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红花cDNA-AFLP限制性内切酶的选择及银染体系的建立

杨娟 郭美丽

杨娟, 郭美丽. 红花cDNA-AFLP限制性内切酶的选择及银染体系的建立[J]. 药学实践与服务, 2009, 27(6): 421-425.
引用本文: 杨娟, 郭美丽. 红花cDNA-AFLP限制性内切酶的选择及银染体系的建立[J]. 药学实践与服务, 2009, 27(6): 421-425.
YANG Juan, GUO Mei-Li. Choice of restriction endonuclease and establishment of silver-staining method in cDNA-AFLP System for Carthamus tinctorius[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2009, 27(6): 421-425.
Citation: YANG Juan, GUO Mei-Li. Choice of restriction endonuclease and establishment of silver-staining method in cDNA-AFLP System for Carthamus tinctorius[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2009, 27(6): 421-425.

红花cDNA-AFLP限制性内切酶的选择及银染体系的建立

基金项目: 国家自然科学基金资助项目(30772734)

Choice of restriction endonuclease and establishment of silver-staining method in cDNA-AFLP System for Carthamus tinctorius

  • 摘要: 目的:建立适于红花cDNA-AFLP分析酶切组合及银染技术体系,为进一步进行红花重要性状相关基因研究奠定基础。方法:对PstI/MseI和MseI/EcoRI两种限制性内切酶组合酶切效率进行比较,并探讨测序板处理中亲和硅烷和剥离硅烷的用量、测序胶中TEMED的用量、预电泳、温度因素、显色液的配置等银染过程中较关键的几个因素。结果:选用PstI/MseI限制性内切酶组合酶切效率较高,测序板应彻底清洁,TEMED量应适中,应进行30 min预电泳,整个铺板电泳过程保持温度恒定,选用4℃冷藏的碳酸钠做显色液效果好,综合以上几方面能显著提高胶图的质量。结论:本研究建立了适于红花的cDNA-AFLP银染体系,PstI/MseI较MseI/EcoRI酶切组合具有更高的多态性率,能更全面地揭示红花研究材料间更为丰富的遗传变异性;银染过程中成功克服了以往试验中常见的撕胶、背景太深、条纹不清晰等问题。
  • [1] 唐淑慧, 凤美娟, 薛智霞, 鲁桂华.  帕博利珠单抗治疗所致免疫相关不良反应与中医体质的相关性研究 . 药学实践与服务, 2024, 42(5): 217-222. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202311029
    [2] 王耀振, 徐灿, 吕顺莉, 田泾, 张东炜.  钾离子竞争性酸阻滞剂的药学特征研究进展 . 药学实践与服务, 2024, 42(7): 278-284. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202306040
    [3] 张晶晶, 索丽娜, 郑兆红.  89例细菌性肝脓肿的临床特征及抗感染治疗分析 . 药学实践与服务, 2024, 42(6): 267-272. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202302039
    [4] 刘丽艳, 余小翠, 孙传铎.  纳武利尤单抗治疗非小细胞肺癌有效性及安全性的Meta分析 . 药学实践与服务, 2024, 42(): 1-6. doi: 10.12206/j.issn.2097-2024.202310044
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出版历程
  • 收稿日期:  2009-06-18

红花cDNA-AFLP限制性内切酶的选择及银染体系的建立

    基金项目:  国家自然科学基金资助项目(30772734)

摘要: 目的:建立适于红花cDNA-AFLP分析酶切组合及银染技术体系,为进一步进行红花重要性状相关基因研究奠定基础。方法:对PstI/MseI和MseI/EcoRI两种限制性内切酶组合酶切效率进行比较,并探讨测序板处理中亲和硅烷和剥离硅烷的用量、测序胶中TEMED的用量、预电泳、温度因素、显色液的配置等银染过程中较关键的几个因素。结果:选用PstI/MseI限制性内切酶组合酶切效率较高,测序板应彻底清洁,TEMED量应适中,应进行30 min预电泳,整个铺板电泳过程保持温度恒定,选用4℃冷藏的碳酸钠做显色液效果好,综合以上几方面能显著提高胶图的质量。结论:本研究建立了适于红花的cDNA-AFLP银染体系,PstI/MseI较MseI/EcoRI酶切组合具有更高的多态性率,能更全面地揭示红花研究材料间更为丰富的遗传变异性;银染过程中成功克服了以往试验中常见的撕胶、背景太深、条纹不清晰等问题。

English Abstract

杨娟, 郭美丽. 红花cDNA-AFLP限制性内切酶的选择及银染体系的建立[J]. 药学实践与服务, 2009, 27(6): 421-425.
引用本文: 杨娟, 郭美丽. 红花cDNA-AFLP限制性内切酶的选择及银染体系的建立[J]. 药学实践与服务, 2009, 27(6): 421-425.
YANG Juan, GUO Mei-Li. Choice of restriction endonuclease and establishment of silver-staining method in cDNA-AFLP System for Carthamus tinctorius[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2009, 27(6): 421-425.
Citation: YANG Juan, GUO Mei-Li. Choice of restriction endonuclease and establishment of silver-staining method in cDNA-AFLP System for Carthamus tinctorius[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2009, 27(6): 421-425.

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