留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码

应中央军委要求,2022年9月起,《药学实践杂志》将更名为《药学实践与服务》,双月刊,正文96页;2023年1月起,拟出版月刊,正文64页,数据库收录情况与原《药学实践杂志》相同。欢迎作者踊跃投稿!

地龙参麦口服液质量标准提高研究

刘栋 华之卉 郝哲 屈俊 王丽军 李明春

刘栋, 华之卉, 郝哲, 屈俊, 王丽军, 李明春. 地龙参麦口服液质量标准提高研究[J]. 药学实践与服务, 2021, 39(1): 68-72. doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202003189
引用本文: 刘栋, 华之卉, 郝哲, 屈俊, 王丽军, 李明春. 地龙参麦口服液质量标准提高研究[J]. 药学实践与服务, 2021, 39(1): 68-72. doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202003189
LIU Dong, HUA Zhihui, HAO Zhe, QU Jun, WANG Lijun, LI Mingchun. Study on the quality control improvement of Dilong Shenmai oral liquid[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2021, 39(1): 68-72. doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202003189
Citation: LIU Dong, HUA Zhihui, HAO Zhe, QU Jun, WANG Lijun, LI Mingchun. Study on the quality control improvement of Dilong Shenmai oral liquid[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2021, 39(1): 68-72. doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202003189

地龙参麦口服液质量标准提高研究

doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202003189
基金项目: 军队医疗机构制剂标准提高科研专项课题(14ZJZ02)
详细信息
    作者简介:

    刘 栋,硕士,副主任药师,研究方向:药物制剂研发与质量控制,Email:liudong13673546650@163.com

    通讯作者: 王丽军,学士,副主任药师,Email:153wlj@163.com
  • 中图分类号: R284.1

Study on the quality control improvement of Dilong Shenmai oral liquid

  • 摘要:   目的  完善地龙参麦口服液的质量标准。  方法  采用薄层色谱法(TLC)对地龙参麦口服液中黄芪、麦冬和五味子进行定性鉴别。采用HPLC法测定制剂中五味子醇甲、羟苯乙酯的含量,色谱柱为Wondasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,检测波长为254 nm,柱温为30 ℃。  结果  TLC色谱图斑点清晰,分离度良好,阴性无干扰。五味子醇甲和羟苯乙酯检测质量浓度线性范围分别为5.81~58.06 μg/ml (r=0.999 9)、25.29~252.94 μg/ml (r=0.999 9);平均加样回收率分别为99.35% (RSD为1.02%)和99.72% (RSD为0.76%)。  结论  该方法简便、快速、准确,能更全面有效地控制地龙参麦口服液的质量。
  • 图  1  黄芪TLC图

    1~3.供试品;4.黄芪对照药材;5.黄芪甲苷对照品;6.阴性对照溶液

    图  2  麦冬TLC图

    1.麦冬对照药材;2~4.供试品;5.阴性对照溶液

    图  3  五味子TLC图

    1~3.供试品;4.五味子对照药材;5.五味子醇甲对照品;6.阴性对照溶液

    图  4  地龙参麦口服液HPLC图

    A.混合对照品;B.供试品;C.缺羟苯乙酯的阴性对照;D.缺五味子的阴性对照;1.羟苯乙酯;2.五味子醇甲

    表  1  加样回收率试验结果(n=9)

    成分样品量(m/mg)加入量(m/mg)测得量(m/mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)
    羟苯乙酯 0.468 80.252 90.717 698.3899.720.76
    0.468 80.252 90.719 198.97
    0.468 80.252 90.721 9100.08
    0.468 80.505 90.976 3100.32
    0.468 80.505 90.970 999.25
    0.468 80.505 90.972 699.58
    0.468 80.758 81.231 9100.57
    0.468 80.758 81.232 2100.61
    0.468 80.758 81.225 399.70
    五味子醇甲0.115 60.058 10.172 698.1199.351.02
    0.115 60.058 10.172 798.28
    0.115 60.058 10.173 299.14
    0.115 60.116 10.230 098.54
    0.115 60.116 10.230 699.05
    0.115 60.116 10.232 6100.78
    0.115 60.174 20.288 599.25
    0.115 60.174 20.291 1100.75
    0.115 60.174 20.290 2100.23
    下载: 导出CSV

    表  2  样品含量测定结果(n=3, mg/ml)

    样品批号羟苯乙酯五味子醇甲
    1609030.437 10.102 6
    1701120.531 90.106 1
    1703280.468 80.115 6
    下载: 导出CSV
  • [1] 刘清源, 冯志祥, 张正臣, 等. 健心乐口服液对心力衰竭的疗效观察[J]. 河南医药信息, 1999(5):46-47.
    [2] 刘清源, 冯志祥, 张正臣. 健心乐口服液强心作用的实验研究[J]. 河南中医药学刊, 2001, 16(2):27-28.
    [3] 郑夺, 张婷, 陈冠, 等. 多指标正交试验优选养心颗粒制备工艺[J]. 药物分析杂志, 2015, 35(7):1218-1222.
    [4] 王发英, 吴查青, 陈张金, 等. 复方鱼腥草合剂中3个有效成分及防腐剂的含量测定[J]. 中国现代应用药学, 2018, 35(3):399-403.
    [5] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典(2015年版) : 一部, 四部[S]. 北京: 中国医药科技出版社, 2015: 66, 155, 302, 通则0502.
    [6] 申琳, 曲佳, 孙永跃. 脉康合剂的质量标准研究[J]. 中国药房, 2016, 27(21):3000-3003. doi:  10.6039/j.issn.1001-0408.2016.21.40
    [7] 于春艳, 邱世鑫, 包晗, 等. 延胡索与常见伪品的快速鉴别方法[J]. 甘肃医药, 2018, 37(10):932-933.
    [8] 刘莉, 李婷婷, 王欣, 等. 安神补心片的薄层色谱鉴别[J]. 中国药业, 2019, 28(19):43-45. doi:  10.3969/j.issn.1006-4931.2019.19.013
    [9] 周亚萍, 谈瑄忠, 毛春芹, 等. 芪术益气润肠颗粒质量控制方法[J]. 中国实验方剂学杂志, 2016, 22(3):67-71.
    [10] 王艳, 胡娟妮, 赵勇, 等. 补中益气丸中黄芪甲苷转移率异常干扰因素研究[J]. 中国药师, 2013, 16(8):1156-1159. doi:  10.3969/j.issn.1008-049X.2013.08.023
    [11] 韩宵, 闫春风, 朱磊, 等. HPLC-ELSD测定益心舒分散片中人参皂苷Rg1, Re, Rb1, Rd和黄芪甲苷[J]. 中国实验方剂学杂志, 2015, 21(16):68-71.
    [12] 叶隽, 陈斌, 余岳林, 等. 高效液相色谱法同时测定清肺抑火片中8个成分的含量[J]. 药物分析杂志, 2017, 37(6):968-974.
    [13] 沈秋莲, 杨育儒, 王庆芬, 等. 枸橼酸钾溶液中抑菌剂的抑菌效果观察[J]. 安徽医药, 2017, 21(4):623-626. doi:  10.3969/j.issn.1009-6469.2017.04.009
  • 加载中
图(4) / 表(2)
计量
  • 文章访问数:  4376
  • HTML全文浏览量:  1788
  • PDF下载量:  42
  • 被引次数: 0
出版历程
  • 收稿日期:  2020-03-29
  • 修回日期:  2020-05-14
  • 网络出版日期:  2021-01-22
  • 刊出日期:  2021-01-25

地龙参麦口服液质量标准提高研究

doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202003189
    基金项目:  军队医疗机构制剂标准提高科研专项课题(14ZJZ02)
    作者简介:

    刘 栋,硕士,副主任药师,研究方向:药物制剂研发与质量控制,Email:liudong13673546650@163.com

    通讯作者: 王丽军,学士,副主任药师,Email:153wlj@163.com
  • 中图分类号: R284.1

摘要:   目的  完善地龙参麦口服液的质量标准。  方法  采用薄层色谱法(TLC)对地龙参麦口服液中黄芪、麦冬和五味子进行定性鉴别。采用HPLC法测定制剂中五味子醇甲、羟苯乙酯的含量,色谱柱为Wondasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,检测波长为254 nm,柱温为30 ℃。  结果  TLC色谱图斑点清晰,分离度良好,阴性无干扰。五味子醇甲和羟苯乙酯检测质量浓度线性范围分别为5.81~58.06 μg/ml (r=0.999 9)、25.29~252.94 μg/ml (r=0.999 9);平均加样回收率分别为99.35% (RSD为1.02%)和99.72% (RSD为0.76%)。  结论  该方法简便、快速、准确,能更全面有效地控制地龙参麦口服液的质量。

English Abstract

刘栋, 华之卉, 郝哲, 屈俊, 王丽军, 李明春. 地龙参麦口服液质量标准提高研究[J]. 药学实践与服务, 2021, 39(1): 68-72. doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202003189
引用本文: 刘栋, 华之卉, 郝哲, 屈俊, 王丽军, 李明春. 地龙参麦口服液质量标准提高研究[J]. 药学实践与服务, 2021, 39(1): 68-72. doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202003189
LIU Dong, HUA Zhihui, HAO Zhe, QU Jun, WANG Lijun, LI Mingchun. Study on the quality control improvement of Dilong Shenmai oral liquid[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2021, 39(1): 68-72. doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202003189
Citation: LIU Dong, HUA Zhihui, HAO Zhe, QU Jun, WANG Lijun, LI Mingchun. Study on the quality control improvement of Dilong Shenmai oral liquid[J]. Journal of Pharmaceutical Practice and Service, 2021, 39(1): 68-72. doi: 10.12206/j.issn.1006-0111.202003189
  • 地龙参麦口服液(曾用名:健心乐口服液)是由地龙、红参、黄芪、麦冬、五味子等五味中药材加工制成的复方非标准制剂,具有利尿、降压、强心、补益气血、养心安神之功效[1-2],在临床上用于各种病因引起的慢性心功能不全、心慌、胸闷、胸痛及各种心律失常,并有利水、抗凝、营养心肌之功效。原质量标准制定年代久远,只有检查项,不能全面控制制剂质量。根据全军医疗机构制剂标准提高课题要求,增加了麦冬、黄芪和五味子的薄层色谱(TLC)鉴别方法。五味子醇甲是方中五味子的有效成分之一,能够保护心肌结构和功能,降低心肌耗氧量,延长供体心的保存时间[3];羟苯乙酯为方中的化学防腐剂,具有广谱抑菌作用,但过量使用会产生变态反应以及类激素作用[4]。为保证制剂的有效性和安全性,本研究采用HPLC法同时测定制剂中有效成分五味子醇甲和防腐剂羟苯乙酯的含量,为提高和完善地龙参麦口服液的质量标准提供可靠的试验依据。

    • LC-10A型高效液相色谱仪,包括SPD-10A型紫外检测器、手动进样器、LC-solutionLite色谱工作站(日本Shimadzu公司);BT125D型电子分析天平(德国Sartorius公司);ZF-2型三用紫外仪(上海市安亭电子仪器厂);电热恒温水浴锅(天津华北实验仪器有限公司);硅胶G薄层板、硅胶GF254薄层板(青岛海洋化工有限公司)。

    • 黄芪甲苷对照品(含量:95.8%,批号:110781-201314)、五味子醇甲对照品(含量:99.9%,批号:110857-201513)、羟苯乙酯对照品(批号:100847-201604,含量:99.9%)、黄芪对照药材(批号:121462-201304)、麦冬对照药材(批号:121013-201310)、五味子对照药材(批号:120922-201309)均购自中国食品药品检定研究院;地龙参麦口服液(批号:170926、171208、180312)和阴性样品为中国人民解放军联勤保障部队第九八八医院自制;乙腈为色谱纯;水为重蒸水;其他试剂均为分析纯。

    • 取本品30 ml,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次20 ml,合并正丁醇液,用1%氢氧化钠溶液洗涤3次,每次20 ml,再用水洗涤2次,每次20 ml,分取正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇1 ml使溶解,作为供试品溶液。另取缺黄芪的阴性样品,同法制成阴性对照溶液。取黄芪对照药材2.0 g,加水饱和的正丁醇60 ml,加热回流30 min,放冷,滤过,滤液同法制成对照药材溶液。再取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液,作为对照品溶液。按照TLC法(《中国药典》2015年版四部通则0502)试验,吸取上述4种溶液各10 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以二氯甲烷-甲醇-水(25∶11∶3)10 ℃以下放置的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105 ℃加热至斑点显色清晰。结果显示,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,且阴性对照无干扰,见图1

      图  1  黄芪TLC图

    • 取本品20 ml,加30%盐酸溶液3 ml,加热煮沸5 min,放冷,用二氯甲烷振摇提取2次,每次30 ml,合并二氯甲烷液,蒸干,残渣加甲醇1 ml使溶解,作为供试品溶液。另取缺麦冬的阴性样品,同法制成阴性对照溶液。取麦冬对照药材2 g,加水50 ml,煎煮30 min,滤过,滤液加30%盐酸溶液6 ml,同法制成对照药材溶液。按照TLC法(《中国药典》2015年版四部通则0502)试验,吸取上述3种溶液各10 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以二氯甲烷-丙酮(12∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105 ℃加热至斑点显色清晰。结果显示,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,且阴性对照无干扰,见图2

      图  2  麦冬TLC图

    • 取本品30 ml,用二氯甲烷振摇提取2次,每次30 ml,合并二氯甲烷液,蒸干,残渣加二氯甲烷1 ml使溶解,作为供试品溶液。另取缺五味子的阴性样品,同法制成阴性对照溶液。取五味子对照药材1.0 g,加二氯甲烷30 ml,超声处理30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加二氯甲烷1 ml使溶解,作为对照药材溶液。再取五味子醇甲对照品,加二氯甲烷制成每1 ml含1 mg五味子醇甲的溶液,作为对照品溶液。按照TLC法(《中国药典》2015年版四部通则0502)试验,吸取上述4种溶液各2 μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以石油醚(30~60 ℃)-甲酸乙酯-甲酸(10∶7∶1)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外灯(254 nm)下检视。结果显示,供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,且阴性对照无干扰,见图3

      图  3  五味子TLC图

    • 色谱柱为Wondasil C18柱 (250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱:0~10 min,35%A;10~20 min,35%A→47%A;20~30 min,47%A→55%A。流速:1.0 ml/min;检测波长:254 nm;柱温:30 ℃;进样量:10 μl。

    • (1)混合对照品溶液:精密称取羟苯乙酯、五味子醇甲对照品各适量,加甲醇溶解并定容,制成每1 ml含羟苯乙酯、五味子醇甲分别为505.89、116.12 µg的混合对照品储备液。精密量取上述混合对照品储备液2 ml,置于10 ml量瓶中,加甲醇定容,摇匀,即得羟苯乙酯、五味子醇甲质量浓度分别为101.18、23.22 µg/ml的混合对照品溶液。

      (2)供试品溶液:精密量取样品2 ml,置于10 ml量瓶中,加50%甲醇溶液定容,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

      (3)阴性对照溶液:分别取缺羟苯乙酯、缺五味子的阴性样品,按照供试品溶液制备方法制得阴性对照溶液。

    • 精密吸取混合对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10 μl,按“2.1”项下色谱条件进样测定,记录色谱图,见图4。结果表明,在该色谱条件下,供试品溶液在与对照品溶液相同保留时间处出峰,阴性对照溶液对羟苯乙酯、五味子醇甲的测定无干扰。

      图  4  地龙参麦口服液HPLC图

    • 精密量取“2.2.2”项下混合对照品储备液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml,分别置于10 ml量瓶中,加50%甲醇溶液定容,摇匀,进样,记录峰面积。以羟苯乙酯和五味子醇甲质量浓度(X)为横坐标、峰面积(Y)为纵坐标进行线性回归,得羟苯乙酯回归方程为Y=58 559.18X−90 593.32 (r=0.999 9),五味子醇甲回归方程为Y=27 155.08X−7 196.072 (r=0.999 9)。结果表明,羟苯乙酯和五味子醇甲检测质量浓度线性范围分别为25.29~252.94、5.81~58.06 μg/ml。

    • 取“2.2.2”项下混合对照品溶液,连续进样测定6次,记录峰面积。结果显示,羟苯乙酯和五味子醇甲峰面积的RSD分别为0.62%、0.45%,表明仪器精密度良好。

    • 取已知含量的供试品溶液,分别于室温下放置0、2、4、8、12、24 h时按进样测定,记录峰面积。结果显示,羟苯乙酯和五味子醇甲峰面积的RSD分别为1.03%、0.85%,表明供试品溶液在室温下放置24 h内稳定性良好。

    • 取同一批样品,平行制备6份供试品溶液,进样测定,记录峰面积并计算样品含量。结果显示,羟苯乙酯和五味子醇甲的含量平均值分别为0.468 8、0.115 6 mg/ml,RSD分别为0.75%、0.85%(n=6),表明本方法重复性良好。

    • 精密量取已知含量的样品(批号:170328)1.0 ml,共9份,分别置于10 ml量瓶中,各加入低、中、高质量的羟苯乙酯和五味子醇甲对照品,按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液,再按“2.2.1”项下色谱条件进样测定,记录峰面积并计算加样回收率,结果见表1

      表 1  加样回收率试验结果(n=9)

      成分样品量(m/mg)加入量(m/mg)测得量(m/mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)
      羟苯乙酯 0.468 80.252 90.717 698.3899.720.76
      0.468 80.252 90.719 198.97
      0.468 80.252 90.721 9100.08
      0.468 80.505 90.976 3100.32
      0.468 80.505 90.970 999.25
      0.468 80.505 90.972 699.58
      0.468 80.758 81.231 9100.57
      0.468 80.758 81.232 2100.61
      0.468 80.758 81.225 399.70
      五味子醇甲0.115 60.058 10.172 698.1199.351.02
      0.115 60.058 10.172 798.28
      0.115 60.058 10.173 299.14
      0.115 60.116 10.230 098.54
      0.115 60.116 10.230 699.05
      0.115 60.116 10.232 6100.78
      0.115 60.174 20.288 599.25
      0.115 60.174 20.291 1100.75
      0.115 60.174 20.290 2100.23
    • 取3批样品各适量,分别按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液,再按“2.2.1”项下色谱条件进样测定,记录峰面积并计算样品含量,结果见表2

      表 2  样品含量测定结果(n=3, mg/ml)

      样品批号羟苯乙酯五味子醇甲
      1609030.437 10.102 6
      1701120.531 90.106 1
      1703280.468 80.115 6
    • 黄芪TLC鉴别时,样品的正丁醇提取液用1%氢氧化钠溶液洗涤,既可以除去酸性、酚类非指标成分,又能促进其他黄芪皂苷转化成黄芪甲苷,增加黄芪甲苷的量[9-11],提高鉴别效果。

      试验过程中,曾进行过红参和地龙的薄层鉴别研究。在对红参的鉴别中,采用不同的展开系统阴性均出现干扰;而在地龙的研究中采用不同供试品处理方法、不同的展开系统均无法显示出地龙的特征性斑点,故质量标准中舍弃了对红参和地龙的薄层鉴别。

    • 本试验考察了甲醇-水、乙腈-0.1%磷酸溶液和乙腈-水3种不同的流动相体系,在满足基线平稳、指标峰分离度良好、峰型对称度好的基础上,从经济环保的角度出发,选用乙腈-水体系。但羟苯乙酯和五味子醇甲极性有一定差别,故采用梯度洗脱法来达到快速检测的目的。

      由紫外吸收图谱可知,羟苯乙酯和五味子醇甲在254 nm附近均有最大吸收,故选择254 nm作为检测波长,操作更加简单、普适性更强[12]

      试验中考察了水、甲醇、乙醇、稀乙醇和50%甲醇作为提取溶剂,结果显示50%甲醇作溶剂时,指标成分无干扰,提取率高。

      本研究曾尝试测定红参中有效成分的含量,将样品采用直接过滤法、蒸干后甲醇超声法、正丁醇萃取法等均无法有效检测出红参中的有效成分,故最终放弃对红参的含量测定。

    • 《中国药典》(2015年版)四部通则0181【合剂】项下规定羟苯酯类防腐剂的用量不得超过0.05%,但所有抑菌剂都有一定的毒性,添加到制剂中的抑菌剂应是在抑菌效力测试试验基础上的最低有效量[13]。样品处方中羟苯乙酯的用量为0.05%,但3批样品的测定结果显示羟苯乙酯的含量差异较大,因而把羟苯乙酯含量也作为质量控制项符合制剂的安全性要求。

参考文献 (13)

目录

    /

    返回文章
    返回