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鼠曲草简单重复序列间扩增反应体系的建立及优化

江圣圭 董志颖 李卿 赵英魁 黄豆豆 孙连娜

江圣圭, 董志颖, 李卿, 赵英魁, 黄豆豆, 孙连娜. 鼠曲草简单重复序列间扩增反应体系的建立及优化[J]. 药学实践与服务, 2020, 38(1): 42-46,62. doi: 10.3969/j.issn.1006-0111.201909048
引用本文: 江圣圭, 董志颖, 李卿, 赵英魁, 黄豆豆, 孙连娜. 鼠曲草简单重复序列间扩增反应体系的建立及优化[J]. 药学实践与服务, 2020, 38(1): 42-46,62. doi: 10.3969/j.issn.1006-0111.201909048
JIANG Shenggui, DONG Zhiying, LI Qing, ZHAO Yingkui, HUANG Doudou, SUN Lianna. Establish and optimization of inter-simple sequence repeat PCR reaction system of Gnaphalium affine[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2020, 38(1): 42-46,62. doi: 10.3969/j.issn.1006-0111.201909048
Citation: JIANG Shenggui, DONG Zhiying, LI Qing, ZHAO Yingkui, HUANG Doudou, SUN Lianna. Establish and optimization of inter-simple sequence repeat PCR reaction system of Gnaphalium affine[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2020, 38(1): 42-46,62. doi: 10.3969/j.issn.1006-0111.201909048

鼠曲草简单重复序列间扩增反应体系的建立及优化

doi: 10.3969/j.issn.1006-0111.201909048
基金项目: 国家自然科学基金项目(81373954),上海市科委资助课题项目(13ZR1448800)

Establish and optimization of inter-simple sequence repeat PCR reaction system of Gnaphalium affine

  • 摘要: 目的 通过建立并优化鼠曲草简单重复序列间扩增(ISSR-PCR)反应体系,为鼠曲草后续遗传多样性研究提供实验依据。 方法 本研究首先采用单因素实验法和全面实验法优化鼠曲草ISSR-PCR反应体系,然后在最适体系下,分步进行引物及其退火温度的筛选,最后验证该体系的可行性。 结果 ISSR-PCR最适反应体系包括10 μl Premix Taq DNA聚合酶、0.3 μmol/L引物、10 ng DNA模板、灭菌水加至20 μl;从100条通用引物中最终筛选出10条引物;验证结果表明该体系稳定性高、重复性好,且选定引物多态性好。 结论 本研究首次建立了鼠曲草ISSR-PCR扩增体系,并筛选出合适的引物,为鼠曲草后续遗传多样性研究夯实了基础。
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出版历程
  • 收稿日期:  2019-09-12
  • 修回日期:  2019-10-21

鼠曲草简单重复序列间扩增反应体系的建立及优化

doi: 10.3969/j.issn.1006-0111.201909048
    基金项目:  国家自然科学基金项目(81373954),上海市科委资助课题项目(13ZR1448800)

摘要: 目的 通过建立并优化鼠曲草简单重复序列间扩增(ISSR-PCR)反应体系,为鼠曲草后续遗传多样性研究提供实验依据。 方法 本研究首先采用单因素实验法和全面实验法优化鼠曲草ISSR-PCR反应体系,然后在最适体系下,分步进行引物及其退火温度的筛选,最后验证该体系的可行性。 结果 ISSR-PCR最适反应体系包括10 μl Premix Taq DNA聚合酶、0.3 μmol/L引物、10 ng DNA模板、灭菌水加至20 μl;从100条通用引物中最终筛选出10条引物;验证结果表明该体系稳定性高、重复性好,且选定引物多态性好。 结论 本研究首次建立了鼠曲草ISSR-PCR扩增体系,并筛选出合适的引物,为鼠曲草后续遗传多样性研究夯实了基础。

English Abstract

江圣圭, 董志颖, 李卿, 赵英魁, 黄豆豆, 孙连娜. 鼠曲草简单重复序列间扩增反应体系的建立及优化[J]. 药学实践与服务, 2020, 38(1): 42-46,62. doi: 10.3969/j.issn.1006-0111.201909048
引用本文: 江圣圭, 董志颖, 李卿, 赵英魁, 黄豆豆, 孙连娜. 鼠曲草简单重复序列间扩增反应体系的建立及优化[J]. 药学实践与服务, 2020, 38(1): 42-46,62. doi: 10.3969/j.issn.1006-0111.201909048
JIANG Shenggui, DONG Zhiying, LI Qing, ZHAO Yingkui, HUANG Doudou, SUN Lianna. Establish and optimization of inter-simple sequence repeat PCR reaction system of Gnaphalium affine[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2020, 38(1): 42-46,62. doi: 10.3969/j.issn.1006-0111.201909048
Citation: JIANG Shenggui, DONG Zhiying, LI Qing, ZHAO Yingkui, HUANG Doudou, SUN Lianna. Establish and optimization of inter-simple sequence repeat PCR reaction system of Gnaphalium affine[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2020, 38(1): 42-46,62. doi: 10.3969/j.issn.1006-0111.201909048
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