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舰艇官兵由于个人空间狭小，工作压力大，气候潮湿，环境嘈杂等因素，睡眠状态易受到影响[1]。因此，较容易出现睡眠障碍，由此可引发各类负性情绪[2]。冯晨曦[3]等观察到在以青壮年为主的海勤人员远航中,焦虑和抑郁情绪明显高于航前。睡眠质量还会影响官兵的生存质量[4]，不利于训练、执勤等任务完成的质量[5]。在舰艇出海训练期间，做到提高官兵睡眠质量，又不干扰正常训练是非常有意义的。本研究利用解郁安神中药香囊挥发油的有效成分，通过嗅闻吸入的无创方式，明显改善了舰艇官兵的睡眠质量，现报告如下。
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在海军某舰艇部队出海训练前1周筛选出有睡眠障碍（匹茨堡睡眠质量指数量表PSQI评分≥8[6]且焦虑评分量表SAS评分≥50[7]）的官兵59人，他们中无精神类疾病及过敏体质。随机分为香囊试验组20人、正念冥想组20人和空白对照组19人。所选官兵均为男性，在年龄、学历、婚姻、岗位、人员素质等方面差别无统计学意义（P>0.05）。三组官兵在治疗前的PSQI评分与SAS评分无统计学差异，具有可比性。
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试验组使用自制解郁安神中药香囊(石菖蒲、柏子仁、当归、荆芥、薰衣草等)。将香囊放置于床头，晚睡前打开香囊袋，将鼻口置于距香囊口约10 cm距离，深嗅3 min，每2周为官兵更换1次香囊，治疗8周。正念冥想训练主要借鉴正念认知疗法 [8-9]。的8周课程结构，每周在指导音频带领下集中训练1次，每次2 h，包括训练和体验分享，其余时间根据课后作业自行训练。空白对照组与香囊试验组和正念冥想组保持相同作息，工作活动。统计比较三组官兵治疗前后的PSQI和SAS评分差值。
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PSQI量表评分，总分≥8表示有睡眠障碍，分值越高表明睡眠障碍越严重。疗效评价标准[10]：根据匹茨堡睡眠质量指数量表PSQI评分减分率进行评价，痊愈：PSQI评分减分率在75％以上；显效：减分率在50％～74％ 之间；有效：减分率在25％～49％ 之间；无效：减分率在25％以内。SAS量表评分，评分<50分无焦虑，≥50分轻度焦虑，≥60分中度焦虑，≥70分重度焦虑[8]。
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采用 SPSS 21.0软件进行数据统计分析，计量资料以均数±标准差(
$\bar x $ ±s)表示。三组PSQI评分与SAS评分前后差值采用单因素方差分析及SNK检验，所有检验均以P<0.05为检验标准。 -
空白对照组PSQI与SAS评分分别升高27.93%、15.56%，提示睡眠障碍和焦虑有不同程度加重，正念冥想组与香囊试验组官兵PSQI评分分别下降24.64%和25.47%，SAS评分分别下降15.27%和15.58%，说明睡眠障碍与焦虑的症状得到明显改善（表1），三组官兵两个量表评分结果经方差分析，P< 0.05，差异有统计学意义。经SNK检验，香囊试验组与正念冥想组在降低PSQI和SAS评分上作用相当，两组降低程度无统计学差异（表2、3、4）。
表 1 3组试验官兵治疗前后PSQI和SAS量表评分情况（分，
$\bar x $ ±s）组别 例数 PSQI评分 SAS评分 治疗前 治疗后 治疗前后差值 治疗前 治疗后 治疗前后差值 正念冥想组 20 10.60±1.85 7.90±2.19 2.70±0.90 58.40±4.93 49.30±4.84 9.10±1.76 香囊试验组 20 10.55±1.91 7.95±1.53 2.60±1.07 58.30±4.72 49.40±4.65 8.90±1.81 空白对照组 19 10.74±1.83 13.74±2.86 −3.00±1.49 58.16±4.68 67.21±3.78 −9.05±1.93 F 142.18 592.08 P 0 0 表 2 3组试验官兵治疗前后PSQI评分差值
组别 例数 α=0.05 的子集 1 2 空白对照组 19 −3 香囊试验组 20 2.6 正念冥想组 20 2.7 P 1 0.795 表 3 3组试验官兵治疗前后SAS评分差值
组别 例数 α=0.05 的子集 1 2 空白对照组 19 −9.0526 香囊试验组 20 8.9 正念冥想组 20 9.1 P 1 0.74 表 4 3组试验官兵PSQI评分结果[例（%）]
组别 例数 痊愈 显效 有效 无效 总有效率 正念冥想组 20 0（0） 0（0） 11（55） 9（45） 11（55） 香囊试验组 20 0（0） 0（0） 11（55） 9（45） 11（55） 空白对照组 19 0（0） 0（0） 0（0） 19（100） 0（0） -
三组实验官兵均能坚持完成治疗项目，治疗期间均未发生明显不良反应。
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最新研究证据表明，战时剥夺睡眠是军人执行军事战斗任务之后罹患创伤后应激障碍、抑郁和焦虑障碍的重要危险因素[11]。本研究空白对照组的结果与吴刚[12]等发现焦虑和抑郁是海勤人员长航过程中易发生的两种负性情绪, 且与睡眠质量密切相关的报告相吻合。姜萍[13]研究显示，舰艇官兵借助药物催眠，极易产生副作用，长期服药还会产生耐受性和依赖性，停药后会出现戒断症状，因此，催眠药不宜长期服用[14]。
正念冥想是近年来研究非药物治疗睡眠障碍的热点，目前许多研究也都证明正念对慢性失眠有较好的疗效[9]。Black等[15]在一项随机对照临床试验中发现：与接受睡眠卫生教育的对照组相比，参加冥想训练的受试者的匹兹堡睡眠质量指数降低更明显。国内王晓明等[16]研究发现受试者的正念冥想水平和睡眠质量呈现显著正相关，冥想训练可以通过降低受试者焦虑水平有效改善睡眠质量。本研究中正念冥想组官兵SAS量表评分变化也证实了这一点。正念训练的效果受到治疗师自身经验与技术的影响，国外实证类文献在报告正念疗效时，会提到正念训练师的培训资质，而目前大多数的国内文献都没有提到培训师的资质以及培训经历[9]，这可能是正念冥想在实践应用中的一个缺陷。
本研究中香囊试验组采用了自行研制的解郁安神中药香囊，借鉴传统中药香囊具有平衡阴阳、开泄腠理、宣畅肺卫、调节脏腑功能的作用[17]，查阅古籍药方及参考现代药理研究进展，本方选用石菖蒲、柏子仁、荆芥、当归、薰衣草等药材研制成粉末制成，通过药材中的挥发油达到改善睡眠治疗的作用。现代药理研究证实，石菖蒲、柏子仁、当归、薰衣草都具有镇静催眠作用[18-21]，荆芥油具有祛痰作用，能缓解密闭船舱内潮湿的气体环境对官兵呼吸道的刺激[22]。通过合理调整中药配比，可以达到宣畅肺卫、解郁清心、安神助眠的作用。试验结果表明解郁安神香囊对失眠障碍的治疗有明显效果，作用与正念冥想相当，但香囊在舰艇上使用更加简单实用、安全可靠。与西药相比，香囊作用相对温和，无不良反应，不影响日常训练。
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解郁安神中药香囊在治疗睡眠障碍，改善睡眠质量方面具有明显疗效，并且简单实用、安全有效、使用方便，在治疗过程中无明显的不良反应，且有简单价廉的优势，是改善舰艇官兵睡眠障碍切实可行的方法，值得在军队中进行推广。
Study on the efficacy of the resolving depression and tranquilizing TCM sachets in alleviating sleep disorders of soldiers in naval vessels
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摘要:
目的 探讨自制解郁安神中药香囊对改善舰艇官兵睡眠障碍的疗效。 方法 在某舰艇部队出海训练前筛选出有睡眠障碍（PSQI评分≥8且SAS评分≥50）的官兵59人，随机分为香囊试验组、正念冥想组和空白对照组。在该舰出海训练期间，香囊试验组给予自制中药香囊治疗，正念冥想组进行正念冥想训练，空白对照组不施加任何干预。 结果 与空白对照组相比，香囊试验组和正念冥想组官兵PSQI与SAS评分均得到明显改善；与干预前相比，正念冥想组与香囊试验组PSQI与SAS评分均明显下降（P<0.01），且下降程度相当。 结论 自制解郁安神中药香囊具有改善舰艇官兵睡眠障碍的作用，疗效相当于正念冥想，且使用简便易于操作，适合于军队中推广。 Abstract:Objective To explore the efficacy of the resolving depression and tranquilizing herbal sachets in alleviating sleep disorders of soldiers in naval vessels. Methods Fifty-nine soldiers with sleep disorders (PSQI scale score ≥8 and SAS scale score ≥50) were selected before training at sea, and were randomly divided into sachet treatment group, mindfulness meditation group and control group. During the training period, the sachet treatment group was given traditional Chinese medicine sachet treatment, the mindfulness meditation group was trained in mindfulness meditation, and the control group was not given any intervention. Results Compared with the control group, the PSQI and SAS scores of soldiers in both the experimental sachet treatment group and the positive meditation group were significantly improved; compared with the pre-intervention data, the PSQI and SAS scores of both the positive meditation group and the sachet treatment group were significantly decreased, and the degree of decrease was comparable. Conclusion The homemade improving depression and tranquilizing TCM sachets have the effect of alleviating the sleep disorders of naval troops served on vessels, which is equivalent to mindfulness meditation. It is easy to use and operate, which is suitable for promotion in the military. -
Key words:
- scent sachet /
- mindfulness meditation /
- sleep disorder /
- scale
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奥卡西平(oxcarbazepine, OXC)是第二代抗癫痫药物，可用于儿童全面强直-阵挛发作，部分伴或不伴继发性全面发作的一线治疗[1]，其具有与传统的抗癫痫药物（AEDs）如苯妥英钠、卡马西平和丙戊酸钠相同的疗效，但其对肝药酶和自身的诱导作用小，药物间相互作用较少，临床上可用于替代传统的AEDs。OXC是卡马西平（carbamazepine, CBZ）的一种10-酮类衍生物，但两者之间的药动学存在差异，OXC的耐受性好且不良反应少[2]。OXC是无活性的前体药物，在体内经过肝脏内细胞溶质芳基酮还原酶的作用转化为具有药理活性的中间代谢产物单羟基卡马西平（monohydroxy carbamazepine, MHD）[3-4]。国际抗癫痫联盟推荐MHD血清浓度的参考范围为3～35 μg/ml[5]，有研究表明，当血药浓度高于30 μg/ml时，容易发生药物不良反应，且在许多患者中，不良反应间歇性的发生与MHD浓度的波动有关[6]。在临床用药中也发现OXC服药后的药物浓度个体化差异大，年龄、性别、体重、肝肾功能等均会影响MHD的药动学参数[7]，故需要对其血药浓度进行监测。本研究在参考既往研究的基础上[8-12]，对色谱条件进行了优化，并简化了血样处理的过程，建立了HPLC法测定OXC活性代谢产物MHD血药浓度的方法，该方法快速、简单、准确、选择性好、灵敏度高，为临床监测血药浓度、调整给药剂量提供了手段。
1. 仪器与材料
1.1 仪器
Agilent 1200高效液相色谱仪（美国Agilent公司）；H1850R型台式高速冷冻离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司）；DHG-9145A型电热恒温鼓风干燥箱（上海恒科仪器有限公司）；SHB-B95A型循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；Discovery DV215CD型分析天平（美国OHAUS公司）；Vortex-5型涡旋混合器（江苏海门市其林贝尔仪器制造有限公司）。
1.2 材料
MHD对照品（美国CATO公司）；内标：奥硝唑（中国食品药品检定研究院）；甲醇、乙腈（色谱纯，上海科丰化学试剂有限公司）；空白血浆（医院血库提供）；超纯水（实验室自制）。
2. 实验方法
2.1 色谱条件
色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18（150 mm×4.6 mm，5 μm），预柱为Eclipse XDB-C18（4.6 mm×12.5 mm，5 μm）；流动相：水-乙腈（80:20，V/V）；流速：1.0 ml/min；柱温：35 ℃；进样量：10 μl；双波长检测：在192 nm处检测MHD，318 nm处检测奥硝唑。
2.2 溶液及血浆样品的配制
2.2.1 储备液的配制
精密称取MHD对照品10 mg于10 ml的量瓶中，用甲醇溶解配制成浓度为1 mg/ml的储备液，置于−20 ℃下保存。
2.2.2 内标工作液的配制
精密称取奥硝唑1.4 mg于10 ml的量瓶中，用甲醇溶解配制成浓度为140 μg/ml的内标工作液，置于−20 ℃下保存。
2.2.3 血浆标准曲线和质控样品的配制
分别精密量取适量储备液，用甲醇稀释成20、50、100、200、300、400、500 μg/ml浓度梯度的标准对照溶液。取以上6个标准对照溶液，加入适量空白血浆，得2、5、10、20、30、40、50 μg/ml系列浓度的血浆标准曲线样品。同法配制相应的低、中、高浓度的血浆质控样品（QC），使得MHD对应的浓度分别为5、15、40 μg/ml。
2.3 血浆样品的预处理
取200 μl血浆样品，加入200 μl内标工作液、400 μl甲醇，涡旋混合30 s，10 ℃条件下13 000 r/min离心10 min，取上清液直接进样。
3. 结果
3.1 专属性试验
通过考察6份不同生物来源的空白血浆样品色谱图、空白血浆样品加入MHD对照品和内标的色谱图，以及临床实际用药后的患者血浆样品色谱图，以此反映方法的专属性。由图1可见，在本实验条件下，被测物MHD与内标的色谱峰分离良好，且血浆中的内源性物质不干扰测定。MHD和内标的保留时间分别为9.5 min和6.1 min。
3.2 标准曲线与线性范围
取上述浓度为2、5、10、20、30、40、50 μg/ml的血浆标准曲线样品按“2.3”项下方法处理。经HPLC法分析，以测得OXC的峰面积与内标峰面积之比（Y）作为纵坐标，以血浆MHD浓度（X）为横坐标，得到回归方程为：Y=0.047 1X+0.022 2（r=0.998 6）。线性范围：根据标准曲线，MHD血药浓度在2～50 μg/ml范围内线性关系良好，其定量下限浓度为2 μg/ml。
3.3 日内、日间精密度和准确度
配制定量下限、低、中、高（2、5、15、40 μg/ml）4种浓度的QC样品各6个，按“2.3”项下方法处理后测定，连续测定3 d，以当天的标准曲线计算QC样品的测定浓度，计算日内、日间精密度以及准确度。经测定，MHD的日内、日间精密度RSD均小于15%，准确度在95.57%～100.59%之间，均符合生物样品的测定要求，结果见表1。
表 1 单羟基卡马西平日内、日间精密度和准确度（n=6）理论浓度
（μg/ml）实测浓度
（μg/ml）RSD（%） RE（%） 日内精密度 日间精密度 2 1.85±0.16 8.64 12.21 −3.63 5 4.93±0.24 4.86 7.68 −4.43 15 14.32±0.37 6.86 6.16 −3.11 40 41.80±1.26 3.03 5.33 0.59 3.4 提取回收率
配制低、中、高（5、15、40 μg/ml）3种浓度的QC样品各6个，按“2.3”项下方法处理。同时另取18份空白血浆，除了不加系列对照品溶液和内标外，按“2.3”项下方法处理，在获得的上清液中加入MHD和内标溶液至相应浓度。进样分析，以每一浓度中2种不同处理方法的峰面积比值计算提取回收率。经测定，本法中MHD的平均提取回收率在89.62%～95.32%之间；内标的平均提取回收率为98.76%，符合生物学样品的分析要求，结果见表2。
表 2 单羟基卡马西平、MHD和内标提取回收率试验结果（n=6）化合物 浓度（μg/ml） 提取回收率（%） MHD 5 89.62±4.82 15 94.67±6.76 40 95.32±4.90 内标 140 98.76±5.92 3.5 稳定性试验
3.5.1 室温稳定性试验
取低、中、高（5、15、40 μg/ml）3种浓度的QC样品各5份，测定即时血药浓度，并在室温条件下放置4 h和10 h后测定样品血药浓度，求得RSD和RE值。经测定MHD血浆样品在室温下放置10 h后仍稳定，RSD均小于4.47%，RE值在1.50%～2.98%之间，结果见表3。
表 3 奥卡西平代谢产物单羟基卡马西平稳定性试验结果 (n=5)储存条件 理论浓度（μg/ml） 实测浓度（μg/ml） RSD（%） RE（%） 室温10 h 5 5.15±0.19 3.60 2.98 15 15.39±0.69 4.47 2.62 40 40.60±0.40 0.98 1.50 冻融3次 5 5.47±0.15 2.83 9.41 15 15.79±0.32 2.06 5.24 40 40.75±1.10 2.71 1.86 处理后36 h 5 5.39±0.27 5.09 7.74 15 15.66±0.58 3.70 4.39 40 39.46±1.80 4.57 −1.34 −20 ℃，30 d 5 5.16±0.23 4.39 3.19 15 14.62±0.39 2.64 −2.53 40 40.37±0.58 1.44 0.93 3.5.2 冻融稳定性试验
取低、中、高（5、15、40 μg/ml）3种浓度的QC样品各5份，测定即时血药浓度，并于−20 ℃冰箱中冷冻保存24 h后室温下解冻1 h后测定，反复冻融3次，求得RSD和RE值。经测定MHD血浆样品反复冻融3次后仍能保持稳定，RSD均小于2.83%，RE值在1.86%～9.41%之间，结果见表3。
3.5.3 处理后的血浆样品在自动进样器中储存的稳定性试验
取低、中、高3个浓度水平的血浆QC样品（5、15、40 μg/ml）各5份，测定即时血药浓度，然后放置在自动进样器内12 h、36 h后再次测定，求得RSD和RE值。经测定处理后的MHD血浆样品在进样器内放置36 h仍能保持稳定，RSD均小于5.09%，RE值在−1.34%～7.74%之间，结果见表3。
3.5.4 长期稳定性试验
取低、中、高3个浓度水平的血浆质控样品（5、15、40 μg/ml）各5份，测定即时血药浓度，并置于−20 ℃冰箱中冻存30 d后取出解冻后测定，求得RSD和RE值。经测定MHD血浆样品在−20 ℃冰箱中冻存30 d后仍能保持稳定，RSD均小于4.39%，RE值在−2.53%～3.19%之间，结果见表3。
4. 讨论
目前，有关MHD的检测方法的文献很多，其中,高效液相色谱法和高效液相色谱-质谱联用法都有报道，后者虽有灵敏度高、专属性强的特点，但其仪器昂贵，且需专业人员进行操作，很难在大部分的医疗机构普及[13-15]。另外，国内外文献报道中多使用固液萃取法或液液萃取法进行血样的前处理，但这种处理过程相对复杂、耗时，且经济成本较高[11, 16]。本方法采用甲醇沉淀蛋白进行血样的前处理，建立了HPLC法测定人血浆中MHD血药浓度的方法，整个过程操作简单、快速，样品分析时间较短，适用于临床大量样品的连续检测。
文献报道的流动相有乙腈-10 mmol/L磷酸二氢钾溶液（33∶67，V/V）[12]、水-乙腈（65∶35，V/V）[17]、水-甲醇-乙腈（64∶30∶6，V/V/V）[18]等。本方法采用了水-乙腈，按不同的配比进行试验，发现当水-乙腈的比例为80∶20时，色谱峰的峰形、出峰时间及分离度最佳。文献采用卡马西平[17]、苯巴比妥[19]和奥硝唑[20]等作为内标，本研究通过筛选发现奥硝唑的保留时间为6.1 min，不仅与MHD的保留时间相近，又能与其有很好的分离，且其性质稳定，满足内标的要求。
本实验建立的测定人血浆中OXC活性代谢产物MHD的HPLC法，MHD线性回归方程中的r=0.998 6，说明血药浓度在2～50 μg/ml范围内具有良好的线性关系，日内、日间精密度RSD均小于15%，准确度在95.57%～100.59%之间，MHD及内标的平均提取回收率在89.62%～98.76%之间。血浆样品的稳定性试验证明，在室温放置10 h、反复冻融、处理后放置进样器36 h以及低温保存30 d的情况下，样品未见明显降解，仍能保持稳定。本研究建立的HPLC法操作快速简单，精密度、回收率高，稳定性好，专属性强，不受血浆中内源性物质的干扰，结果准确可靠，且灵敏度高，适用于奥卡西平临床血药浓度的监测。
目前癫痫治疗主要以药物治疗为主，奥卡西平是第二代抗癫痫药物，我国诸多癫痫病专家也建议将其作为癫痫部分性发作和全面强直阵挛发作的首选药物[21]。但奥卡西平使用过程中可能出现瘙痒、荨麻疹、血管性水肿等超敏反应，包括Stevens Johnson综合征中毒性表皮坏死松解症[22]等，还可引起低钠血症、头晕、胃肠道不适等不良反应，有文献报道，其疗效及不良反应可能与血药浓度密切相关[23]，因此开展奥卡西平血药浓度的测定，能提高药物治疗的疗效，同时可以有效避免或减少可能产生的药物不良反应，提高癫痫患者服药的依从性。本研究建立了测定人血浆中MHD血药浓度的方法，应用于临床，为临床个体化给药提供依据，值得临床推广使用。
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表 1 3组试验官兵治疗前后PSQI和SAS量表评分情况（分，
$\bar x $ ±s）组别 例数 PSQI评分 SAS评分 治疗前 治疗后 治疗前后差值 治疗前 治疗后 治疗前后差值 正念冥想组 20 10.60±1.85 7.90±2.19 2.70±0.90 58.40±4.93 49.30±4.84 9.10±1.76 香囊试验组 20 10.55±1.91 7.95±1.53 2.60±1.07 58.30±4.72 49.40±4.65 8.90±1.81 空白对照组 19 10.74±1.83 13.74±2.86 −3.00±1.49 58.16±4.68 67.21±3.78 −9.05±1.93 F 142.18 592.08 P 0 0 
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表 4 3组试验官兵PSQI评分结果[例（%）]
组别 例数 痊愈 显效 有效 无效 总有效率 正念冥想组 20 0（0） 0（0） 11（55） 9（45） 11（55） 香囊试验组 20 0（0） 0（0） 11（55） 9（45） 11（55） 空白对照组 19 0（0） 0（0） 0（0） 19（100） 0（0）
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