，离心后取上清液，得供试品溶液。同法制备缺石榴皮阴性样品溶液、缺地榆阴性样品溶液、缺地榆和石榴皮阴性样品溶液。称取对照品没食子酸、鞣花酸、地榆皂苷I适量，加甲醇分别制成浓度为0.830 0、0.598 0、0.608 0 mg/ml 的对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，分别吸取阴性样品溶液各10 μl、对照品溶液（没食子酸5 μl、鞣花酸4 μl、地榆皂苷I 4 μl）和供试品溶液11 μl，将其点于同一硅胶G薄层板上，甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（8∶5∶2∶2）展开，取出晾干，置紫外灯254 nm下进行检视（图1A）。供试液在没食子酸与鞣花酸对应位置显相同颜色斑点。取出硅胶板，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105℃下加热至斑点显色清晰，日光下进行检视（图1B），供试液在地榆皂苷I对应位置显相同颜色斑点。各阴性样品在相应位置未见干扰（见图1）。
图 1 XZG中石榴皮、地榆的TLC图
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取XZG粉末（批号：
20230501 ）约0.5 g，精密加入二氯甲烷20 ml，加入浓氨调节pH至8~9，精密称定后进行超声（功率1 400 W，频率40 KHz）30 min，放置冷却再称定，二氯甲烷补足失重后摇匀，离心后取10 ml上清液，于圆底烧瓶中旋蒸至干，残渣加甲醇溶解后转移至10 ml量瓶，定容，过滤，得供试品溶液。同法分别制备缺苦参和缺椿皮阴性样品溶液。分别称取铁屎米酮对照品、苦参碱对照品、氧化苦参碱对照品以及槐定碱对照品适量，加甲醇分别制成浓度为0.547 0、0.342 0、0.359 0、0.396 0 mg/ml的对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，分别吸取缺椿皮阴性样品溶液20 μl、铁屎米酮对照品溶液0.8 μl、供试品溶液各20 μl点于同一条硅胶G薄层板上，照2.1.1项下展开系统展开，取出晾干，置紫外灯366 nm下检视。供试液在铁屎米酮对应位置，显相同颜色斑点。缺椿皮阴性样品在相应位置未见干扰（见图2）。照薄层色谱法（通则0502）试验，分别吸取缺苦参阴性样品溶液25 μl，苦参碱对照品溶液、氧化苦参碱对照品溶液、槐定碱对照品溶液各7 μl，供试品溶液各25 μl，点于同一硅胶薄层板上，甲苯-乙酸乙酯-甲醇-浓氨（1∶2∶3∶0.3）展开，取出晾干，然后喷以碘化铋钾试液，在日光下进行检视，供试液在苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱对应位置，显示出相同颜色的斑点。缺苦参阴性样品在相应位置未见干扰（见图3）。
图 2 XZG中椿皮的TLC图
图 3 XZG中苦参的TLC图
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取XZG粉末（批号：20230501）约0.5 g，精密称定，加入20 ml二氯甲烷，加入浓氨调节pH至8~9，精密称定后超声（功率1 400 W，频率40 KHz）30 min，放置冷却再称定，二氯甲烷补足失重，摇匀，离心后取10 ml上清液，于圆底烧瓶中旋蒸至干，10 ml甲醇溶解，滤过，取续滤液即得。
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取缺苦参XZG颗粒粉末（
20230501 -1）约0.5 g，精密称定，按照“2.2.1”项下制备供试品溶液，即缺苦参的阴性供试品溶液。 -
精密称定苦参碱、氧化苦参碱对照品适量，加甲醇溶解制得混合对照品溶液（苦参碱：0.180 0 mg/ml；氧化苦参碱：0.200 5 mg/ml）。
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Agilent HPLC色谱仪；Agilent ZORBAX NH2色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；甲醇-乙腈-3%磷酸水溶液（10∶80∶10）等度洗脱15 min；柱温设置为30℃；波长设为220 nm；流速：1 ml/min；进样体积：10 μl。色谱图见图4。
图 4 混合对照品、XZG样品和缺苦参XZG阴性样品特征色谱图
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取“2.2.3”项下混合对照品溶液，依次稀释成不同浓度的混合溶液，照“2.2.4”方法测定，以对照品浓度为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y）进行线性回归，计算，各成分均显示出良好的线性。结果见表1。
表 1 各指标成分的回归方程、相关系数、线性范围、精密度、重复性及稳定性考察结果
成分 回归方程 r 线性范围（μg/ml） 精密度（RSD%） 重复性（RSD%） 稳定性（RSD%） 日间精密度 日内精密度 苦参碱 Y=7 955.4X+5.598 3 0.999 1 5.630~180.0 0.83 2.27 0.27 0.70 氧化苦参碱 Y=6 761.4X−0.112 7 0.998 8 6.270~200.5 0.63 2.35 0.26 0.78 没食子酸 Y=4 352 367.41X+32 527.4 0.999 1 51.875~1 660.000 0.36 0.31 0.78 0.75 鞣花酸 Y=21 002X+10 708.4 0.999 7 37.375~1 196.000 0.81 0.89 1.00 1.75 地榆皂苷I Y=659 973X+1 351 0.999 9 37.894~1 212.600 0.41 1.09 1.02 1.98 铁屎米酮 Y=7 238 386.89X+3 210 0.999 4 0.531~17.000 0.70 0.88 1.98 2.70 -
取混合对照品溶液（苦参碱：45.00 μg/ml，氧化苦参碱：50.13 μg/ml），按“2.2.4”方法进样，记录峰面积。同1 d内连续进样6次，计算各指标成分日内精密度，苦参碱RSD为0.83%，氧化苦参碱为0.63%，均小于2%；连续3 d进样，计算各指标成分日间精密度，苦参碱RSD为2.27%，氧化苦参碱为2.35%，均小于3%。各指标成分日内、日间精密度良好。结果见表1。
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取XZG粉末（批号：20230501），按“2.2.1”方法项下制备供试品溶液，按“2.2.4”方法分别于 0、2、4、6、8、10、12、24 h 进样测定，分别计算各成分峰面积的RSD，苦参碱RSD为0.70%，氧化苦参碱为0.78%，均小于3%。表明XZG溶液24 h内稳定。结果见表1。
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取同一批样品粉末6份（批号：20230501），按“2.2.1”方法项下制备供试品溶液，按“2.2.4”色谱条件项下进样测定，计算峰面积。苦参碱、氧化苦参碱质量分别为1.278、5.367 mg/g，RSD分别为0.27%、0.26%。该方法的重复性良好。结果见表1。
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取同一批样品粉末9份（批号：20230501），精密称定，每份约0.25 g，置具塞锥形瓶中，按XZG中各成分量的50%、100%、150%加入各对照品溶液，按“2.2.1”方法项下制备样品，按“2.2.4”方法测定，计算回收率。结果表明，苦参碱（平均加样回收率：97.47%，RSD：1.04%）、氧化苦参碱（平均加样回收率：101.13%，RSD：0.93%）的加样回收率结果符合要求。结果见表2。
表 2 6个指标成分的加样回收率结果
成分 含有量（mg） 加入量（mg） 测得量（mg） 加样回收率（%） 平均加样回收率（%） RSD（%） 苦参碱 0.319 5 0.159 8 0.475 0 97.32 97.47 1.04 0.156 3 0.471 3 97.09 0.160 7 0.475 8 97.25 0.315 8 0.630 0 98.31 0.320 5 0.632 0 97.50 0.320 3 0.631 8 97.49 0.476 8 0.784 0 97.43 0.478 1 0.785 3 97.43 0.477 8 0.785 0 97.43 氧化苦参碱 1.342 0.670 8 2.021 101.26 101.13 0.93 0.671 0 2.022 101.42 0.674 2.020 100.64 1.339 2.696 101.12 1.331 2.688 101.15 1.343 2.700 101.13 2.014 3.378 101.14 2.012 3.377 101.14 2.013 3.377 101.14 没食子酸 2.358 1.179 3.537 100.07 100.07 0.69 1.180 3.538 100.07 1.194 3.553 100.07 2.358 4.716 100.04 2.358 4.721 100.24 2.360 4.718 100.03 3.536 5.894 100.02 3.536 5.895 100.04 3.535 5.893 100.02 鞣花酸 2.808 1.404 4.187 98.20 98.43 0.47 1.404 4.186 98.16 1.403 4.184 98.06 2.808 5.575 98.51 2.808 5.575 98.51 2.817 5.581 98.42 4.211 6.957 98.52 4.205 6.949 98.46 4.215 6.981 99.00 地榆皂苷I 1.753 0.876 6 2.631 100.14 100.15 1.60 0.877 6 2.632 100.14 0.874 7 2.629 100.15 1.752 3.517 100.64 1.751 3.503 99.93 1.751 3.508 100.22 2.625 4.380 100.05 2.630 4.384 100.05 2.630 4.385 100.05 铁屎米酮 0.02980 0.016 20 0.045 82 98.77 98.38 1.59 0.013 90 0.043 50 99.10 0.017 10 0.046 55 98.82 0.027 50 0.056 04 95.45 0.029 70 0.059 03 98.57 0.026 20 0.055 32 97.42 0.044 60 0.074 04 99.22 0.048 00 0.077 51 99.43 0.047 10 0.076 36 98.67 -
取XZG粉末（批号：
20230501 ）约0.5 g，精密称定，加入20 ml纯水，称定后超声（功率1 400 W，频率40 KHz）30 min，放置冷却再称定，用纯水补足失重后摇匀，离心得到上清液。 -
缺椿皮的阴性供试品溶液：取缺椿皮的XZG粉末（批号：
20230501 -2）约0.5 g，精密称定，照“2.3.1”项下制备缺地榆的阴性供试品溶液。缺石榴皮的阴性供试品溶液：取缺石榴皮的XZG粉末（批号：
20230501 -3）约0.5 g，精密称定，照“2.3.1”项下制备缺地榆的阴性供试品溶液。缺地榆的阴性供试品溶液：取缺地榆的XZG粉末（批号：
20230501 -4）约0.5 g，精密称定，照“2.3.1”项下制备缺地榆的阴性供试品溶液。 -
分别取对照品铁屎米酮、没食子酸、鞣花酸、地榆皂苷Ⅰ适量，精密称定，加甲醇制成混合对照品溶液（铁屎米酮：0.017 00 mg/ml；没食子酸：1.660 mg/ml；鞣花酸：1.196 mg/ml；地榆皂苷Ⅰ：1.213 mg/ml）。
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Waters UPLC色谱仪；Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；乙腈（A）-0.05%磷酸水溶液（B）梯度洗脱，即：0~5 min，3% A；5~6 min，3%~15% A；6~11 min,15% A；11~11.1 min，15%~26% A；11.1~15 min，26% A；15~15.1 min，26%~30% A；15.1~21 min，30%~36% A；21~25 min，36%~40% A；柱温设置为30℃；波长设为254 nm、203 nm；流速：0.4 ml /min；进样体积：2 μl。色谱图见图5。
图 5 没食子酸、鞣花酸、地榆皂苷Ⅰ、铁屎米酮特征色谱图
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取“2.3.3”项下的铁屎米酮、没食子酸、鞣花酸和地榆皂苷Ⅰ对照品混合溶液，依次稀释成不同浓度对照品混合溶液，按“2.3.4”方法测定，以对照品浓度为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y）进行线性回归计算，4个成分均显示出良好的线性。结果见表1。
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取质量浓度分别为0.017 00、1.196、1.660、1.213 mg/ml的铁屎米酮、鞣花酸、没食子酸、地榆皂苷Ⅰ的对照品混合溶液，测定峰面积。同1 d内连续进样6次，计算各指标成分的日内精密度，RSD均小于2%，即鞣花酸RSD为0.81%、没食子酸RSD为0.36%、铁屎米酮RSD为0.41%、地榆皂苷ⅠRSD为0.70%；连续3 d进样，计算各指标成分的日间精密度，RSD均小于3%，即鞣花酸RSD为0.89%、没食子酸RSD为0.31%、铁屎米酮RSD为1.09%、地榆皂苷ⅠRSD为0.88%。各指标成分日内、日间精密度良好。结果见表1。
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取XZG粉末适量（批号：
20230501 ），按“2.3.1”方法项下制备供试品溶液，按“2.3.4”方法分别于0、2、4、6、8、10、12、24 h测定，各指标成分的峰面积RSD均小于3%，即鞣花酸RSD为1.75%、没食子酸RSD为0.75%、铁屎米酮RSD为2.70%、地榆皂苷ⅠRSD为1.98%。供试品溶液24 h内稳定。结果见表1。 -
取同一批样品粉末6份（批号：20230501），按“2.3.1”项下方法制备供试品溶液，按“2.3.4”方法测定，计算各指标成分峰面积。没食子酸、鞣花酸、地榆皂苷Ⅰ、铁屎米酮质量分别为9.430、11.23、7.013、0.119 0 mg/g，RSD分别为0.78%、1.00%、1.02%、1.98%。该方法的重复性良好。结果见表1。
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取同一批样品粉末9份（批号：20230501），精密称定，每份约0.25 g，置具塞锥形瓶中，按XZG中各成分量的50%、100%、150%加入各对照品溶液，按“2.3.1”项下方法制备样品，按“2.3.4”方法测定，计算各指标成分的回收率。没食子酸、鞣花酸、地榆皂苷Ⅰ和铁屎米酮的平均加样回收率分别为100.07%、98.43%、100.15%、98.38%；RSD值分别为0.69%、0.47%、1.60%、1.59%，均符合要求。结果见表2。
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对16批XZG中的6个指标性成分进行定量测定，结果见表3。结果表明，制备所得16批次XZG各指标成分的含量相对比较稳定，以鞣花酸和没食子酸的含量相对较高，铁屎米酮的含量相对较低。
表 3 消肿止痒颗粒含量测定（n=3）
批号 含量（mg/g） 没食子酸 鞣花酸 地榆皂苷Ⅰ 铁屎米酮 苦参碱 氧化苦参碱 20230501 9.430 11.23 7.013 0.119 1 1.278 5.367 20230502 9.534 11.40 7.066 0.071 3 1.539 5.263 20230503 9.637 11.42 6.906 0.193 2 1.720 5.812 20230504 8.526 9.545 5.850 0.098 2 1.796 5.528 20230505 9.247 10.59 6.091 0.040 3 1.138 4.709 20230506 8.459 9.619 5.911 0.173 3 1.739 7.280 20230507 8.504 9.475 6.233 0.080 4 1.425 6.947 20230508 8.860 9.934 6.168 0.089 1 1.019 4.588 20230509 8.296 9.738 6.661 0.062 33 1.461 5.741 20230510 8.123 9.246 6.001 0.107 2 1.215 6.087 20230511 8.163 9.566 6.270 0.077 13 0.970 3 5.068 20230512 9.160 10.49 6.414 0.046 23 0.913 1 3.531 20230513 8.756 10.18 6.415 0.102 1 1.308 6.315 20230514 9.260 10.64 7.273 0.108 3 1.132 5.443 20230515 9.619 11.84 7.024 0.069 2 0.994 5.891 20230516 9.702 11.45 6.585 0.130 2 1.014 5.003 -
XZG主要由苦参、地榆、石榴皮以及炒椿皮四味药材组成，苦参中含有大量的生物碱，且多数为喹诺西啶类生物碱，其中以苦参碱、氧化苦参碱、异苦参碱和槐定碱为主要活性成分[18]，研究表明其具有较强的抗病毒[19]、抗肿瘤[20-21]、抗炎镇痛[22]、保肝[23]等药理作用；地榆中的地榆皂苷Ⅰ具有减轻炎症反应作用[24]，临床上通常用于治疗血液系统的疾病；石榴皮中含有丰富的鞣花酸等酚类成分，具有抗氧化、抑菌[25]、抗病毒[26]、预防糖尿病[27]等多种生理活性功能，没食子酸是石榴皮中另一主要多酚类活性成分，具有抗炎抑菌[28]、保护中枢神经系统[29]等功效；尽管2020年版《中国药典》尚未收载椿皮的质控指标成分，但铁屎米酮作为椿皮中特征生物碱类成分，具有较强的抗菌活性，已有相关研究将其用于椿皮的质量控制[30]。基于上述药理活性，本实验选取苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱、没食子酸、鞣花酸、地榆皂苷Ⅰ和铁屎米酮作为质量控制评价指标，可以较好地反映XZG的药理活性及临床疗效，上述成分的选取与2020版《中国药典》中相应药材的质控指标一致。
在本实验椿皮、石榴皮及地榆的TLC鉴别中，对不同展开溶剂进行考察，最终发现以甲苯：乙酸乙酯：甲酸为展开剂可以实现没食子酸与地榆皂苷Ⅰ的分离；同时，考察不同展开溶剂比例，发现减少甲苯比例并增加甲醇为展开溶剂，可以实现鞣花酸与没食子酸的分离，其原因可能为：两者均为酚酸类成分，而后者极性显著高于前者，增加大极性展开剂比例有利于提高两者分离效果。因此，最终确定了以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸∶甲醇（8∶5∶2∶2）为没食子酸、鞣花酸和地榆皂苷Ⅰ展开系统，该展开系统可以较好地实现三者间的分离，所建立的TLC鉴别方法实现了同一展开条件下，采用不同的检视手段对XZG中三种成分同时鉴别，该鉴别方法分离度好，斑点清晰，缩短了定性鉴别时间，提高了鉴别效率，同时降低了药物鉴别成本。在苦参的TLC鉴别实验中，通过对展开剂比例的考察，最终确定了以甲苯∶乙酸乙酯∶甲醇∶浓氨（1∶2∶3∶0.3）为展开溶剂对苦参中三个成分进行鉴别，该方法简化了2020版《中国药典》中苦参TLC鉴定的复杂展开体系，方法简单灵敏、快速可靠。在课题组前期研究中，对16批XZG的苦参碱、氧化苦参碱、鞣花酸、没食子酸、地榆皂苷Ⅰ和铁屎米酮六个成分进行含量测定，结果发现不同批次XZG各指标成分含量较为一致，铁屎米酮含量低于其他指标成分，考虑与其提取方法有关，但因其具有较强抑菌生物活性，仍将其纳入评价指标。本实验结果表明，16批XZG质量均一、稳定，本研究为XZG的质量的优劣提供了科学合理的评价依据。
Study on the quality standard of Xiaozhong Zhiyang Granules
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摘要:
目的 建立消肿止痒颗粒（XZG）的质量标准。 方法 通过薄层色谱（TLC）对消肿止痒颗粒中苦参、石榴皮、地榆和椿皮进行定性鉴别。根据目标化合物化学性质的不同，分别采用超高效液相色谱（UPLC）法测定没食子酸、鞣花酸、地榆皂苷I和铁屎米酮的含量；采用高效液相色谱（HPLC）法测定苦参碱和氧化苦参碱的含量。 结果 TLC定性鉴别方法准确，专属性较强，且各斑点清晰，分离度好，阴性对照无干扰。所建立的苦参碱、氧化苦参碱、鞣花酸、没食子酸、地榆皂苷I和铁屎米酮多成分含量同时测定方法，精密度试验、稳定性试验、重复性试验的结果RSD均小于3.00%，加样回收率为97.47% ~ 101.13%。 结论 此方法操作简单、重复性良好、专属性强、结果准确，可用于院内制剂消肿止痒颗粒的质量控制。 Abstract:Objective To establish a quality standard for Xiaozhong Zhiyang Granules（XZG ） . Methods Qualitative identification of each composed single herbs such as Radix Sophorae Flavescentis, Granati Pericarpium, Radix Sanguisorbae, and Cortex Ailanthi in XZG was performed using thin-layer chromatography （TLC）. Owing to the different chemical properties of key quality bio-markers in XZG, two analytical methods were developed: Gallic acid, ellagic acid, ziyuglycoside I, and canthin-6-one were simultaneously quantified by ultra-performance liquid chromatography （UPLC）, whereas matrine and oxymatrine were analyzed by high-performance liquid chromatography （HPLC）. Results The optimized TLC identification methods were accurate and specific, and TLC spots of each composed raw materials were clear and well separated, and there was no interference with the negative control samples. The quantitative methods demonstrated excellent precision, stability, and repeatability, with relative standard deviations （RSD） below 3.0 % for all six analytes. Mean recoveries ranged from 97.47 % to 101.13 %. Conclusion The method was stable, reliable, simple, proprietary and reproducible, which could be used for the quality control of the hospital preparation of the XZG. -
图 1 XZG中石榴皮、地榆的TLC图
A. 荧光；B. 日光1. 缺地榆和石榴皮阴性；2. 缺地榆阴性；3. 缺石榴皮阴性；4. 没食子酸对照品；5. 鞣花酸对照品；6. 地榆皂苷I对照品；7~9. 供试品溶液批号20230501、20230502、20230503
图 5 没食子酸、鞣花酸、地榆皂苷Ⅰ、铁屎米酮特征色谱图
A. 混合对照品-254 nm；B. 缺炒椿皮XZG颗粒-254 nm；C. XZG颗粒-254 nm；D. 缺石榴皮XZG颗粒-254 nm；E. 混合对照品-203 nm；F. XZG颗粒-203 nm；G. 缺地榆XZG颗粒-203 nm；1. 没食子酸；2. 鞣花酸；3. 铁屎米酮；4. 地榆皂苷Ⅰ
表 1 各指标成分的回归方程、相关系数、线性范围、精密度、重复性及稳定性考察结果
成分 回归方程 r 线性范围（μg/ml） 精密度（RSD%） 重复性（RSD%） 稳定性（RSD%） 日间精密度 日内精密度 苦参碱 Y=7 955.4X+5.598 3 0.999 1 5.630~180.0 0.83 2.27 0.27 0.70 氧化苦参碱 Y=6 761.4X−0.112 7 0.998 8 6.270~200.5 0.63 2.35 0.26 0.78 没食子酸 Y=4 352 367.41X+32 527.4 0.999 1 51.875~1 660.000 0.36 0.31 0.78 0.75 鞣花酸 Y=21 002X+10 708.4 0.999 7 37.375~1 196.000 0.81 0.89 1.00 1.75 地榆皂苷I Y=659 973X+1 351 0.999 9 37.894~1 212.600 0.41 1.09 1.02 1.98 铁屎米酮 Y=7 238 386.89X+3 210 0.999 4 0.531~17.000 0.70 0.88 1.98 2.70 
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表 2 6个指标成分的加样回收率结果
成分 含有量（mg） 加入量（mg） 测得量（mg） 加样回收率（%） 平均加样回收率（%） RSD（%） 苦参碱 0.319 5 0.159 8 0.475 0 97.32 97.47 1.04 0.156 3 0.471 3 97.09 0.160 7 0.475 8 97.25 0.315 8 0.630 0 98.31 0.320 5 0.632 0 97.50 0.320 3 0.631 8 97.49 0.476 8 0.784 0 97.43 0.478 1 0.785 3 97.43 0.477 8 0.785 0 97.43 氧化苦参碱 1.342 0.670 8 2.021 101.26 101.13 0.93 0.671 0 2.022 101.42 0.674 2.020 100.64 1.339 2.696 101.12 1.331 2.688 101.15 1.343 2.700 101.13 2.014 3.378 101.14 2.012 3.377 101.14 2.013 3.377 101.14 没食子酸 2.358 1.179 3.537 100.07 100.07 0.69 1.180 3.538 100.07 1.194 3.553 100.07 2.358 4.716 100.04 2.358 4.721 100.24 2.360 4.718 100.03 3.536 5.894 100.02 3.536 5.895 100.04 3.535 5.893 100.02 鞣花酸 2.808 1.404 4.187 98.20 98.43 0.47 1.404 4.186 98.16 1.403 4.184 98.06 2.808 5.575 98.51 2.808 5.575 98.51 2.817 5.581 98.42 4.211 6.957 98.52 4.205 6.949 98.46 4.215 6.981 99.00 地榆皂苷I 1.753 0.876 6 2.631 100.14 100.15 1.60 0.877 6 2.632 100.14 0.874 7 2.629 100.15 1.752 3.517 100.64 1.751 3.503 99.93 1.751 3.508 100.22 2.625 4.380 100.05 2.630 4.384 100.05 2.630 4.385 100.05 铁屎米酮 0.02980 0.016 20 0.045 82 98.77 98.38 1.59 0.013 90 0.043 50 99.10 0.017 10 0.046 55 98.82 0.027 50 0.056 04 95.45 0.029 70 0.059 03 98.57 0.026 20 0.055 32 97.42 0.044 60 0.074 04 99.22 0.048 00 0.077 51 99.43 0.047 10 0.076 36 98.67
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表 3 消肿止痒颗粒含量测定（n=3）
批号 含量（mg/g） 没食子酸 鞣花酸 地榆皂苷Ⅰ 铁屎米酮 苦参碱 氧化苦参碱 20230501 9.430 11.23 7.013 0.119 1 1.278 5.367 20230502 9.534 11.40 7.066 0.071 3 1.539 5.263 20230503 9.637 11.42 6.906 0.193 2 1.720 5.812 20230504 8.526 9.545 5.850 0.098 2 1.796 5.528 20230505 9.247 10.59 6.091 0.040 3 1.138 4.709 20230506 8.459 9.619 5.911 0.173 3 1.739 7.280 20230507 8.504 9.475 6.233 0.080 4 1.425 6.947 20230508 8.860 9.934 6.168 0.089 1 1.019 4.588 20230509 8.296 9.738 6.661 0.062 33 1.461 5.741 20230510 8.123 9.246 6.001 0.107 2 1.215 6.087 20230511 8.163 9.566 6.270 0.077 13 0.970 3 5.068 20230512 9.160 10.49 6.414 0.046 23 0.913 1 3.531 20230513 8.756 10.18 6.415 0.102 1 1.308 6.315 20230514 9.260 10.64 7.273 0.108 3 1.132 5.443 20230515 9.619 11.84 7.024 0.069 2 0.994 5.891 20230516 9.702 11.45 6.585 0.130 2 1.014 5.003
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