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外科手术部位感染（SSI）是医疗保健相关感染的常见原因[1]，大多数SSI发生的平均时间为术后12 d[2]。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是指对已经批准的所有β内酰胺类抗菌药物有交叉耐药的金黄色葡萄球菌[3]。感染MRSA外科伤口较严重的患者，建议静脉输注糖肽类、利奈唑胺或达托霉素治疗[3]。因临床应用万古霉素经验丰富，为胃肠外首选[4]。但其治疗窗窄、不良反应多、血药浓度影响因素较多等特点，根据患者临床情况实施治疗药物监测（TDM）和个体化用药显得尤为重要。笔者介绍1例临床药师对足损伤术后感染MRSA患者进行药学监护的体会。
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患者，男，17岁，体重60 kg，2020-05-04因“车祸致左足开放性外伤，出血30 min”入院，主要诊断为足部开放性损伤伴骨折、足部损伤、跟腱断裂。05-05行Ⅰ期清创+骨折切开复位内固定+跟腱修复+甲床修复术，术后头孢呋辛预防48 h。05-07手术切口感染，给予头孢呋辛治疗，05-08行Ⅱ期清创+创面封闭式负压引流术。05-11出现发热，体温最高38.2 ℃，炎性指标异常升高，换用万古霉素1.0 g ivgtt q12h。05-12切口分泌物培养+药敏示：MRSA、多重耐药，万古霉素敏感。05-19行Ⅲ期左足清创+带蒂皮瓣转移修复+跟腱修复术，头孢呋辛1.5 g ivgtt q8h预防感染，术后次日切口感染，体温最高38.7 ℃，换用万古霉素1.0 g ivgtt q12h抗感染治疗。其他治疗：Ⅰ～Ⅲ期术后常规氟比洛芬酯注射液镇痛3 d，Ⅲ期术后地塞米松抗炎、甘油果糖消肿、氟比洛芬酯注射液镇痛3 d，改为双氯芬酸钠胶囊。05-22万古霉素血药浓度检测为4.08 μg/ml，05-23调整万古霉素剂量为1.0 g ivgtt q8h，停用甘油果糖、地塞米松，05-26停用双氯芬酸钠胶囊。05-25、05-29复测万古霉素血药浓度为8.41和10.23μg/ml。在增加万古霉素剂量的次日上午，患者出现面部潮红症状，调慢滴速，症状缓解至消失，未再出现类似ADR。05-29出现急性肝损伤，停用万古霉素，给予甘草酸二铵保肝治疗1周，06-04切口恢复良好，准予出院。两周后随访，肝功能恢复正常。
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术后第3天，患者发生足部切口感染，且为入院48 h后发生，予头孢呋辛治疗，体温、炎性指标未得到明显改善，临床药师高度怀疑为医院获得性MRSA。根据《哈里森感染病学》皮肤软组织感染治疗，对于社区或医院获得性金黄色葡萄球菌感染，对β-内酰胺类抗生素无应答，需换用抗MRSA药物治疗。临床药师建议换用万古霉素1.0 g ivgtt q12h治疗，医师采纳意见,当晚患者体温恢复正常。Ⅲ期手术预防用药，临床药师针对患者本次住院已检出MRSA，且近半年骨科MRSA检出率为62.5%，建议调整为万古霉素[5]，但医师未采纳药师建议。
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术后第3天，出现切口红肿热痛、大量渗出、发热，诊断外科切口感染明确，选择万古霉素。临床药师根据未接受血液透析的成人胃肠外万古霉素剂量推荐表[6]，结合患者体重、非重症感染、肌酐清除率指标，推荐初始剂量为1.0 g ivgtt q12 h。
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患者05-29因出现急性肝损伤，根据《万古霉素临床应用专家共识》[4]推荐疗程为7～14 d，患者用药9 d，临床药师根据患者临床症状无明显红肿热痛，炎性指标趋于正常，可停用抗菌药物治疗。
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05-19行Ⅲ期术后次日，切口出现感染征象，给予万古霉素抗感染治疗。05-20至05-23患者切口感染部位症状缓解不明显，一直低热状态。临床药师建议行万古霉素血药浓度监测，同时建议停用可能影响万古霉素血药浓度的甘油果糖，并参考《万古霉素个体化给药临床药师指引》[7]调整其剂量为1.0 g ivgtt q8 h。万古霉素剂量调整前血药浓度为4.08 μg/ml，调整后复测2次血药浓度分别为8.41、10.23 μg/ml。通过停用甘油果糖、TDM、调整万古霉素剂量，患者血药浓度显著升高，并达到有效治疗浓度[4]。
影响成年患者体内万古霉素的浓度因素包括年龄、中重度外周水肿、肾功能异常、肥胖及肾功能亢进等因素[8-9]。患者术后切口部位严重水肿，炎性反应明显，在一定程度上会对血液内稳态产生一定影响，导致机体代谢药物的能力也受到一定影响。万古霉素联合应用甘油果糖可能会严重影响其血药浓度，有研究显示[10]，渗透性药物能促进万古霉素在体内的清除和排泄，令血药浓度降低。本例患者本身存在严重组织水肿，同时使用渗透性药物甘油果糖，可能是影响万古霉素血药浓度过低的原因。肾功能亢进的原因包括烧伤、粒细胞缺乏伴发热、脓毒血症、创伤、蛛网膜下隙出血等[11]。该患者严重创伤入院，肌酐清除率为145.94 ml/min，存在肾功能亢进，可能在一定程度上导致患者万古霉素血药浓度过低。
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患者增加万古霉素使用剂量至1.0 g ivgtt q8 h，次日上午出现面部、颈部微潮红。临床药师结合患者用药史，采用诺氏评估量表评价ADR关联性，评分为7分，考虑很可能为万古霉素相关性引起的红人综合征（RMS）。RMS是在万古霉素输注期间或输注结束后立即出现的潮红，由组胺介导。组胺释放量一般与输注万古霉素的剂量和输注速度有关[12]。该患者在未调整万古霉素剂量之前，输注时间控制在60 min左右，一直未发生相关不良反应。临床药师建议先以给药速率≤10 mg/min输注（或1.0 g,输注时间≥100 min）[12]，并密切监护。结果减慢滴速后，患者潮红症状消退，并未再出现RMS症状。
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对于肾功能正常，合并肾损伤药物且疗程较长的患者，应密切监测肾功能[4]。本例患者在Ⅰ～Ⅲ期术后，常规使用非甾体类药物镇痛，为避免增加肾损伤可能性，结合患者疼痛评分3分，临床药师建议尽早停用非甾体类药物，或换用肾功能损伤最小的阿片类镇痛药[13]，医师采纳该意见。
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患者入院时肝功能正常，05-09开始用万古霉素1.0 g ivgtt q12 h治疗，05-16查肝功示ALT 51.7 U/L，05-18停用；05-20因病情需要再次使用万古霉素1.0 g ivgtt q12 h治疗，05-23调整剂量为1.0 g ivgtt q8 h。05-26复查肝功示ALT 72.6.00 U/L，AST 31.8 U/L，出现转氨酶进行性小幅升高，继续万古霉素抗MRSA治疗，符合《EASL：药物性肝损伤的临床实践指南》[14]。05-29两次复查肝功示：ALT 203.8 U/L，AST 85.5 U/L；ALT 235.00 U/L，AST 102.00 U/L，提示ALT≥3倍正常值上限，出现急性肝损伤，停用万古霉素，给予甘草酸二铵保肝治疗，06-04出院并停用甘草酸二铵。06-25随访肝功能完全恢复正常。万古霉素治疗前后ALT、AST指标变化见图1。
图 1 万古霉素治疗前后肝功能指标变化
临床药师以诺氏评估量表作ADR关联性评价，评分为9分，患者肝损害与万古霉素不良反应发生有时间上的关联，高度可能为万古霉素引起肝功能损伤。万古霉素导致肝损伤报道例数较少[15-18]，以血清转氨酶升高为主[15-18]，临床表现可为无症状性肝损伤或急性肝损伤。本例患者系无症状性急性肝损伤，提示关注万古霉素长疗程治疗中肝损伤ADR。
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临床药师作为医疗团队中的一员，在药物使用过程中，尤其在药物浓度监测和药学监护方面发挥了重要作用。在该患者治疗过程中，临床药师查阅指南、文献及药品说明书，协助医师做好抗感染治疗方案的制定，并结合临床疗效，加强抗感染治疗的药学监护，分析治疗效果不佳原因，并有针对性地提出建议与改进措施，包括调整合并用药及药物剂量，避免和减少了万古霉素相关的RMS、肝肾功能损伤不良反应对患者进一步伤害，使患者临床获益更多。
The pharmaceutical care by clinical pharmacists for a foot injury patient with postoperative MRSA infection
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摘要:
目的 探讨临床药师在术后感染MRSA患者药物治疗监护中作用。 方法 通过参与制订抗感染治疗方案、选择抗菌药物、识别MRSA感染高危因素、评估万古霉素疗效、利用TDM技术调整剂量，以及对万古霉素不良反应监护及处理。 结果 在临床药师的药学监护下，患者得到有效治疗，避免了万古霉素相关不良反应的进一步伤害。 结论 临床药师在促进患者及时康复、精准安全用药中发挥了重要作用。 -
关键词:
- 临床药师 /
- 万古霉素 /
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 /
- 药学监护
Abstract:Objective To explore the clinical pharmacist’s role in drug therapy and monitoring for the patient with postoperative MRSA infection. Methods Clinical pharmacists participated in planning anti-infective treatment, antimicrobial medication selection, identification of high-risk factors for MRSA infection, evaluation of vancomycin efficacy, dosage adjustment using TDM technology, monitoring and management of vancomycin adverse reactions. Results With the pharmaceutical care provided by clinical pharmacists, the patient received effective treatment with minimal vancomycin-related adverse reactions. Conclusion Clinical pharmacists played an important role in accelerating patient recovery by rational and safe medication use. -
Key words:
- clinical pharmacist /
- vancomycin /
- MRSA /
- pharmaceutical care
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传统中药黄芪可补益肝气、活血利水，对各种慢性肝病均具有治疗作用[1]，其有效成分包括黄芪皂苷类、黄芪多糖类、黄芪黄酮类等。其中，黄芪甲苷（AS-Ⅳ）作为《中国药典》规定的中药黄芪的质控标准，是中药黄芪的主要活性成分，具有抗炎、降糖调脂、抗纤维化等作用[2]，已被证实能改善实验性非酒精性脂肪肝[3]。但黄芪甲苷水溶性差、生物利用度低等特点限制了其临床应用前景。本课题组研究人员前期通过对黄芪甲苷进行结构优化改造，提高化合物溶解性，改善药物动力学性质，筛选到水溶性好、成药性佳的小分子化合物HHQ16[4]，具有良好的新药研发前景。
ORM （Orosomucoid）是一种主要由肝脏合成分泌的急性期蛋白，在血清、肝脏及其他外周组织以ORM1亚型表达为主。ORM具有运载药物、免疫调节等多种生物学功能，近年来，其在代谢性疾病中的作用受到越来越多的关注[5]。本课题组研究人员前期研究发现，ORM是一个新的内源性能量调控蛋白，ORM1缺失可导致小鼠肝脏脂质沉积[6]。Zhou等也发现，ORM2可以抑制脂质从头合成，改善肝脏的脂代谢[7]。这些研究都提示ORM可成为治疗肝脏脂代谢相关疾病的潜在靶标。
本研究中采用游离脂肪酸（FFA）诱导肝细胞脂质损伤模型，探讨全新小分子化合物HHQ 16对肝细胞脂质沉积的改善作用及对ORM信号的调控作用。
1. 材料与方法
1.1 试剂
油红O（0684，Amresco）、棕榈酸钠（Macklin）、油酸（Sigma）、牛血清白蛋白（Sigma）、异丙醇（80109218，国药集团）、α1 酸性糖蛋白抗体（Genway Biotech Inc.）、GAPDH 抗体（Affinity）、Tubulin 抗体（Affinity）、抗兔 IgG 抗体（Rockland）、油红O染色试剂盒（Solarbio）、细胞及组织总蛋白抽提试剂盒（数谱生物）、NC 膜（GE Amersham）、NC 膜平衡液（VisualProtein）、封闭液（VisualProtein）、蛋白酶抑制剂三联装（上海碧云天生物有限公司）、蛋白质预染色标记（上海碧云天生物有限公司）。
1.2 实验仪器
酶标检测仪（Epoch BioTeK）、涡旋混合器（MX-F Servicebio）、台式高速冷冻离心机（D3024R，大龙）、蛋白电泳仪（Bio-Rad Laboratories，Inc）、蛋白快速湿转仪（GenScript，Inc.）、荧光扫描仪（Li-COR Biosciences）、制冰机（Scotsman Industries Inc.）、电热恒温水浴锅 SVT3100（杭州瑞城仪器有限公司）、PCR 扩增仪（Thermo Fisher Scientific）、QuantStudio 3 实时荧光定量PCR仪（ABI）。
1.3 实验细胞
小鼠肝细系 AML12，购自中国科学院细胞库。培养液配方：DMEM/F-12 （1∶1）、FBS（Fetal bovine serum）、1‰ ITS 液体补充剂、1‰双抗生素。培养条件：5%CO2、37 ℃恒温孵育箱。
1.4 细胞 FFA 模型构建
1%BSA配制：100 mg 牛血清白蛋白（BSA）加入10 ml双蒸水，振荡混匀，4 ℃保存备用；12 mmol/L油酸（OA）储备液（12.976 mg）加入5 ml 1% BSA 溶液中，振荡混匀，0.22 μm微孔滤膜进行滤菌处理，4 ℃保存；6 mmol/L 棕榈酸钠（PA）储备液（8.352 mg）加入5 ml 1% BSA溶液，60 ℃水浴加热混匀至无沉淀析出，0.22 μm微孔滤膜进行滤菌处理，4 ℃保存，冷却之后出现沉淀为正常形象，不高于 60 ℃水浴加热后可继续使用。接种细胞：将 AML12小鼠肝细胞接种于6孔板，密度约为106 个/孔，每组复孔为3，在 37 ℃、5%CO2 恒温培养箱培养。细胞造模：弃去完全培养基，按照OA∶PA=800 μmol/L∶400 μmol/L 的比例，用无血清培养基稀释药物储备液（即配即用），刺激细胞 24 h，构建 FFA 脂质沉积模型；同样按照OA∶PA=1 000 μmol/L∶500 μmol/L 的比例刺激细胞 24 h，构建 FFA 脂质损伤模型。在药物处理前，更换含PA、OA的无血清培养基，用于后续实验。
1.5 Western-blot
用PBS漂洗AML12细胞2次后，提取细胞总蛋白，参照碧云天BCA（Bicinchoninic Acid Assay）蛋白浓度测定试剂盒说明书测量蛋白浓度，加入1/4体积的5X蛋白上样缓冲液，沸水煮10 min，按20 ng蛋白/孔上样电泳，转膜，封闭1 h，一抗ORM（1∶1 000），GAPDH（1∶5 000），Tubulin（1∶5 000）4 ℃孵育过夜，二抗（1∶10 000）37 ℃孵育1 h。ECL法显色曝光，使用ImageJ图像分析软件测定蛋白灰度值。
1.6 CCK8
接种细胞：将AML12 接种于 96 孔板，密度约 104个/孔，每组复孔为 6。药物刺激：弃去培养基，用无血清的培养基加不同浓度 FFA（OA∶PA=2∶1）刺激细胞 24 h 后，在原培养基里加入浓度为 1 μmol/L 黄芪甲苷衍生物 HHQ16 刺激 12 h。CCK8 检测：弃去培养基，每孔加 100 μl 无血清培养基，快速加入 10 μl CCK8 （Cell Counting Kit-8）溶液，勿产生气泡，放入培养箱孵育 15、30、60、120 min。吸光度测定：在上述时间点测定 450 nm 处A值，根据不同组之间的A值计算组间差异。
1.7 实时定量PCR
采用AG RNAex Pro RNA 提取试剂（艾科瑞生物，中国），按照说明书提取小鼠肝脏和小鼠肝细胞（AML12）的RNA，随后采用Evo M-MLV 反转录试剂盒（艾科瑞生物，中国）将RNA逆转录为cDNA，逆转录反应条件如下：37 ℃ 15 分钟、85 ℃ 5 秒、4 ℃ ∞。以GAPDH为内参，采用实时荧光定量 PCR 方法对目的基因进行定量分析，通过 2−△△Ct 计算目的基因在不同组别之间的表达差异。反应条件如下，保持阶段 ，95 ℃ 10 分钟 ；循环阶段 ，95 ℃ 15 秒 （40 个循环） ，60 ℃ 1 分钟 ；熔化曲线阶段， 95 ℃ 15 s，60 ℃ 1 min，95 ℃ 15 s。引物序列见表1。
表 1 相关引物序列基因 上游序列（5'—3'） 下游序列（5'—3'） ORM1 ACACAATAGAGCTTCGGGAGT ATATCTGGCCTTTTGGCATAGA GAPDH CCAATGCACCACTGCTTAG GGATGCAGGGATGATGTTCT 1.8 甘油三酯含量测定
样品前处理：直接在培养板中裂解细胞，按100 μl/106 加入裂解液，混匀后静置 10 min，取适量上清液，70 ℃加热 10 min，室温 2 000 r/min离心5 min，上清液直接用于酶学测定，余下裂解液参照 BCA 蛋白定量试剂盒进行蛋白定量或−20 ℃保存备用。
样品测定：选取96孔板，分为样品孔、标准孔和空白孔，每孔分别加入10 μl待测样品、标准品及蒸馏水，再加入190 μl工作液，37 ℃或 25 ℃反应 15 min，反应平衡后在60 min内稳定，根据吸光度值计算待测样本甘油三酯浓度。
1.9 油红染色
移除细胞培养基后，用PBS洗涤两次后，加油红O固定液固定20～30 min。弃去固定液，用蒸馏水洗涤2次，加入60%异丙醇浸洗20～30 s。弃去60%异丙醇后加入新配置好的油红O染色液，浸染10～20 min。弃去染色液，60%异丙醇漂洗20～30 s至间质清晰，水洗2～5次，直至无多余染液。加入Mayer苏木素染色液，复染核1～2 min，弃去染液后水洗2～5次，加入油红O缓冲液孵育1 min，弃去。加入蒸馏水覆盖细胞并在显微镜下观察。采用 ImageJ软件对免疫组化阳性细胞占区域面积比进行统计并分析数据。
1.10 ORM1 的 siRNA 验证与筛选
ORM1基因的siRNA由广州锐博生物技术有限公司构建，序列见表2。
表 2 基因转染序列siRNA 序列 siORM1-1 GCAGGCAATTCAAACAATG siORM1-2 CAACTTCACCATAGGCGAA siORM1-3 CCACCAACTTGATAAACGA 接种细胞：AML12细胞接种于12孔板，密度约 106个/孔，每组复孔为3。
siRNA 孵育液配置：采用Polyplus Transfection公司INTERFERin转染试剂，以12孔板为例，取1 μl siRNA溶液，加入200 μl DMEM/F12培养基，混匀离心，再加入5 μl INTERFERin 转染试剂，再次混匀离心，室温孵育10 min。
转染：更换原培养基为含1% FBS的完全培养基，每孔加入siRNA 孵育液200 μl，48 h后收集细胞总蛋白、总RNA。
验证：根据蛋白和基因水平确定最佳干扰序列。
1.11 数据统计与分析
本实验采用GraphPad Prism 9.0软件进行数据统计与分析。单因素两组之间相互比较，采用student t检验分析；单因素多组之间相互比较，采用单向方差分析 one way ANOVA 检验；组间均值两两比较采用 Dunnett’s multiple comparisons test 检验。实验结果均采用（均数±标准误）表示。 若P<0.05 ，则认为差异具有统计学意义。
2. 结果
2.1 HHQ16改善肝细胞脂质沉积
用经典FFA（OA:PA=2:1）进行脂质沉积造模，在小鼠AML12细胞上，当OA∶PA=200 μmol/L∶100 μmol/L时，开始出现脂质沉积，当OA：PA=400 μmol/L∶200 μmol/L时，可见明显脂质沉积（图1A），但当OA∶PA=800 μmol/L∶400 μmol/L时才发生肝细胞活力下降（图1B）。在给予药物HHQ16 后，可缓解FFA导致的脂质沉积，降低甘油三酯水平，恢复肝细胞活力（图1C~F）。
图 1 HHQ16改善肝细胞脂质损伤A. 不同浓度FFA造模后脂质沉积情况（n=3）; B.不同浓度FFA造模后肝细胞活力 （n=6）; C. HHQ16恢复FFA损伤的肝细胞活力; D. HHQ16（1 000 nmol/L）降低甘油三酯水平（n=3）, FFA（OA∶PA=800 μmol/L∶400 μmol/L）; E、F. HHQ16 （1 000 nmol/L） 缓解FFA导致的脂质沉积 （n=3）, FFA（OA∶PA=400 μmol/L∶200 μmol/L）*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001，与FFA组比较；#P<0.05, ###P<0.001，与空白组比较。2.2 HHQ16升高肝细胞ORM表达
分别用相同剂量的黄芪甲苷和HHQ16处理AML12肝细胞，发现相较于黄芪甲苷，改造后的HHQ16能更显著地提高细胞内ORM水平（图2A）。进一步时效和量效实验显示，HHQ16可以时间依赖性与剂量依赖性地升高ORM的表达水平（图2B、2C）。此外，CCK8实验结果显示，黄芪甲苷与HHQ16在最高实验剂量（1 000 nmol/L）下均未对AML12细胞活力产生影响（图2D），说明该实验浓度下药物无细胞毒性。
图 2 HHQ16显著升高ORM表达A. 黄芪甲苷（AS-IV 100 nmol/L）与HHQ16 （100 nmol/L）处理AML12肝细胞24 h对ORM蛋白表达的影响; B. HHQ升高AML12肝细胞ORM表达的量效实验; C. HHQ升高AML12肝细胞ORM表达的时效实验; D. 黄芪甲苷（AS-IV 100 nmol/L）与HHQ（100 nmol/L）处理24 h对AML12肝细胞活力的影响（n=10）2.3 HHQ16调控ORM上游多个转录因子
研究人员初步探索了HHQ16调控ORM表达的机制，HHQ16能显著升高肝脏ORM主要亚型ORM1的mRNA水平（图3A），提示HHQ可能在转录水平调控ORM1表达。据文献报道，ORM的表达受C/ebp-β、雄性激素受体（Ar）和雌性激素受体（Er）等转录因子调控[8–10]。检测这3个转录因子的表达水平，发现HHQ16给药不影响C/ebpβ的mRNA表达水平（图3B），但Ar的mRNA表达水平上升至原来的2倍左右（图3C），同时Er-α的mRNA表达水平下降到原来的1/2左右（图3D）。提示HHQ可能通过影响上游转录因子Ar和Er的表达，进而升高肝细胞内ORM水平。
图 3 HHQ16对ORM上游的影响（n=4）A.HHQ16升高ORM mRNA水平；B.HHQ16不影响C/ebpβ mRNA水平；C.HHQ16升高Ar mRNA水平；D-F.HHQ16对Er mRNA水平的影响，D.Er-α，E.Er-β，F.Er-γ*P<0.05, ***P<0.001，与DMSO组比较。2.4 HHQ通过ORM发挥改善肝细胞脂质损伤的作用
小鼠ORM共有3个亚型，其中，ORM1为肝脏中表达的主要亚型[5]。为验证HHQ16是否通过ORM1发挥药效，设计了ORM1的siRNA，利用实时定量PCR、Western blot验证不同siRNA序列的干扰效率，综合二者结果得出siORM1-3序列的干扰效果最佳，后续实验均采用siORM1-3序列（图4A、B），发现HHQ16改善FFA诱导的AML12细胞脂质沉积的作用被逆转（图4C、D），说明HHQ可能是通过调控ORM1来改善肝细胞脂质沉积的。
图 4 HHQ通过ORM改善FFA诱导的肝细胞脂质损伤A. siORM处理后ORM蛋白水平变化；B. siORM处理后mRNA水平变化（n=4）；C、D. FFA、HHQ、siORM处理前后脂质沉积情况（n=3）** P<0.01,*** P<0.001，与阴性对照组比较；###P<0.001，与空白组组比较；△△△P＜0.001，与FFA组比较。3. 讨论
肝脏作为脂质与脂蛋白摄取、合成与分泌的主要器官，在全身脂质循环中发挥着至关重要的作用。其中，肝脏因子作为肝脏组织分泌的蛋白质，除影响肝脏局部脂质代谢外，还可通过自分泌、旁分泌、内分泌等途径调节全身的脂质代谢。本课题组研究人员前期研究发现，肝脏因子ORM在能量代谢调控中发挥重要作用，ORM1敲除小鼠会出现严重脂肪肝[5]。Zhou等也报道了ORM2缺陷会导致肝内甘油三酯沉积、肝脂肪变性，而补充ORM2能通过影响固醇调节元件来改善肝脏脂质代谢[7]。这些研究都提示，ORM有望成为治疗肝脏脂质代谢异常的新靶标。
传统中药在脂肪性肝病的治疗预防方面已经有数千年的治疗史，多种有效成分被发现具有降脂、抗氧化、缓解脂肪肝等作用，如水飞蓟素（水飞蓟主要有效成分）可提高肝脏抗氧化能力，促进肝细胞修复与再生[11]；淫羊藿苷（中药淫羊藿的主要成分）可通过提高大鼠葡萄糖利用率与胰岛素敏感性，达到一定的降脂作用[12,13]；黄芪甲苷可通过增加胆固醇的排出[14]，降低肝脏与血液中的总胆固醇与甘油三酯水平[15]。然而，许多天然的活性成分不稳定，提取物的质量受光照、环境温度、湿度、时间等因素影响，这在一定程度上限制了中药提取物的临床应用。本课题组前期通过对黄芪的主要有效成分黄芪甲苷进行化学改造，得到化学稳定性更高，生物利用度更好的全新小分子药物HHQ16。本文研究发现，黄芪甲苷衍生物HHQ16可以显著升高肝细胞ORM水平，并且对ORM的调控优于其前体黄芪甲苷。初步机制探索发现，HHQ16可以升高转录因子Ar的水平，并降低Er表达。据文献报道，Ar可通过结合ORM1增强子区域增强ORM的表达[8]，而Er激活后则通过MAPK通路抑制ORM表达[9]，提示HHQ可能通过多条途径提高ORM水平。同时，本研究发现，HHQ16改善肝细胞脂质沉积的作用是由ORM介导的，初步阐明了HHQ16改善肝细胞脂质沉积的机制，为HHQ16进一步开发成为干预与治疗肝脏脂质代谢紊乱相关疾病的潜在药物提供了理论支撑。
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[1] BERRÍOS-TORRES S I, UMSCHEID C A, BRATZLER D W, et al. Centers for Disease Control and Prevention Guideline for the Prevention of Surgical Site Infection, 2017[J]. JAMA Surg,2017,152(8):784-791. doi: 10.1001/jamasurg.2017.0904 [2] 巴特利特, 奥威特, 等. ABX指南: 感染性疾病的诊断与治疗[M]. 北京: 科学技术文献出版社, 2012 [3] 葛瑛. 《耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染防治专家共识》解读[J]. 中国临床医生, 2014, 42(3):11-12. [4] 万古霉素临床应用中国专家共识(2011版)[J]. 中国新药与临床杂志, 2011, 30(8): 561-573 [5] BRATZLER D W, DELLINGER E P, OLSEN K M, et al. Clinical practice guidelines for antimicrobial prophylaxis in surgery[J]. Am J Health Syst Pharm,2013,70(3):195-283. doi: 10.2146/ajhp120568 [6] RYBAK M J, LE J, LODISE T P, et al. Therapeutic monitoring of vancomycin for serious methicillin-resistant Staphylococcus aureus infections: a revised consensus guideline and review by the American Society of Health-System Pharmacists, the Infectious Diseases Society of America, the Pediatric Infectious Diseases Society, and the Society of Infectious Diseases Pharmacists[J]. Am J Health Syst Pharm,2020,77(11):835-864. doi: 10.1093/ajhp/zxaa036 [7] 何志超, 伍俊妍, 邱凯锋. 万古霉素个体化给药临床药师指引[J]. 今日药学, 2015, 25(2):78-82. [8] ÁLVAREZ R, LÓPEZ CORTÉS L E, MOLINA J, et al. Optimizing the clinical use of vancomycin[J]. Antimicrob Agents Chemother,2016,60(5):2601-2609. doi: 10.1128/AAC.03147-14 [9] 唐莲, 严晓薇, 彭秋菊, 等. 肾功能亢进患者万古霉素血药浓度监测与临床疗效分析[J]. 中国医院药学杂志, 2018, 38(15):1629-1632. [10] 王凌, 眭玉霞. 渗透性治疗对神经危重症患者万古霉素血药浓度的影响[J]. 中国执业药师, 2016, 13(010):3-5. [11] HOBBS A L, SHEA K M, ROBERTS K M, et al. Implications of augmented renal clearance on drug dosing in critically ill patients: a focus on antibiotics[J]. Pharmacotherapy,2015,35(11):1063-1075. doi: 10.1002/phar.1653 [12] HEALY D P, SAHAI J V, FULLER S H, et al. Vancomycin-induced histamine release and "red man syndrome": comparison of 1- and 2-hour infusions[J]. Antimicrob Agents Chemother,1990,34(4):550-554. doi: 10.1128/AAC.34.4.550 [13] 广东省药学会. 临床药师术后疼痛管理指引[J]. 今日药学, 2019, 29(4):217-227. [14] European Association for the Study of the Liver. Clinical Practice Guidelines: Drug-induced liver injury. J Hepatol, 2019, 70(6): 1222-1261. [15] 周红玲, 刘年开, 丁楠. 万古霉素致严重肝损害1例[J]. 中国执业药师, 2012, 9(10):40-41. [16] 梁瑜, 孟真, 仓怀芹, 等. 注射用盐酸万古霉素致急性药物性肝损伤1例分析[J/OL]. 中国药物警戒, (2020-12-28) [2021-05-12]. http://kns.cnki.net/kcms/detail/11.5219.R.20201228.1229.002.html [17] SERRANTI D, MONTAGNANI C, INDOLFI G, et al. Antibiotic induced liver injury: what about children? J Chemother,2013,25(5):255-272. doi: 10.1179/1973947813Y.0000000090 [18] CADLE R M, MANSOURI M D, DAROUICHE R O. Vancomycin-induced elevation of liver enzyme levels[J]. Ann Pharmacother,2006,40(6):1186-1189. doi: 10.1345/aph.1G668 -
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