下载:
下载:
-
赤芍（Paeoniae Radix Rubra）为毛莨科植物芍药（Paeonia lactiflora Pall）或川赤芍（Paeonia veitchii Lynch）的干燥根，应用历史悠久，首载于《神农本草经》。赤芍之名最早在南北朝时期陶弘景所撰写的《本草经集注》中明确提出[1]；其味苦，性微寒，归肝经，具有清热凉血、散瘀止痛、活血之功效，多用于热入营血，血热吐衄，斑疹紫暗，温毒发斑，热毒血瘀，肝郁肋痛等证[2-4]。
现代药理研究表明，赤芍作用广泛，主要含有赤芍苷、黄酮类及其苷、有机酸、挥发油及糖类等多种化学成分。本文就赤芍药理作用的研究进展进行综述，梳理赤芍已明确的药理作用及机制，为赤芍的进一步开发研究和临床应用提供科学依据。
-
继临床上广泛运用赤芍治疗黄疸性肝炎后赤芍的保肝作用成为一个研究热点。现代药理学研究发现，赤芍中发挥保肝作用的活性成分主要有芍药苷、棕榈酸乙酯及亚油酸乙酯。其保护肝脏的主要机制[5]为：抗氧化损伤；抑制炎性因子释放，改善肝脏微循环；降低肝脏总一氧化氮合酶（NOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的活性及NO的量，阻断NO对肝脏的损伤。
-
赤芍主要通过减少氧化剂的产生，调节抗氧化的防御目标系统、维持细胞能量学系统来发挥抗氧化作用[6]。其中，赵艳玲等[7-9]发现芍药苷主要是通过减轻肝组织氧化应激来发挥保护肝脏的作用，它可以通过降低肝组织丙二醛（MDA）和NO的量，逆转还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶4（NOX4）的过度表达，来抑制活性氧（ROS）的产生，增加谷胱甘肽（GSH）的量，从而避免肝氧化损伤。此外，赤芍多糖通过对自由基与超氧阴离子的清除发挥抗氧化作用，且清除率和多糖浓度呈量效关系[10]；有研究表明[11]，赤芍水提物可显著增加小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性，降低MDA量，从而发挥抗氧化活性，赤芍中的没食子酸丙酯同样具有抗氧化作用。
-
赤芍发挥抗炎的化学成分主要有棕榈酸乙酯、亚油酸乙酯等。棕榈酸乙酯可以通过降低肿瘤坏死因子（TNF-α）和白介素-6（IL-6）水平，降低肝脏组织核转录因子κB（NF-κB）的表达，抑制髓过氧化物酶（MPO）活性导致中性粒细胞浸润的减少等[12]，从而发挥抗炎作用来保护肝脏。亚油酸乙酯可通过NF-κB易位受损和抑制丝裂原活化蛋白激酶磷酸化，下调iNOS和环氧合酶-2（COX-2）的表达，减少NO和前列腺素E2的产生，发挥保护肝脏的作用[13]。
-
罗琳等[14]通过体内实验研究发现，赤芍总苷（TPG）下调α-萘异硫氰酸酯（ANIT）诱导的黄疸模型小鼠的血清生化指标（总胆红素、直接胆红素、胆汁酸、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶等）。此外，TPG可通过增加小鼠胆汁分泌量、提高肝组织中的肝药酶及尿苷二磷酸葡萄糖酸转移酶（UDPG-T）的活性，发挥退黄降酶的作用；赤芍还可上调胆碱、5-甲基四氢叶酸水平而起到保肝作用[15]。
-
肝组织中高水平的IL-13与日本血吸虫诱导的肉芽肿相关肝纤维化的发展密切相关，而IL-13受体a2（IL-13Ra2）能减轻纤维化。Li等[16]用赤芍苷对日本血吸虫幼虫通过皮肤感染建立的BALB/c小鼠肝纤维化模型进行治疗，结果显示赤芍苷干预后肝组织中羟脯氨酸（HYP）、胶原蛋白I和III被显著抑制。同时，与模型对照组相比，赤芍苷不仅抑制了小鼠肝组织中IL-13的分泌，还提高了IL-13Ra2的含量。以上结果均表明赤芍苷可以改善日本血吸虫感染引起的肝纤维化。
-
赤芍可通过多种途径，如调节免疫系统、抑制肿瘤细胞G0/G1期的比例及向S期细胞的转化、下调肿瘤细胞中抗凋亡基因蛋白以及上调拮抗促凋亡基因蛋白的表达等，抑制肿瘤细胞的生长和转移，导致肿瘤细胞的死亡。
许惠玉等[17-19]研究表明，TPG主要通过线粒体途径诱导肿瘤细胞死亡。TPG一方面提高细胞内的钙离子浓度，诱导肿瘤细胞的凋亡，另一方面引起线粒体的膜电位下降，并释放细胞色素C到细胞液中。此外，TPG可抑制bcl-2、bcl-xL等的表达，从而上调bax、p16的表达。在免疫系统方面，TPG能够增加荷瘤鼠的胸腺指数、脾指数及白介素-12（IL-12）的分泌，降低白介素-10（IL-10），转化生长因子-β1（TGF-β1）的分泌，改善荷瘤机体的Th1/Th2漂移现象，从而调节荷瘤鼠的免疫功能；TPG通过提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数，增强B淋巴细胞产生抗体的能力和T淋巴细胞的增殖能力，从而调节CD4+/CD8+细胞的比例，达到对化疗后小鼠免疫抑制状态的逆转。
CD4+T细胞分为Thl细胞和Th2细胞，它们分泌着不同的细胞因子。Thl细胞主要分泌白介素-2（IL-2），参与细胞毒性T淋巴细胞（CTL）介导的细胞免疫，在抗肿瘤和抗细胞内感染发挥重要作用；Th2细胞主要分泌白介素-4（IL-4），其功能是刺激B细胞增殖，促进抗体产生，从而参与体液免疫，并在由过敏原引起的抗细胞外感染和免疫应答中起主要作用。而Xu等[20]在TPG对S180荷瘤小鼠抗肿瘤的相关研究中，得出TPG可以上调IL-2和IL-4的表达，通过免疫作用发挥抗肿瘤的作用。相关研究报道[21-22]表明，TPG可通过上调p21、p27、p53的表达和下调增殖细胞核抗原、周期蛋白D的表达，抑制人黑色素瘤的增殖；而TPG通过下调金属蛋白酶-2/9（MMP-2/9）及上调基质金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP-2）水平，使MMP-TIMP达到平衡，从而影响黑色素瘤细胞迁移和侵袭；还可下调细胞多药耐药基因1、拓扑异构酶Ⅱ同工酶、多药耐药相关蛋白1（MRP1）的mRNA及蛋白的表达。也有研究显示[23]，赤芍中的没食子酸和川芎的没食子酸可通过二者的协同作用，诱导LTB4DH抑癌基因的表达来发挥抗肿瘤作用。
-
芍药苷通过抑制细胞凋亡、活化腺苷A1受体、阻断钠通道、减轻细胞钙超载损伤等作用机制发挥保护神经细胞的作用。此外，M胆碱受体、阿片受体、NF-κB也都可能参与了芍药苷对神经系统的作用。有研究表明[24]，芍药苷及其同分异构体芍药内酯苷均能够改善谷氨酸引起的细胞活性的降低，降低活性氧的积累以及调节Bcl-2/Bax的比例，从而发挥一定的神经保护作用，但起到抑制细胞内的Ca2+的超载和钙/钙调蛋白激酶Ⅱ表达的作用为芍药苷，而非芍药内酯苷。同时，Kapoor[25]也报道，芍药苷是通过PC12细胞中的Bcl-2/Bax信号通路防止谷氨酸诱导的神经毒性来发挥神经保护作用。Guo等[26]通过芍药苷可以预防小鼠缺血引起的脑损伤的实验，证明芍药苷可能是一种潜在的对中风时神经损伤的保护剂。
芍药还可以抗抑郁，其作用机制可能是提高单胺类神经递质的量、调节下丘脑-垂体-肾上腺轴的功能异常、修复受损神经元、抑制单胺氧化酶表达、增强神经保护作用等[27]。研究表明[28]，芍药内酯苷和芍药苷均能够降低急性应激小鼠中IL-6的量，并且芍药苷可以降低急性应激小鼠血浆中皮质酮的分泌，芍药内酯苷可以上调急性应激小鼠脑组织中单胺类神经递质水平，进而发挥抗抑郁的作用。Mao等[29]发现芍药苷可减少氧化应激和上调神经生长因子的表达从而表现出抗抑郁作用。TPG可抑制糖基化-氧化应激反应，降低早期糖基化终产物及脂质过氧化产物浓度，抑制应激醛糖还原酶活性，改善D-gal诱导衰老大鼠学习记忆能力，且呈剂量依赖性[30]。Hu等[31]研究发现，以芍药苷为主要成分的中药活性部位JD-30能够明显改善β-淀粉样蛋白侧脑室注射的小鼠和快速老化模型小鼠学习记忆功能的下降。
-
赤芍可以通过避免氧化损伤、调节凋亡基因与促凋亡基因的表达，以及维持细胞内外环境的平衡来发挥对心脏的保护作用。TPG可通过调节多种心肌酶、脂质氧化产物MDA等水平而发挥心肌保护作用[32]，且呈剂量依赖性[33]；TPG还可延长凝血酶原时间和活化部分凝血酶原时间等；TPG亦可明显改善心血管系统功能[34]，降低NOX2和NOX4的表达和NOX的活性[35]，从而减少氧化应激而达到保护肌细胞的作用。芍药苷可抑制促炎介质如TNF-α、IL-1β、iNOS等的上调，从而抑制JNK，p38 MAPK的活化，最终对缺血性脑损伤发挥保护作用[26]。
TPG可以通过降低血液黏度、纤维蛋白原量、红细胞聚集指数、血小板聚集等来发挥抗凝血、抗血栓的作用。一方面，TPG可显著降低血小板与红细胞的聚集，增强红细胞的变形能力，活化及延长凝血酶原时间，降低高、低切变率下全血黏度及血浆黏度，从而减少血栓的生成[36]；另一方面，赤芍的乙醇提取物可舒张内膜，从而激活KCa与KATP介导的AKT-e NOS-c GMP和SOCE-e NOS-c GMP通路，抑制L型钙离子通道，达到扩张血管的作用[37]。
-
章津铭等[38]通过实验发现，高剂量的TPG可抑制幽门结扎型胃溃疡大鼠胃液量、总酸度及胃蛋白酶活性，增加大鼠血清中NO含量，提高血清中SOD活性并降低MDA含量，说明TPG主要是通过减少胃酸分泌、增加胃部血流量和清除氧自由基的能力发挥抗幽门结扎型胃溃疡的作用；Hino等[39]在海马神经元细胞实验中，发现赤芍苷可抑制谷氨酸诱导的细胞内Ca2+的升高、谷氨酸受体介导的膜去极化和谷氨酸诱导的神经元死亡，还可部分抑制代谢型谷氨酸受体5（mGluR5）激活引起的Ca2+升高，但对α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸或N-甲基-D-天冬氨酸受体介导的升高以及海马神经元c-氨基丁酸的产生和释放无影响。这些结果都表明，赤芍苷可通过部分阻止mGluR5依赖性Ca2+释放而发挥抗惊厥作用；Chen等[40]通过实验发现芍药苷可降低组胺能性结节-基底膜核（TMN）c-fos的表达，而腺苷A1受体拮抗剂8-环戊基-1,3-二甲基黄嘌呤（CPT）可逆转赤芍苷诱导的小鼠体内c-fos的变化，且在腺苷A1受体敲除的小鼠中未观察到赤芍苷诱导的睡眠。这些结果都表明，芍药苷可通过腺苷A1受体抑制组胺能系统，从而增加非快动眼睡眠。研究显示[41-42]，芍药苷可抑制β-抑制蛋白2抗体的表达，同时下调环磷酸腺苷-蛋白激酶A信号，改善G蛋白偶联受体信号转导的过度脱敏，降低炎性因子水平，从而抑制人类成纤维样滑膜的增殖和炎症的发生，同时，目前的研究数据表明，芍药苷在发挥神经保护作用时显著降低了AD小鼠NF-κBp65、TNF-α、IL-1β和IL-6的活性，从而达到抑制炎症的作用[43]；Sun等[44]指出芍药苷可以抑制哮喘小鼠的炎症反应；Jiang等[45]报道芍药苷可抑制实验性败血症的全身炎症反应和NF-κB的活化。以上相关研究都证明赤芍对炎症有很好的抑制作用。
对赤芍主要成分、药理作用及机制总结如图1。
图 1 赤芍的主要成分及药理作用和机制
赤芍因其广泛而显著的药理作用，备受国内外中医药界人士的推崇。近年来，随着高效、高灵敏度的检测技术和方法学的进步，多种新的化合物被发现，为赤芍的物质基础及药理作用机制研究提供了更多、更扎实的理论依据。目前，赤芍的研究多集中于单萜苷类成分，研究发现赤芍苷具有保肝、抗肿瘤及神经保护等多种有效作用，但相关的临床药物研究较少。此外，由于中药的多成分、多靶点、多疗效的特点，仅对单一成分的药理作用机制进行研究是不完善的，对其他成分如多糖、黄酮等的药理作用及其机制研究仍不可忽视。因此，明确赤芍的化学成分，阐明其药效物质基础，利用赤芍开发出更多安全有效的药物仍是我们未来需要努力的方向。
Review of pharmacological effects of Paeoniae Radix Rubra
-
摘要: 赤芍具有清热凉血、散瘀止痛的功效。赤芍及其有效成分在保肝、抗肿瘤、保护神经与心脏等方面有着显著的药理作用。通过查阅近年国内外的相关文献发现，赤芍的研究大多集中在作用机制、药物研发及临床应用方面。本文综述赤芍及其有效成分的药理作用研究进展，以期对赤芍的研究和临床应用提供有益的参考。Abstract: Paeoniae Radix Rubra has the effects of clearing heat, cooling blood, dissipating blood stasis and pain relieving (in terms of Chinese medicine). Paeoniae Radix Rubra and its active ingredients have significant pharmacological effects in anti-tumor, protecting liver, nerve and heart. By reviewing the relevant literatures published in recent years, we found that the studies on Paeoniae Radix Rubra are mainly focused in the mechanism of action, drug development and clinical application. In this review, we summarize the research results of the pharmacological effects of Paeoniae Radix Rubra and its active ingredients in order to provide the reference for the future research and clinical application of Paeoniae Radix Rubra.
-
Key words:
- Paeoniae Radix Rubra /
- chemical composition /
- pharmacologic action
-
卡培他滨是一种新型的氟尿嘧啶类口服药，它是5-氟尿嘧啶（5-FU）的前体药物。卡培他滨口服给药方便、依从性好、疗效确切，是治疗结直肠癌的基石药物，但在治疗过程中产生的不良反应（手足综合征等）极大地影响了患者的治疗。手足综合征（HFS）是卡培他滨引起的不良反应中较为特殊的反应，也是卡培他滨在治疗过程中的药物剂量限制性不良反应，主要表现为皮肤红肿、水泡、出血、疼痛。合并使用环氧合酶、尿素霜、维生素B6、奥美拉唑也不能完全阻断手足综合征的发生[1-3]；合并使用中草药如白芍、桂枝、甘草等可降低手足综合征的发生率[4]。口服卡培他滨的患者手足综合征发生率高达60%[1]，严重降低患者用药依从性，严重手足综合征（约17%）的患者只能减少药物摄入量乃至停止服用药物，影响化疗按期、足量进行[5-6]。明确手足综合征的发生机制和有效干预对卡培他滨安全有效的应用具有重要价值。目前手足综合征模型的建立还没有统一的金标准，本实验尝试用ICR小鼠灌胃卡培他滨后建立手足综合征模型，为卡培他滨致手足综合征模型的建立及机制研究提供参考。
1. 材料与方法
1.1 动物与药品
雄性ICR小鼠，SPF级，5周龄左右，共42只小鼠，小鼠由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供。经上海中医药大学动物伦理委员会批准，实验动物伦理审查号为PZSHUTCM210715004。将小鼠随机编号1~42号，对照组ICR小鼠6只，实验组ICR小鼠36只。卡培他滨（商品名希罗达，上海罗氏制药有限公司，规格：0.5 g/片，国药准字号H20073024）；羧甲基纤维素钠（CMC-Na）(国药集团)；离心管（Titan公司）；动物解剖手术器材（瑞沃德公司）；消毒酒精、棉花球、锡箔纸（国药集团）。
1.2 饲养条件与环境
造模前小鼠先饲养1周，保证充足的水源与饲料，42只ICR小鼠自由摄取食物，环境湿度保持区间50%~60%（±5%），控制温度在(23±1) ℃，调节光照为12 h（6: 30至18: 30光照），其余时间为光暗周期。定期观察小鼠培养环境，定期为小鼠更换垫料，清理排泄物。
1.3 给药剂量、方式及周期
卡培他滨0.5 g/片，溶解于10 ml CMC-Na（0.5%）中，制得50 mg/ml悬浊液备用。实验组ICR小鼠（36只），灌胃给药，按275 mg/kg（即小鼠0.15 ml/30g）连续灌胃14 d，2次/d（按照卡培他滨临床给药方案1 250 mg/kg，2次/d的剂量换算）。对照组ICR小鼠（6只），灌胃给予CMC-Na（0.5%）溶液，按照4 ml/kg剂量连续的灌胃14 d，2次/d。
1.4 手足综合征阳性判断标准
1.4.1 小鼠手足综合征观察
取ICR小鼠的后足跖部皮肤组织，用生理盐水冲洗并擦干，以多聚甲醛（4%）对小鼠组织进行固定，石蜡包埋切片，使用苏木精-伊红对小鼠组织染色（H&E染色），使用普通光镜（比例尺5 μm）检测（注：染色呈现蓝色的为表皮层，该层位于淡粉色的角质层和淡蓝色的真皮层之间）。每天肉眼观察，若小鼠出现足跖部特征性改变，立即拍照并记录手足综合征发生时间，每3 d拍照记录小鼠足跖部皮肤变化情况。
1.4.2 小鼠体重观察
实验组与对照组自由饲养1周后称重，记录原始体重，灌胃给药后每3 d对所有实验小鼠称重一次并记录体重变化。
1.4.3 手足综合征阳性参考标准
标准参考美国国家癌症研究所（NCI）关于手足综合征的分级规定，建模实验中若实验小鼠足跖部的皮肤呈现了红色斑块、组织肿胀、角质层脱屑、溃疡、角质层厚度明显增加及其他明显体征者均可判定为手足综合征阳性。
1.5 样本收集方案
1.5.1 手足综合征阳性ICR小鼠的血浆和足趾部皮肤组织样本制备
对于手足综合征阳性的小鼠，在出现手足综合征后，经眼眶采样，用1.5 ml离心管（肝素钠抗凝）取血约0.5 ml，12 000 r/min离心10 min，收集血浆约0.25 ml，置于−80 ℃冰箱冷冻保存。采集小鼠血样后按照实验动物伦理要求规范处死小鼠，用手术剪取小鼠手足部皮肤，生理盐水冲洗后用锡纸包裹住样本并标号。所有样本置于−80 ℃冰箱冷冻保存，所有操作在1 h内完成。
1.5.2 手足综合征阴性ICR小鼠的血浆和足趾部皮肤组织样本制备
小鼠经过14 d给药未出现手足综合征阳性反应，则认定该类小鼠为造模失败小鼠，在第15天对该类小鼠统一进行眼眶采血和足趾部皮肤组织样本收集，方法同“1.5.1”。对照组小鼠在第15天收集样本，方法同“1.5.1”。
1.6 统计分析
数据采用平均值±标准差（mean±SD）表示，组与组之间根据数据分布状态比较采用学生t检验或秩检验，P<0.05认为有统计学差异。制图采用Excel或Graphpad 8.0软件。
2. 结果与讨论
2.1 小鼠体重变化及生存状态
通过对比对照组与实验组ICR小鼠体重变化，发现对照组ICR小鼠，灌胃14 d后，体重明显增加；而实验组ICR小鼠，灌胃14 d后，体重明显降低。表1和图1 为14 d内ICR小鼠的体重变化，实验过程中实验组小鼠死亡3只。
表 1 实验周期内小鼠体重变化情况（m/g，$ \bar{x}\pm s $ ）组别 n 0 d 7 d 14 d 对照组 6 28.54±0.71 32.56±0.88 34.66±1.07 实验组 33 29.07±0.76 26.84±1.74*** 23.15±2.31*** *** P<0.001，与对照组比较。 2.2 小鼠手足综合征病理观察
与对照组ICR小鼠相比，19只实验组小鼠的足底皮肤明显出现红斑、肿涨并出现少许水泡（图2），认为该小鼠出现手足综合征，按照伦理要求将小鼠处死，收集足底皮肤组织样本和血浆样本。
2.3 小鼠足底皮肤H&E染色
将ICR小鼠四肢皮肤用4%多聚甲醛固定后进行H&E染色（因苏木精呈碱性，细胞核内的染色质与胞质内的核酸显紫蓝色；伊红呈酸性，细胞质和细胞外基质中的成分显红色），如图3显示。与正常ICR小鼠相比，手足综合征阳性小鼠皮肤表皮层增厚，角质层呈现粉红色，真皮层呈现浅蓝色，表皮层处在二者之间呈现蓝色。发生HFS小鼠皮肤颗粒层变薄，基底层和棘层间细胞数量减少。正常小鼠角质层明显较薄。
2.4 小鼠手足综合征发生率
ICR小鼠共39只（对照组6只，实验组33只），19只实验组ICR小鼠出现手足综合征阳性症状，发生率为57.58%。实验组ICR小鼠灌胃给药1周，出现手足综合征阳性小鼠与未出现手足综合征小鼠相比：实验组小鼠足底皮肤颜色变深（深红色），少量小鼠四肢掌心有透明水泡样组织出现；在灌胃给药10 d后，实验组小鼠出现手足综合征阳性症状，四肢出现了红斑、脱屑、水泡（红斑出现最多，脱屑其次，水泡最少）等情况。
2.5 卡培他滨及其代谢产物暴露浓度分析
将收集的血浆样本按照前期报道的方法进行卡培他滨及其5种代谢产物（5'-脱氧-5-氟胞嘧啶核苷、去氧氟尿苷、5'-氟-2'-脱氧尿苷、5-氟尿嘧啶、5-氟二氢嘧啶-2,4-二酮[7]）定量（ng/ml，mean±SD）。结果发现，发生手足综合征小鼠与未发生手足综合征小鼠相比，卡培他滨浓度(ng/ml)分别为(58.08±44.54)和(39.23±26.98)，5'-脱氧-5-氟胞嘧啶核苷浓度(ng/ml)分别为(
6047.42 ±3331.94 )和(4442.77 ±2140.44 )，去氧氟尿苷浓度(ng/ml)分别为(2899.28 ±1821.15 )和(2018.81 ±1037.86 )，5'-氟-2'-脱氧尿苷浓度(ng/ml)分别为(112.89±36.85) 和(122.23±19.16)，5-氟尿嘧啶浓度(ng/ml)分别为(46.86±23.08)和(38.33±20.62)，5-氟二氢嘧啶-2,4-二酮浓度(ng/ml)分别为(24.45±14.79)和(27.34±17.84)。卡培他滨及其代谢产物在发生和未发生手足综合征小鼠体内暴露水平均无明显差异（P>0.05，图4）。
图 4 卡培他滨及其代谢产物暴露浓度分析注：Cap：卡培他滨；5-DFCR：5'-脱氧-5-氟胞嘧啶核苷；5-DFUR：去氧氟尿苷；2-DFUR：5'-氟-2'-脱氧尿苷；5-FU：5-氟尿嘧啶；FUH2：5-氟二氢嘧啶-2,4-二酮。3. 讨论
体内药物暴露水平同药物疗效和不良反应密切相关。目前药物暴露水平常用的参数有曲线下面积（AUC）、稳态浓度（css）、峰浓度（cmax）、谷浓度（cmin）等。有研究发现[8]，根据5-FU的AUC调整给药剂量后，患者血液系统出现3~4级不良反应发生率从之前的17.5%下降为 7.6%（P<0.05），黏膜炎的发生率也从5%降低为0%（P<0.01），总生存时间显著增加，从原来的16个月延长到22个月（P<0.01）。因此，5-FU在体内浓度可能成为预测疗效及不良反应的潜在预警生物标志物之一[9-10]。本研究中未发现卡培他滨及其代谢产物同手足综合征具有相关性，但Daher Abdi在20名75岁以上老年患者中发现，卡培他滨及其代谢产物在发生手足综合征患者体内暴露水平明显较高[11]，但体外研究表明，5-FU同手足综合征无明显关联[12]。另有研究表明，手足皮肤局部较高表达的胸苷磷酸化酶可产生局部较高浓度的5-FU，同卡培他滨引发的手足综合征密切相关[13]。总之，卡培他滨引发手足综合征的机制仍需进一步研究。
在卡培他滨致手足综合征模型的建立方面，黎鹏等灌胃给予SD大鼠200~400 mg/d，2次/d，用药1~2周（1周后停药3 d），建立了卡培他滨致手足综合征模型，并认为200 mg/kg的剂量，灌胃2周可较好地建立手足综合征模型（造模成功率77.5%）[14]。但有研究显示，卡培他滨在大鼠体内的代谢过程与人体不同，因大鼠体内胞苷脱胺酶活性较低，5-DFCR通过糖基化生成其他产物，产生的5-FU较少，而卡培他滨在小鼠体内的代谢过程与人体基本相同，可能是最好的动物模型[15-16]；Hiromoto [3]等利用ICR小鼠，灌胃给予200 mg/kg，1次/d，5次/周的方法建立手足综合征模型，3周建立手足综合征模型，但成功率未报道。He和Chen等给予ICR小鼠灌胃200 mg/kg，1次/d，连续灌胃30 d后，6只小鼠中仅有1只未发生手足综合征[17]。前期预实验中，采用灌胃200 mg/kg，2次/d的方法在ICR小鼠上建立手足综合征模型，灌胃1周后，6只小鼠仅有1只发生手足综合征。因此，根据临床卡培他滨用药剂量（1 250 mg/kg，2次/d）换算小鼠剂量为275 mg/kg，2次/d，既缩短了给药时间，又提高了建模成功率（57.6%），且较少有小鼠死亡（3只）。
4. 小结
本实验成功建立了卡培他滨致手足综合征的ICR小鼠模型，在给药时长、造模成功率方面均有一定优势。卡培他滨及其代谢产物在小鼠体内暴露浓度同手足综合征发生可能无关。手足综合征的发生机制仍需进一步研究。
-
[1] 张建军, 李伟, 乐娜, 等. 赤芍及赤芍总单萜、赤芍总酚对热毒血瘀证大鼠的清热凉血散瘀功效[J]. 北京中医药大学学报, 2020, 43(3):196-202. doi: 10.3969/j.issn.1006-2157.2020.03.004 [2] 顾生旺, 刘欢, 蒋兆荣, 等. 重用赤芍联合恩替卡韦治愈重度黄疸腹水型乙型肝炎1例[J]. 肝脏, 2016, 21(11):1010-1011. doi: 10.3969/j.issn.1008-1704.2016.11.035 [3] 曹云, 李树茂, 裘东, 等. 栗锦迁教授治疗慢性舒张性心力衰竭的用药规律[J]. 中国实验方剂学杂志, 2016, 22(16):215-219. [4] 杨明博, 刘皎皎, 李煜国, 等. 大剂赤芍治疗肝病高胆红素血症35例[J]. 现代中医药, 2018, 38(2):45-47. [5] 陆小华, 马骁, 王建, 等. 赤芍的化学成分和药理作用研究进展[J]. 中草药, 2015, 46(4):595-602. doi: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.04.026 [6] LUO C, WANG H, CHEN X X, et al. Protection of H9c2 rat cardiomyoblasts against oxidative insults by total paeony glucosides from Radix Paeoniae Rubrae[J]. Phytomedicine,2013,21(1):20-24. doi: 10.1016/j.phymed.2013.08.002 [7] 魏思思, 赵艳玲, 江凤娟, 等. 重用赤芍治疗ANIT诱导大鼠急性淤胆型肝炎的研究[J]. 中国实验方剂学杂志, 2012, 18(12):151-155. doi: 10.3969/j.issn.1005-9903.2012.12.045 [8] ZHAO Y L, ZHOU G D, WANG J B, et al. Paeoniflorin protects against ANIT-induced cholestasis by ameliorating oxidative stress in rats[J]. Food Chem Toxicol,2013,58:242-248. doi: 10.1016/j.fct.2013.04.030 [9] JIANG F J, ZHAO Y L, WANG J B, et al. Comparative pharmacokinetic study of paeoniflorin and albiflorin after oral administration of Radix Paeoniae Rubra in normal rats and the acute cholestasis hepatitis rats[J]. Fitoterapia,2012,83(2):415-421. doi: 10.1016/j.fitote.2011.12.009 [10] 张伟杰, 王鹏, 杨明俊, 等. 川芎、赤芍多糖活性分析及其比较[J]. 中药材, 2011, 34(10):1569-1574. [11] LI R D, GUO W Y, FU Z R, et al. Hepatoprotective action of Radix Paeoniae Rubra aqueous extract against CCl4-induced hepatic damage[J]. Molecules,2011,16(10):8684-8694. doi: 10.3390/molecules16108684 [12] SAEED N M, EL-DEMERDASH E, ABDEL-RAHMAN H M, et al. Anti-inflammatory activity of methyl palmitate and ethyl palmitate in different experimental rat models[J]. Toxicol Appl Pharmacol,2012,264(1):84-93. doi: 10.1016/j.taap.2012.07.020 [13] PARK S Y, SEETHARAMAN R, KO M J, et al. Ethyl linoleate from garlic attenuates lipopolysaccharide-induced pro-inflammatory cytokine production by inducing heme oxygenase-1 in RAW264.7 cells[J]. Int Immunopharmacol,2014,19(2):253-261. doi: 10.1016/j.intimp.2014.01.017 [14] 罗琳, 窦志华, 吴锋, 等. 赤芍总苷退黄降酶的作用及机制研究[J]. 中国现代应用药学, 2010, 27(4):285-288. [15] WANG R, XIONG A Z, TENG Z Q, et al. Radix Paeoniae Rubra and Radix Paeoniae Alba Attenuate CCl4-induced acute liver injury: an ultra-performance liquid chromatography-mass spectrometry (UPLC-MS) based metabolomic approach for the pharmacodynamic study of Traditional Chinese Medicines (TCMs)[J]. Int J Mol Sci,2012,13(11):14634-14647. [16] LI X Y, SHEN J L, ZHONG Z R, et al. Paeoniflorin: a monomer from traditional Chinese medical herb ameliorates Schistosoma japonicum egg-induced hepatic fibrosis in mice[J]. J Parasitol,2009,95(6):1520-1524. doi: 10.1645/GE-1994.1 [17] XU H Y, CHEN Z W, WU Y M. Antitumor activity of total paeony glycoside against human chronic myelocytic leukemia K562 cell lines in vitro and in vivo[J]. Med Oncol,2012,29(2):1137-1147. doi: 10.1007/s12032-011-9909-9 [18] 许惠玉, 华东, 于晓红, 等. 赤芍总苷对荷瘤鼠体内IL-10、IL-12、TGF-β1分泌及细胞免疫功能的影响[J]. 齐齐哈尔医学院学报, 2009, 30(22):2737-2739. doi: 10.3969/j.issn.1002-1256.2009.22.001 [19] 许惠玉, 官杰, 吴艳敏, 等. 赤芍总苷对环磷酰胺免疫抑制小鼠免疫功能的影响[J]. 齐齐哈尔医学院学报, 2010, 31(20):3193-3195. doi: 10.3969/j.issn.1002-1256.2010.20.001 [20] XU W P, ZHONG W, LIU J L, et al. Study on anti-tumor effect of total glycosides from Radix Paeoniae Rubra in S180 tumor-bearing mice[J]. Afr J Tradit Complement Altern Med,2013,10(3):580-585. [21] 王亚珍, 吕品田, 王凤红, 等. 赤芍总苷对人黑色素瘤A375细胞迁移及侵袭活性的影响[J]. 广东医学, 2012, 33(3):318-320. doi: 10.3969/j.issn.1001-9448.2012.03.009 [22] 王亚珍, 吕品田, 王凤红, 等. 赤芍总苷逆转黑色素瘤细胞株多药耐药的效果及机制研究[J]. 中国全科医学, 2012, 15(3):328-330. doi: 10.3969/j.issn.1007-9572.2012.03.032 [23] WEI L, LIU J, LE X C, et al. Pharmacological induction of leukotriene B4-12-hydroxydehydrogenase suppresses the oncogenic transformation of human hepatoma HepG2 cells[J]. Int J Oncol,2011,39(3):735-745. [24] WANG D, TAN Q R, ZHANG Z J. Neuroprotective effects of paeoniflorin, but not the isomer albiflorin, are associated with the suppression of intracellular calcium and calcium/calmodulin protein kinase II in PC12 cells[J]. J Mol Neurosci,2013,51(2):581-590. doi: 10.1007/s12031-013-0031-7 [25] KAPOOR S. Neuroprotective effects of paeoniflorin: an emerging concept in neurology[J]. Folia Neuropathol,2013,51(1):92. [26] GUO R B, WANG G F, ZHAO A P, et al. Paeoniflorin protects against ischemia-induced brain damages in rats via inhibiting MAPKs/NF-κB-mediated inflammatory responses[J]. PLoS One,2012,7(11):e49701. doi: 10.1371/journal.pone.0049701 [27] 张永超, 黄世敬. 芍药抗抑郁作用机制探析[J]. 环球中医药, 2013, 6(10):795-798. doi: 10.3969/j.issn.1674-1749.2013.10.022 [28] 王强松, 崔元璐. 芍药苷内酯苷和芍药苷对小鼠急性应激模型的比较研究[C]//中国药学会. 2010施慧达杯第十届全国青年药学工作者最新科研成果交流会论文集: 北京: 中国药学会, 2010: 7. [29] MAO Q Q, ZHONG X M, QIU F M, et al. Protective effects of paeoniflorin against corticosterone-induced neurotoxicity in PC12 cells[J]. Phytother Res,2012,26(7):969-973. doi: 10.1002/ptr.3673 [30] 王修银, 成文利, 邝少松, 等. 赤芍总苷改善D-半乳糖诱导衰老大鼠学习记忆能力及机制[J]. 广州医药, 2011, 42(6):41-45. doi: 10.3969/j.issn.1000-8535.2011.06.018 [31] HU Z Y, LIU G, CHENG X R, et al. JD-30, an active fraction extracted from Danggui-Shaoyao-San, decreases β-amyloid content and deposition, improves LTP reduction and prevents spatial cognition impairment in SAMP8 mice[J]. Exp Gerontol,2012,47(1):14-22. doi: 10.1016/j.exger.2011.09.009 [32] LONG J G, GAO M L, KONG Y, et al. Cardioprotective effect of total paeony glycosides against isoprenaline-induced myocardial ischemia in rats[J]. Phytomedicine,2012,19(8-9):672-676. doi: 10.1016/j.phymed.2012.03.004 [33] MO X, ZHAO N, DU X, et al. The protective effect of peony extract on acute myocardial infarction in rats[J]. Phytomedicine,2011,18(6):451-457. doi: 10.1016/j.phymed.2010.10.003 [34] 孙英莲, 王英军, 许荔新. 赤芍总苷对大鼠急性心肌缺血的影响[J]. 中草药, 2009, 40(12):1961-1962. [35] LI J Z, YU S Y, WU J H, et al. Paeoniflorin protects myocardial cell from doxorubicin-induced apoptosis through inhibition of NADPH oxidase[J]. Can J Physiol Pharmacol,2012,90(12):1569-1575. doi: 10.1139/y2012-140 [36] 王琳琳, 丁安伟. 赤芍总苷对大鼠血瘀证模型的影响[J]. 南京中医药大学学报, 2011, 27(6):552-554. doi: 10.3969/j.issn.1000-5005.2011.06.017 [37] JIN S N, WEN J F, WANG T T, et al. Vasodilatory effects of ethanol extract of Radix Paeoniae Rubra and its mechanism of action in the rat aorta[J]. J Ethnopharmacol,2012,142(1):188-193. doi: 10.1016/j.jep.2012.04.035 [38] 林彦君, 章津铭, 瞿燕, 等. 赤芍总苷对实验性大鼠胃溃疡模型的影响[J]. 中国实验方剂学杂志, 2010, 16(6):215-217. doi: 10.3969/j.issn.1005-9903.2010.06.066 [39] HINO H, TAKAHASHI H, SUZUKI Y, et al. Anticonvulsive effect of paeoniflorin on experimental febrile seizures in immature rats: possible application for febrile seizures in children[J]. PLoS One,2012,7(8):e42920. doi: 10.1371/journal.pone.0042920 [40] CHEN C R, SUN Y, LUO Y J, et al. Paeoniflorin promotes non-rapid eye movement sleep via adenosine A1 receptors[J]. J Pharmacol Exp Ther,2016,356(1):64-73. [41] WU H X, CHEN J Y, WANG Q T, et al. Expression and function of β-arrestin 2 stimulated by IL-1β in human fibroblast-like synoviocytes and the effect of paeoniflorin[J]. Int Immunopharmacol,2012,12(4):701-706. doi: 10.1016/j.intimp.2012.01.018 [42] 周婷, 赵福涛, 王汉伟, 等. 芍药苷对胶原诱导型关节炎模型的治疗作用及机制[J]. 中华临床医师杂志(电子版), 2013, 7(5):2047-2050. [43] GU X Y, CAI Z X, CAI M, et al. Protective effect of paeoniflorin on inflammation and apoptosis in the cerebral cortex of a transgenic mouse model of Alzheimer's disease[J]. Mol Med Rep,2016,13(3):2247-2252. doi: 10.3892/mmr.2016.4805 [44] SUN J, WU J F, XU C Q, et al. Paeoniflorin attenuates allergic inflammation in asthmatic mice[J]. Int Immunopharmacol,2015,24(1):88-94. doi: 10.1016/j.intimp.2014.11.016 [45] JIANG W L, CHEN X G, ZHU H B, et al. Paeoniflorin inhibits systemic inflammation and improves survival in experimental Sepsis[J]. Basic Clin Pharmacol Toxicol,2009,105(1):64-71. doi: 10.1111/j.1742-7843.2009.00415.x -
点击查看大图
计量
- 文章访问数: 15438
- HTML全文浏览量: 3812
- PDF下载量: 108
- 被引次数: 0
